人文教育在医学基础课人体解剖学中的应用探索

“新医科”教育体系是推动医学教育与人文教育相整合的新型教育模式,发挥着实践育人功能。然而,在此背景下如何更好地将人文教育融入临床专业的医学教育值得深思。文章使用医学基础课之一的人体解剖学为例,以人体解剖学教学过程中开展人文教育的专业需求和可行性作为出发点,而后探查人文教育如何高效地融入人体解剖学教学过程,最后通过问卷调查法和访谈法两种方式对教学效果进行评价。结果显示在医学教育中开展人文教育不仅存在强烈的专业需求,有助于临床专业学生增强学习课程的效果。另一方面,人文教育也坚定了医学生对专业的认同感和医生职业的追求,更加懂得大爱与尊重生命。这些为培养适应21世纪全面发展的医学人才奠定了坚实的基础。

慕课+翻转课堂在人体解剖学教学中的研究与实践

人体解剖学课程作为基础医学形态学中的重要组成部分,同时又是医学生进入临床的必修课。因其有着课时量大、专业名词多、实践要求高等特点,而对教师的课堂教学水平有较高的要求。随着一流学科和专业认证的建设发展需要,具有创新性的混合式教学模式如慕课和翻转课堂在课程中得到广泛应用。文章首要归纳了传统人体解剖学教学模式面临的现状和困境并急需优化解决,探讨了分别引入慕课和翻转课堂在人体解剖学教学中具有的优势和不足,同时设想学生以网络自主学习和成为课堂的主导者两者相结合的方式实施“慕课+翻转课堂”,并在人体解剖学课堂教学中得以应用,促进了课堂学习效率,为人体解剖学教学改革提供了新思路。

脑缺血后N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶失活致神经元自噬流障碍的病理机制

缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程呈连续状态则称为自噬流。研究发现,脑缺血可导致自噬体与溶酶体间发生融合障碍,从而引发自噬流损伤。细胞内膜融合由3种核心组分介导,即N-乙基马来酰亚胺敏感因子(N-ethylmaleimide sensitive factor,NSF)ATP酶、可溶性NSF黏附蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAP)及可溶性NSF黏附蛋白受体(soluble NSF attachment protein receptors,SNAREs)。当SNAREs介导自噬体与溶酶体融合后以非活性的复合体形式存留于自噬溶酶体膜,须被NSF再激活为单体后方可发挥新一轮的膜融合介导作用,而NSF是唯一可再激活SNAREs的ATP酶。新近研究表明,脑缺血可显著抑制NSF ATP酶活性,导致其对SNAREs再激活减少,这可能是自噬体与溶酶体间发生融合障碍并导致神经元自噬流损伤的病理机制。本文就NSF ATP酶失活导致SNAREs互作失调、自噬体与溶酶体融合障碍,以及蛋白水解酶向溶酶体的转运不足引发神经元自噬流障碍的病理机制进行阐述,并针对NSF ATP酶失活改善神经元自噬流的方法进行探讨,为提高脑卒中治疗提供参考并指明深入研究方向。

膝关节骨关节炎患者外周血脂联素基因+45T/G和+267G/T单核苷酸多态性观察

目的观察膝关节骨关节炎(OA)患者外周血脂联素基因+45T/G和+267G/T单核苷酸多态性。方法255例膝关节OA患者为观察组,201例健康志愿者为对照组。抽取两组外周静脉血5 m L,采用PCR-限制性片段长度多态性法测定外周血脂联素基因+45T/G和+267G/T位点的单核苷酸多态性。结果两组外周血脂联素基因+45T/G和+267G/T位点SNP均符合HWE平衡。观察组外周血脂联素基因+45T/G、+267G/T等位基因T、G频率分别为64.6%和35.4%、29.2%和70.8%,与对照组相比,P均>0.05。轻度、中重度膝关节OA患者外周血脂联素基因+267G/T位点等位基因T、G频率32.9%和67.1%、24.1%和75.9%相比,P均<0.05。结论中重度膝关节OA患者外周血脂联素基因+267G/T位点上多为GG型基因或携带等位基因G。

五味子醇甲诱导缺血半影区神经元自噬提高脑卒中后神经保护

五味子醇甲(Schisandra A,Sch A)是五味子中具有生物活性的木脂素化合物,其神经保护作用已在多种神经系统疾病动物模型中得到验证。然而,五味子醇甲是否能通过影响大鼠脑缺血半影区神经元自噬活性对脑缺血再灌注大鼠模型产生神经保护作用,尚缺乏系统研究。为探究Sch A对大鼠脑卒中后神经损伤及缺血半影区神经元自噬活性的影响,本研究将90只SD雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型组(MCAO)、Sch A低剂量组(40μg/kg)、Sch A中剂量组(80μg/kg)、Sch A高剂量组(160μg/kg),每组18只。线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,脑缺血持续90 min后进行再灌注,立即侧脑室给药,1/d,连续给药7 d。各组分别取6只大鼠进行神经功能评分后,取脑进行TTC染色检测脑梗死体积。另有6只大鼠取缺血半影区脑组织,通过Western印迹检测自噬相关蛋白质Beclin1、LC3-Ⅱ的表达水平。剩余6只大鼠脑组织用于免疫荧光双标,对Sch A改变的自噬活性进行细胞表达定位。研究结果显示,MCAO组大鼠脑梗死体积及神经功能损伤评分均显著高于Sham组(P<0.05),且Beclin1及LC3-Ⅱ的表达显著增加(P<0.05)。各Sch A治疗组大鼠脑梗死体积较未给药组显著减少(P<0.05),神经功能损伤得到明显改善(P<0.05)。同时,Sch A给药组Beclin1及LC3蛋白质表达水平明显升高(P<0.05),且免疫荧光双标显示该自噬活性改变主要呈现于神经元。以上结果表明,Sch A可显著减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,该神经保护作用与其提高缺血半影区神经元自噬活性密切相关。

自噬和凋亡相关蛋白在脑缺血再灌注大鼠模型中的表达时间谱

目的:寻找脑缺血再灌注(I/R)大鼠模型半暗区中自噬与凋亡在急性期和亚急性期特征转换的时点及其神经保护机制。方法:制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,脑缺血90 min后进行再灌注。分别在I/R后1~12 h、1~7 d、14 d、21 d、28 d以及假手术(sham)组,进行改良神经损伤严重程度评分(mNSS);通过Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和凋亡相关蛋白cleaved caspase-3(C-caspase-3)在不同时点的表达水平,然后分析二者比值的差异变化,根据选择的特征时点用TTC染色评估脑梗死体积,免疫荧光验证LC3表达和TUNEL染色情况。结果:LC3和C-caspase-3蛋白的表达均从I/R后1~6 h逐渐增加(P<0.05),并在12 h达到最高(P<0.05)。不同的是,从12 h~2 d,LC3表达陡然下降(P<0.05),并处于相当低的表达水平,但C-caspase-3表达仅轻微降低。然而,I/R后3 d自噬再次突然升高至6 d(P<0.05),并长期维持在较高水平,但凋亡水平持续降低至28 d(P<0.05)。另外,mNSS在I/R后1 h~4 d持续增加(P<0.05)至最大后趋于稳定,脑梗死体积呈现快速增长(P<0.01)到缓慢增长的趋势(P<0.05),神经功能缺损的严重程度与脑梗死范围的增加呈相似变化。这些结果显示存在自噬和凋亡转化的特征时点--急性期(6和12 h)和亚急性期(2、7和28 d)。免疫荧光和Western blot具有类似的结果。结论:自噬和凋亡在大鼠I/R后12 h内同时被激活,而在2 d后的亚急性期可能存在从凋亡到自噬的转换。

JNK通过增强神经元自噬流提高大鼠缺血性脑卒中后的神经保护

为了探究应激激活蛋白激酶JNK在缺血性脑卒中后对神经元细胞的保护机制,本文采用栓线法构建雄性SD大鼠大脑中动脉梗塞(model of middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。在自噬变化特征性时间点加入JNK激动剂茴香霉素(anisomycin, AN),随后采用Western印迹和免疫荧光检测缺血半影区自噬流通路蛋白质表达水平,分析JNK对Bcl-2-Beclin1复合物稳定性的影响和对自噬流通路的影响。结果显示:与MCAO+Veh组相比:在12 h, AN组LC3(**P<0.01)、Beclin1(**P<0.01)和Bcl-2(*P<0.05)的表达水平显著升高,而切割胱天蛋白酶(cleaved caspase-3)的表达水平显著降低(**P<0.01),以及组织蛋白酶B(cathepsin B)(***P<0.001)和LAMP1(***P<0.001)表达水平均显著升高;在第2天,AN组的组织蛋白酶B(**P<0.01)和溶酶体关联膜蛋白1(recombinant lysosomal associated membrane protein1,LAMP1)(*P<0.05)表达水平显著降低。同时,通过神经功能损伤评分、TTC染色分析JNK活性激活对MCAO大鼠神经功能损伤、脑梗死体积的影响,结果显示:与MCAO+Veh组相比,MCAO+AN组的SD大鼠脑梗死体积显著减少(12 h:***P<0.001,第2 d:*P<0.05)且神经功能评分显著降低(12 h:***P<0.001,第2 d:**P<0.01)。上述结果提示:在缺血性脑卒中的急性期,JNK活性激活促进Bcl-2-Beclin1复合物解离,使神经元凋亡向自噬转换,提高了神经元的存活;在亚急性期,JNK活性激活使自噬产物堆积导致了神经元的自噬性损伤。

激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)诱导凋亡向自噬转换提高氧糖剥夺大鼠神经元的存活

目的探究c-Jun氨基末端激酶(JNK)在促进氧糖剥夺(OGD)神经元存活中的作用及机制。方法体外培养大鼠胎鼠大脑皮层原代神经元建立OGD神经元模型,通过CCK-8法筛选自噬特征时间点,进行JNK激活剂茴香霉素处理。将细胞随机分为空白组、茴香霉素处理组(神经元在OGD后,用茴香霉素处理5 h)、溶剂对照组(OGD神经元培养基中加入等量的溶剂二甲基亚砜)。Western blot法和免疫荧光细胞化学染色分别检测OGD神经元beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2),胱天蛋白酶3(caspase-3)、P62、泛素(ubiquitin)、组织蛋白酶B(cathepsin B)和溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)的蛋白表达量;CCK-8法检测神经细胞活性,利用IPP软件测量神经元轴突长度。结果激活JNK可明显提高LC3、beclin 1、Bcl2的表达,并显著降低beclin 1-Bcl2复合物的含量及caspase-3、P62、ubiquitin的表达,而cathepsin B、LAMP1的表达无明显变化。由此,通过激活JNK活性可显著提高OGD神经元存活。结论激活JNK促进beclin 1-Bcl2解离,增强自噬,诱导大鼠OGD神经元凋亡向自噬转换,发挥神经元保护作用。

脑缺血后溶酶体功能障碍致自噬流损伤机制的研究进展

缺血性脑卒中是由脑血管阻塞引发的急性脑血管病,是导致人类死亡和残疾的第三大原因。多项研究已证明缺血性脑卒中发生后自噬在神经元中起到积极的作用。自噬是细胞内介导各种底物转运至溶酶体降解和再循环的主要机制,其降解功能主要是通过溶酶体来实现的,故保持溶酶体功能正常对自噬十分重要。然而脑缺血会导致严重的溶酶体功能受损,进而引发自噬流障碍,加重神经元损伤。本文详细阐述缺血性脑卒中后由自噬体-溶酶体融合减少、溶酶体酸性环境发生改变以及溶酶体生物合成减少三个方面诱发的溶酶体功能障碍导致自噬流损伤的机制,以期通过增强溶酶体功能调节脑缺血后神经元自噬流,发挥神经保护作用,为治疗脑卒中提供新的思路。

银杏叶提取物促进脑缺血半暗带神经元自噬提高神经保护作用

银杏叶提取物(ginkgo biloba extract-761,EGb-761)注射液在中国常作为辅助药物被用于治疗脑卒中,但是,其潜在的细胞和药理机制尚未完全了解。该研究旨在探讨EGb-761是否通过调节缺血性脑卒中半暗带神经元的自噬从而发挥保护作用。采用雄性SD大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型,将MCAO大鼠随机分为5组,分别为Sham组、MCAO+saline组、MCAO+EGb组、MCAO+EGb+3-MA组和MCAO+3-MA组。脑缺血大鼠用EGb-761药物腹腔注射7天后,并使用自噬抑制剂3-MA侧脑室注射进行干预,分别通过蛋白免疫印迹法(WB)、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和免疫荧光检测缺血半暗带的脑组织,以检测自噬的表达。另外,根据脑梗死体积、神经功能缺损和TUNEL检测神经元凋亡水平,以评估治疗效果。结果表明,与MCAO+saline相比,MCAO+EGb组的EGb-761显著提高了神经元自噬水平,同时,明显减轻了神经功能缺损、脑梗死面积和神经元凋亡。此外,相对于MCAO+EGb组,MCAO+EGb+3-MA组中的3-MA抵消了EGb增强神经元自噬的功效,并且仅使用3-MA继续加重了神经损伤。因此,EGB-761通过特异性促进脑缺血半暗带神经元自噬发挥神经保护作用。