背景:体外持续细胞传代是否影响骨髓间充质干细胞分化为神经干细胞的机制尚未明确。目的:观察细胞传代对骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传代至第3,6,9,12代的骨髓间充质干...背景:体外持续细胞传代是否影响骨髓间充质干细胞分化为神经干细胞的机制尚未明确。目的:观察细胞传代对骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传代至第3,6,9,12代的骨髓间充质干细胞,在无血清神经干细胞培养基中诱导培养7,14 d,观察细胞生物学特征,通过流式细胞仪检测Nestin的表达情况观察骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化能力,再进一步诱导分化,通过免疫组织化学荧光技术检测神经烯醇化酶及胶质酸性蛋白表达,以鉴定神经干细胞的多向分化能力。结果与结论:各组骨髓间充质干细胞加入诱导剂后均分化成神经干细胞,Nestin表达阳性,各组细胞分化的比例差异有显著性意义(P<0.05),其中第6代骨髓间充质干细胞分化能力最强,诱导7 d及14 d Nestin阳性细胞的比例分别为(93.7±2.3)%,(96.2±1.8)%,第6,9代明显较第3,12代骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的比例高,且所得神经干细胞球经贴壁分化后可表达神经烯醇化酶、胶质酸性蛋白。结果表明,骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化与细胞传代有关,过早或过晚均不利于分化。展开更多
文摘背景:体外持续细胞传代是否影响骨髓间充质干细胞分化为神经干细胞的机制尚未明确。目的:观察细胞传代对骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传代至第3,6,9,12代的骨髓间充质干细胞,在无血清神经干细胞培养基中诱导培养7,14 d,观察细胞生物学特征,通过流式细胞仪检测Nestin的表达情况观察骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化能力,再进一步诱导分化,通过免疫组织化学荧光技术检测神经烯醇化酶及胶质酸性蛋白表达,以鉴定神经干细胞的多向分化能力。结果与结论:各组骨髓间充质干细胞加入诱导剂后均分化成神经干细胞,Nestin表达阳性,各组细胞分化的比例差异有显著性意义(P<0.05),其中第6代骨髓间充质干细胞分化能力最强,诱导7 d及14 d Nestin阳性细胞的比例分别为(93.7±2.3)%,(96.2±1.8)%,第6,9代明显较第3,12代骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的比例高,且所得神经干细胞球经贴壁分化后可表达神经烯醇化酶、胶质酸性蛋白。结果表明,骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化与细胞传代有关,过早或过晚均不利于分化。
