脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤（spinalcordinjuries，SCI）是致残率最高的疾病之一，SCI及继发炎症引起神经元和神经纤维变性坏死，神经胶质细胞增生形成瘢痕组织，造成损伤平面以下出现运动功能丧失（瘫痪）、感觉障碍、括约肌功能失调（大小便失禁）、肌痉挛、疼痛、关节挛缩、褥疮、心理障碍、性功能不全，甚至呼吸障碍等危及生命及影响生活质量的改变。目前SCI尚无特效的治疗方法，亟待探索新的治疗策略。近年，随着对间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）的多向分化潜能、低免疫原性及体外易培养扩增等生物学特性的深入认识，为SCI的治疗提供了新思路。

15-LO在慢性髓系白血病中作用的研究进展

白血病是一组高度异质性的造血系统恶性肿瘤,有一种或几种白细胞出现质和量的异常,并在骨髓和其它器官中广泛浸润,导致正常血细胞减少。白血病按照细胞类型的不同,分为髓系白血病和淋巴细胞白血病;按自然病程和细胞的成熟度分为急性白血病和慢性白血病。

白血病细胞源外泌体的作用研究进展

白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子,可近距离和/或经体液流动远距离、特异性调控靶细胞的生理和病理活动^（[2-3]）。靶细胞摄取外泌体的途径主要有网格蛋白介导的内吞途径、

Nestin基因在髓系白血病的表达及意义

Nestin蛋白是一种神经干细胞标志物,参与组织修复,并且在一些肿瘤细胞中表达。最近研究报道称nestin可能参与肿瘤细胞恶性增殖及细胞侵袭。在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoid leukemia,ALL)小鼠模型中,白血病增殖细胞(leukemia-propagating cells,LPCs)可形成一个抗药性niche,其中nestin阳性细胞参与该niche形成。为探索nestin基因在白血病患者的临床表达情况,通过RT-PCR和Western-blot实验方法 ,检测了50位髓系白血病患者的nestin基因的临床表达情况。结果发现,在50位髓系白血病患者(38位AML,12位CML)中,42位患者表达nestin基因mRNA,6位患者表达nestin蛋白,并且nestin基因表达水平和患者血红蛋白、血小板、细胞因子和T淋巴细胞数并不存在相关性,但是高白细胞白血病患者表现出nestin基因mRNA水平高表达。虽然nestin基因和患者完全缓解率(complete remission,CR)并不存在联系,但是nestin基因在髓系白血病异常表达,说明其可能作为一种诊断AML或CML的生物标记物。

外泌体源miRNA在白血病发病机制中的作用

背景:外泌体是穿梭在细胞间的物质传递与信息交流载体,是活细胞分泌到胞外的一种膜包被的纳米级囊泡。外泌体携载有亲本细胞来源的核酸(DNA、m RNA、microRNA等)、蛋白质、脂质等生物大分子,经体液流动远距离调控靶细胞的功能。白血病是一类造血系统的恶性肿瘤,大部分患者难以治愈。已有研究表明,外泌体源miRNA受脂质保护不易被RNase水解,介导白血病细胞的浸润、转移等恶性生物学行为。目的:对外泌体源miRNA在白血病中的作用进行综述,为探索白血病的分子发病机制以及挖掘诊治靶点提供重要信息。方法:以"外泌体、白血病、miRNAs"为中文检索词,以"Exosome,Leukemia,miRNAs"为英文检索词,通过计算机检索PubMed数据库与万方医学网;检索时限:2003年11月至2018年5月,最终纳入48篇文献进行结果分析。结果与结论:外泌体源miRNA通过驯化造血微环境,使白血病细胞的存活、增殖和迁移浸润等恶性生物学行为得到加强。通过干预外泌体源miRNA的产生和释放,阻断受体细胞摄取外泌体源miRNA以及干涉其调控的靶基因等可能会拓展白血病的治疗理念。通过深入探讨外泌体源miRNA在白血病中的作用,为挖掘诊治靶点提供重要信息。

外泌体在白血病细胞增殖中的作用

外泌体又被称为胞外体,是活细胞分泌在体液中的一种纳米级的、膜包被小泡,直径约为3-120 nm,表面富含胆固醇、神经鞘磷脂、神经酰胺等脂类物质,携带亲本细胞来源的蛋白质、mRNA、microRNA、DNA等分子信息,是细胞间信息交流与的物质传递的载体。外泌体来源于活细胞胞质内、晚期内吞体的膜性囊泡,其融合为多囊体后与细胞质膜融合释放到细胞外。外泌体广泛存在于血液、唾液、尿液、脑脊液以及胸水、腹水等体液中,

ALOX5、ALOX5AP基因多态性与髓系白血病易感性的关系

目的:探讨花生四烯5-脂氧合酶基因(arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)rs2029253,rs2228064和rs2228065位点以及5-脂氧合酶激活蛋白基因(5-lipoxygenase activating protein gene,ALOX5AP)rs10507391和rs4769874位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与髓系白血病发病风险的相关性。方法:经医院伦理委员会批准、患者知情同意,选取150例髓系白血病患者为髓系白血病(ML)组,134例健康人群为对照组。提取基因组DNA,采用聚合酶链反应及限制性片段长度多态技术(PCR-RFLP)联合PCR产物直接测序法检测ALOX5、ALOX5AP基因5个位点的基因型。结果:ALOX5基因rs2029253位点在ML组和对照组中的A等位基因频率分别为43.0%和34.3%,而等位基因G的频率分别为57.0%、65.7%;基因型AA、AG和GG在ML组中的分布频率分别为32.2%,21.5%和46.3%,而在对照组中的分布频率分别为15.7%,37.3%和47.0%。基因型AA和等位基因A可能增加髓系白血病的发病风险(OR=2.26,95%CI:1.43-4.56,P<0.05;OR=1.44,95%CI:1.02-2.03,P<0.05);基因型AG与等位基因G可能降低对髓系白血病的易感性(OR=0.46,95%CI:0.27-0.78,P<0.01;OR=0.69,95%CI:0.50-0.98,P<0.05)。而ALOX5基因rs2228064、rs2228065位点多态性在ML组与对照组间的分布差异无统计学意义(P>0.05)。ALOX5AP基因rs10507391位点等位基因A在髓系白血病组和对照组中频率分布分别为30.7%和36.2%;基因型AA、AT和TT在ML组中分布频率分别为1.3%,58.7%和40.0%,在对照组中的分布频率分别为9.7%,53.0%和37.3%;基因型AA可能降低髓系白血病的发病风险(OR=0.13,95%CI:0.03-0.57,P<0.05);而ALOX5AP rs4769874位点基因型与等位基因分布频率在ML组与对照组间的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ALOX5 rs2029253位点基因型AA、AG和等位基因A、G以及ALOX5AP rs4769874位点AA基因型与髓系白血病发病的遗传易感性相关。

构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒

旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α后挑取克隆,通过测序评估重组质粒是否构建成功。将构建好的重组质粒转染293T细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,挑取转染成功的细胞,用试剂盒提取转染细胞基因组DNA,PCR扩增含敲除位点的DNA片段,用测序技术获得核苷酸序列,用DNAStar软件分析转染细胞中ALOX5基因敲除情况。测序结果表明2对双链sgRNA寡核苷酸已插入质粒,且序列正确,靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5构建成功。其在293T细胞中的转染效率约为50%,用一代测序法未检测到sgRNAs的切割效果。初步表明利用CRISPR/Cas9技术成功构建靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5。

转化生长因子-β1标签单核苷酸多态性与云南傣族、哈尼族乙型肝炎病毒感染的关联性

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）标签单核苷酸多态性（SNP）与云南西双版纳地区傣族、哈尼族人群 HBV 感染的相关性。方法采集傣族、哈尼族人群血样共600份，其中每个民族包含健康对照100名，HBV 感染患者200例（包括100例 HBV 自限性恢复患者和100例 CHB 患者），运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOF-MS）对 TGF-β1基因4个标签 SNP（rs2241715、rs2241716、rs747857、rs8105161）进行基因分型，并构建单体型。结果哈尼族和傣族人群 GGCC 单体型频率分别为0．024和0．000，差异有统计学意义（χ2＝4．875，P ＝0．027）。在傣族和哈尼族人群中， CHB 组 rs2241716位点 G 等位基因显著高于自限性恢复组（傣族：CHB 组 G、A 频率为0．805、0．195，自限性恢复组为0．700、0．300，χ2＝5．920，P ＝0．015；哈尼族：CHB 组 G、A 频率为0．775、0．225，自限性恢复组为0．675、0．325，χ2＝5．016，P ＝0．025）。在傣族人群中，CHB 组 rs2241715位点 GG 基因型和 G等位基因分布频率显著低于自限性恢复组（CHB 组 TT、TG、GG 频率为0．480、0．430、0．090，自限性恢复组为0．400、0．380、0．220，χ2＝6．488，P ＝0．039；CHB 组 T、G 频率为0．695、0．305，自限性恢复组为0．590、0．410，χ2＝4．800，P ＝0．029）。rs2241716位点在 G 隐性模式下（GG／GA＋AA），CHB 组与自限性恢复组差异有统计学意义（傣族：P ＝0．039，OR＝1．851，95％CI 为1．033～3．316；哈尼族：P ＝0．041， OR＝1．859，95％CI 为1．024～3．373）。rs2241715位点在 G 隐性模式下（GG／TG＋TT），CHB 组与自限性恢复组差异有统计学意义（P ＝0．013，OR ＝0．341，95％CI 为0．146～0．796）。GGCC 单体型在HBV 感染组的分布频率显著高于健康对照组（傣族：χ2＝4．389，P ＝0．036；哈尼族：χ2＝3．867，P ＝0．049）。结论TGF-β1基因 GGCC 单体型可能增加傣族和哈尼族人群 HBV 感染风险，而 rs2241716位点 GG 基因型可能是傣族和哈尼族人群感染 HBV 后发展为 CHB 的危险基因。

外泌体在白血病免疫调节中的作用

外泌体是活细胞分泌至胞外的一种微囊泡结构,携带有亲本细胞来源的核酸、蛋白质和脂质等生物大分子信息,是细胞间的通讯载体。外泌体与肿瘤细胞的免疫逃逸、增殖、迁移与血管生成等恶性生物学行为有关,促使白血病细胞对化疗药物产生耐药以及诱导T细胞凋亡。外泌体促进免疫系统激活,是一种潜在的白血病免疫治疗疫苗。另外,外泌体是发现白血病诊断和治疗生物标记物的一个窗口。本文就外泌体的生物学特性及其在白血病免疫调节中的作用作一综述。