天然食物中的抗艾滋病有效成分

天然食物中有抑制和阻断HIV感染的有效成分,如三萜类的齐墩果酸(Oleanolic acid)、熊果酸(Ursolic acid)、山楂酸(maslinic acid)等,黄酮类的金合欢素(acacetin)、芹菜素(apigenin)等,多糖类的芦荟多糖、海藻多糖、螺旋藻多糖等,蛋白类的苦瓜蛋白、乳铁蛋白等,发掘这些天然食物有效成分对艾滋病的防治具有重要意义。

栖热菌噬菌体TSP4 dCTP脱氨酶基因的克隆表达

将编码栖热菌噬菌体TSP4菌株的dCTP脱氨酶tspdCD基因亚克隆到表达载体pET-32a中,并将重组质粒pET-32a-tspdCD转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,目的蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌Rosetta(DE3)中以可溶性形式高效表达。通过Ni-NTA agarose亲和层析柱纯化表达的tspdCD,并对其活性,最适作用温度、pH、底物特异性以及金属离子和有机溶剂对其活性的影响进行测定,检测结果表明重组蛋白活性达到4.12U/mg,它的最适作用温度和pH分别为60℃和7.5,最佳反应底物是dCTP,2mmol/L的Ca2+和Mg2+对其活性具有明显的促进作用,而同浓度的Ni2+和Cu2+对其活性产生了明显的抑制作用,10%(V/V)的乙酸乙酯和异丙醇对其活性有很明显的促进作用,而同体积比的丙酮对其活性产生明显的抑制作用。实现了tspdCD在大肠杆菌系统中的功能性表达,为进一步研究高温噬菌体tspdCD的功能奠定了基础。