某基层医院医务人员甲状腺功能指标分析

甲状腺激素对人体的作用十分广泛,不但影响人体的生长发育,而且影响人体的能量代谢和生殖系统等。甲状腺功能减退（简称甲减）或甲状腺功能亢进（简称甲亢）均会出现甲状腺功能代谢异常。甲状腺功能检测对诊断成年人甲亢所致的多汗、消瘦、易怒以及儿童甲减所致的生长发育迟缓、呆小症等均具有重要的临床意义。目前,我国医务人员工作压力较大,其甲状腺功能状况值得研究。为此,本研究对处于海岛的某基层医院医务人员甲状腺功能进行了分析。

凝血四项指标在肝硬化患者检验中的应用探讨

探讨凝血四项指标在肝硬化患者检验中的应用效果。方法:选取我院2020年3月~2022年3月接收的62例肝硬化患者为肝硬化组,另选取我院同期接收的62例健康体检者为对照组,两组检验者均接受凝血四项指标检验,观察两组检验者的凝血四项指标水平。结果:肝硬化组的APTT、PT、TT时间长于对照组,FIB水平低于对照组,P<0.05;失代偿组的APTT、PT、TT时间长于代偿组,FIB水平显著低于代偿组,P<0.05;肝功能Child分级B级患者的APTT、PT、TT时间均显著长于肝功能Child分级A级患者,但FIB水平显著低于肝功能Child分级A级患者,P<0.05;肝功能Child分级C级患者的APTT、PT、TT时间均显著长于肝功能Child分级A级、B级患者,但其FIB水平显著低于肝功能Child分级A级、B级,P<0.05。结论:凝血四项指标检验在肝硬化诊断及病情严重程度判断方面具有较高临床价值,可作为肝硬化的辅助检验方式。

肺炎支原体经信号转导和转录激活因子3上调气道上皮细胞三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶表达调控组蛋白乙酰化

目的探讨肺炎支原体(Mp)经信号转导和转录激活因子3三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(STAT3)上调气道上皮细胞ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)表达调控组蛋白乙酰化。方法体外培养气道上皮细胞系BEAS-2B细胞,采用感染复数(MOI)为100的Mp感染的BEAS-2B细胞,观察并计算其感染0、0.5、1.0、2.0 h的相对灰度值;收集BEAS-2B细胞感染MOI为0、25、50及100的Mp,计算BEAS-2B细胞感染不同MOI Mp 24 h ACLY蛋白相对灰度值。实验分为溶剂对照组(0.1%二甲基亚砜)、单纯抑制剂对照组(25μmol/L BMS 303141)、Mp感染组(MOI 100Mp感染24 h)和Mp+抑制剂处理组(Mp感染前用25μmol/L BMS 303141预处理细胞1 h)。蛋白免疫印迹(WB)检测Mp感染前后STAT3磷酸化、ACLY表达及H3、H4蛋白乙酰化,荧光发光法测定细胞内乙酰辅酶A(CoA)的浓度,并通过ACLY抑制剂处理,以研究ACLY在调控乙酰CoA的合成以及H3和H4乙酰化中的作用。结果Mp感染BEAS-2B细胞0、0.5、1.0、2.0 h,STAT3磷酸化灰度值比较差异有统计学意义(P<0.05);随着Mp感染BEAS-2B细胞时间延长,STAT3磷酸化灰度值呈升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。MOI 0、25、50、100 ACLY蛋白相对灰度值、乙酰CoA相对光强度比较差异有统计学意义(P<0.05);随着MOI增加,ACLY蛋白相对灰度值、乙酰CoA相对光强度均呈升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。4组乙酰CoA相对荧光强度比较差异有统计学意义(P<0.05);Mp感染组、Mp+抑制剂处理组乙酰CoA相对荧光强度均高于溶剂对照组、单纯抑制剂对照组,Mp+抑制剂处理组高于Mp感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。4组乙酰化H3和H4相对灰度值比较差异有统计学意义(P<0.05);Mp感染组、Mp+抑制剂乙酰化H3和H4相对灰度值均高于溶剂对照组、单纯抑制剂对照组,Mp+抑制剂处理组高于Mp感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ACLY表达升高在连接代谢和炎症反应中发挥重要作用,是导致组蛋白乙酰化的关键,表明柠檬酸-ACLY途径在调节免疫细胞功能中发挥重要作用,可能是治疗的潜在靶点。

流式细胞术检测CD64指数及其在诊断细菌感染中的应用

目的建立适用于临床的流式细胞术(FCM)检测CD64指数的方法,并探讨其在细菌感染中的应用价值。方法用FCM检测42名健康对照者、41例细菌感染患者及50例非感染患者外周血多型核白细胞(PMN)表面CD64表达的平均荧光强度(MFI)并计算CD64指数,同时对比各组的C反应蛋白(CRP)水平、白细胞(WBC)计数和中性粒细胞百分比(Neu%),绘制各指标的受试者工作特征(ROC)曲线并评价CD64指数用于诊断细菌感染的价值。结果细菌感染组CD64指数[3.69(2.69~5.25)]明显高于健康对照组[0.79(0.40~1.31),P<0.01]和非感染组[0.52(0.40~0.93),P<0.01];根据ROC曲线分析,各指标曲线下面积CD64指数(0.964)>CRP(0.931)>Neu%(0.815)>WBC计数(0.678),CD64指数选取最佳阈值为1.84时诊断细菌感染的敏感性和特异性分别为87.8%和95.7%。结论 FCM检测的CD64指数可用作细菌感染的诊断指标,与传统指标相比较具有较高的敏感性和特异性。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及SCCmec分型

目的了解上海市普陀区人民医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况及SCCmec型别,为预测耐药菌株的发展趋势、为临床预防和治疗MRSA感染提供理论依据。方法收集该院2012年1月至2016年12月临床分离的MRSA共380株,采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验,采用多重聚合酶链反应检测SCCmec型别。结果所有菌株对利奈唑胺、万古霉素均敏感,敏感率为100.0%;对利福平、复方磺胺甲噁唑耐药率较低,分别为5.0%和7.6%;对红霉素、左氧氟沙星、四环素高度耐药,耐药率分别是100.0%、94.2%、93.4%和90.0%;对青霉素耐药率为100.0%。380株MRSA有SCCmecⅡ型281株(73.9%),SCCmecⅢ型59株(15.5%),SCCmecⅣa型5株(1.3%),另有35株(9.2%)未能分型。结论上海市普陀区人民医院分离的MRSA标本以SCCmecⅡ型为主,具有多重耐药的特征,不同SCCmec型别的耐药谱有所差异。

内镜与手术中肝总管胆汁细菌培养对比再探究

目的通过对内镜与术中肝总管胆汁细菌培养和药敏试验的结果进行对比研究,以明确前者在指导临床应用抗菌药物中的价值。方法以感染严重评分(SSS)<30和感染评分(SS)<10作为入选条件(Psss>0.05,Pss>0.05),分为内镜组(n=61)和手术组(n=62),内镜组经肝总管插管获取胆汁,手术组经穿刺肝总管获取胆汁,立即进行细菌培养和药敏测试,对结果进行对比分析。结果对比内镜组与手术组的阳性率,差异无显著性意义,两组中细菌药敏试验也大致相同。结论通过内镜取材进行细菌培养可以大致反映肝总管内细菌学状况,不应轻易放弃并值得推广。同时建议使用对手术和内镜两组都敏感或中度敏感的抗菌药物,革兰阴性菌使用丁安卡那、亚胺培南、氨卞青霉素,革兰阳性菌使用万古霉素、环丙氟哌酸、氨卞青霉素。

血清胱抑素C诊断早期糖尿病肾病肾损害

目的：测定血清胱抑素C（CysC）在早期糖尿病肾病患者中的水平，探讨血清胱抑素C是否是一种反映肾小球滤过率变化的理想的内源性标志物。方法：检测2型糖尿病患者24h尿微量白蛋白（UAE）并选择性分成两组，其中UAE〈30mg·24h^-1为I组（30例），UAE在30～300mg·24h^-1为Ⅱ组（30例），对照组（Ⅲ组）为正常体检者（30例），同时测定血清CysC、血β2微球蛋白（β2-MG）、血肌酐（Cr），3组进行比较。Ⅱ纽给予ACEI＋ARB治疗6个月后复测CysC、血β2-MG、血Cr及UAE，与未治疗前比较。结果：在I组（0．98±0．18mg·L^-1）和Ⅱ组（1．83±0．66mg·L^-1）CysC的浓度均比对照组（0．74±0．11mg·L^-1）显著升高，同时I组和Ⅱ组之间的比较也有（P〈0．001）。I组血β2-MG浓度（2．27±0．74mg·L^-1）与对照组（1．76±0．69mg·L^-1）比较无显著差异（P〉0．2），而Ⅱ组血β2-MG浓度（5．80±1．53mg·L^-1）与对照组和I组之间的比较均有升高（P〈0．001），血Cr的浓度在I组（75．83±16．58μmmol·L^-1）、1I组（97．26±15．26μmmol·L^-1）及对照组（74．26±15．01μmmol·L^-1），3组之间的比较均无显著差异（P〉0．5）。Ⅱ组在用药后的CysC浓度比用药前显著下降（P〈0．05），UAE的浓度也显著下降（P〈0．001），而血β2-MG、血Cr用药前后的比较均无显著变化（P〉0．5）。结论：血清胱抑素C是一种反映早期糖尿病肾病的肾小球滤过率变化的理想的标志物。

qPCR快速检测痰标本中MRSA的临床应用

目的探讨实时荧光定量PCR(qPCR)法快速检测痰液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用。方法痰标本经裂解获取DNA,应用qPCR法检测mecA和Sa442基因,同时对痰标本进行常规培养鉴定。结果以痰培养鉴定结果为金标准,在887份合格痰标本中,PCR检测MRSA的灵敏度为95.7%,特异度为91.2%,阳性预测值为37.8%,阴性预测值为99.7%。结论 qPCR法可用于快速检测痰标本MRSA,排除MRSA的定植和感染。

检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究

目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。

乳腺癌组织及癌旁组织HER2基因CpG岛甲基化水平及其mRNA表达的研究

目的探讨乳腺癌组织及癌旁组织人类表皮生长因子受体2(HER2)基因CpG岛甲基化率和HER2mRNA表达的差异。方法收集经病理确诊的50份乳腺癌组织和对应的癌旁组织样本,采用焦磷酸测序法、实时聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法分别检测HER2启动子CpG岛甲基化率、HER2 mRNA表达和HER2蛋白表达。结果HER2阳性乳腺癌组织HER2 mRNA相对表达量高于HER2阴性癌组织(P<0.05),但HER2启动子CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。HER2阴性乳腺癌组织HER2基因启动子CpG岛甲基化率显著高于对应的癌旁组织(P<0.05),而HER2 mRNA表达则低于对应的癌旁组织(P<0.05)。HER2阳性的乳腺癌组织与其对应的癌旁组织之间以及HER2阳性与阴性癌旁组织之间,HER2基因启动子CpG岛甲基化率和HER2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在HER2阴性的乳腺癌癌旁组织中,HER2基因启动子CpG岛的低甲基化可能是HER2 mRNA高表达的机制之一。

乳腺癌C-erbB-2基因启动子区CpG岛的甲基化状态与雄激素受体表达的相关性分析

目的探讨乳腺癌中雄激素受体(AR)与人表皮生长因子受体2(C-erbB-2)基因启动子区CpG岛甲基化状态的关系,并明确AR与乳腺癌预后的关系。方法分别采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学(IHC)方法分析76例乳腺癌患者癌组织和55例乳腺良性肿瘤患者肿瘤组织C-erbB-2基因启动子区CpG岛的甲基化状态和AR的表达水平,结合临床病理资料分析AR不同表达状态与C-erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化水平的关系,并进行预后分析。结果 AR阳性的乳腺癌组织C-erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化的比例[74.58%(44/59)]显著高于AR阴性的乳腺癌组织[47.06%(8/17),P=0.032];C-erbB-2基因启动子区CpG岛的甲基化与AR蛋白的表达呈正相关(r=0.247,P=0.032),且乳腺癌AR阳性患者无瘤生存率显著高于AR阴性患者(P<0.05)。结论乳腺癌组织AR蛋白的表达状态可作为乳腺癌预后转归的预测依据之一;C-erbB-2基因启动子区CpG岛的甲基化与AR蛋白的表达状态呈正相关,为乳腺癌的激素治疗及预后转归的预测提供了新的理论依据。

结合胆红素和非结合胆红素的直接测定在高胆红素血症中的应用

目的评价结合胆红素(CBil)和非结合胆红素(UBil)的直接测定在胆汁瘀积性黄疸(CJ)、肝细胞性黄疸(HJ)和新生儿溶血性黄疸(NHJ)中的价值以及δ胆红素/总胆红素(δBil/TBil)比值对CJ患者手术疗效判断的意义。方法用Vitros 250型干式生化仪及配套干片测定18例CJ患者和20例HJ患者血浆TBil、CBil和UBil,汁算δBil;13例CJ患者在行胆总管切开引流术后3 d、5 d、7 d复测。同法测定22例NHJ患儿血浆CBil和UBil,计算新生儿总胆红素(NBil)。结果CJ组CBil/TBil比值与HJ组比较差异有统计学意义(P=0.000),而UBil/TBil比值、δBil和δBil/TBil比值2组间差异均无统计学意义(P=0.241、0.067、0.090)。6例经胆总管切开引流术治疗后排泄良好的CJ患者的TBil、CBil和UBil在术后第3 d起逐渐下降,δBil缓慢下降,δBil/TBil比值由术前的0.16～0.44升至0.52～0.78。7例治疗后排泄不良的CJ患者其TBil、CBil和UBil在术后5 d～7 d缓慢减低,δBil变化甚微,δBil/TBil在0.20～0.46范围内波动。NHJ患儿血浆NBil、UBil及UBil/NBil比值均明显增高。结论CBil和UBil的直接测定及δBil/TBil比值对CJ、HJ和NHJ的诊断和/或鉴别诊断以及CJ患者手术疗效的判断均有很好的应用价值。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的原核表达及多克隆抗体的制备

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的原核表达,及PBP2a多克隆抗体的制备。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了1对寡核苷酸引物,应用PCR法从MRSA基因组中获得编码PBP2a全长的DNA,将此目的基因片段克隆至pET32a(+)载体,转化E.coliBL21(DE3);经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术纯化目的蛋白;用目的蛋白免疫小鼠3～8次后,收获血清并鉴定。结果成功构建了PBP2a原核表达载体,并获得了高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的PBP2a蛋白并制备了多克隆抗体,为其进一步研究奠定了基础。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA提取方法的改进

目的研究适用于PCR法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的核酸提取方法。方法 MRSA在不同孵育条件下分别经含溶菌酶、溶葡萄球菌酶或chelex100R的裂解液裂解获得DNA,用PCR法检测目的基因。结果同时使用溶菌酶、溶葡萄球菌酶、chelex100R裂解得到的DNA,在用PCR法检测mecA基因时,获得的循环阈值(Ct值)明显低于其他组分的裂解液。采用56℃一步法孵育裂解细菌的效果,与37、56℃二步法比较,差异无统计学意义(P>0.05),但简化了步骤。结论含溶菌酶、溶葡萄球菌酶、chelex100R等的裂解液同时与细菌于56℃孵育30min的方法,是获取MRSA细菌DNA既便捷又高效的方法,可以立即用于下一步PCR,为PCR法快速检测临床MRSA感染奠定了基础。

利多卡因联合丙胺卡因对金黄色葡萄球菌抑菌效果的评价

目的评价利多卡因联合丙胺卡因（利多卡因/丙胺卡因）对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。方法收集皮肤及软组织感染分离的金黄色葡萄球菌共126株。采用纸片扩散法检测青霉素、头孢西丁、庆大霉素等18种抗生素的耐药性,根据头孢西丁药物敏感试验结果结合mecA基因筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,采用E-test检测万古霉素最低抑菌浓度（MIC）。采用琼脂稀释法测定利多卡因/丙胺卡因对金黄色葡萄球菌的MIC。结果 126株金黄色葡萄球菌中23株为MRSA,耐药率较高的为青霉素和红霉素,分别是86.5%和46.8%;未检出对替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺和奎奴普丁/达福普汀耐药的菌株。利多卡因/丙胺卡因对金黄色葡萄球菌的MIC范围为（1/1～2/2）mg/mL,MIC50和MIC90均为（2/2）mg/mL。结论利多卡因/丙胺卡因对皮肤及软组织感染分离的金黄色葡萄球菌具有明显的抑菌效果,在作为止痛、止痒药物运用于皮肤病患者时,可有效预防和抑制金黄色葡萄球菌的感染。

流式细胞术检测抗中性粒细胞抗体方法的建立及临床初步应用

目的建立适用于临床的流式细胞术(FCM)检测抗中性粒细胞抗体(ANA)的方法,并作临床初步应用。方法采用FCM,以前向散射和侧向散射参数区分全血标本中的淋巴细胞和粒细胞,设定粒细胞门,用CD16b-藻红蛋白(PE)和CD177-别藻蓝蛋白(APC)单克隆抗体分别检测中性粒细胞中表面表达CD16b和CD177抗原细胞的百分率。用所建方法检测健康对照32名,确定参考范围,以此作为判断受检者血液中抗CD16b或CD177抗体存在与否的依据。检测外周血白细胞(WBC)总数<4.0×109/L且中性粒细胞绝对计数(ANC)<2.8×109/L的59例患者的CD16b和CD177百分率,并对其中中性粒细胞表达CD16b和/或CD177百分率低于参考范围(即判为相应抗体阳性)的患者给予激素治疗,观察疗效。结果健康人群中性粒细胞中表达CD16b和CD177的百分率分别为98.36%±1.53%和74.95%±11.07%,据此分别确定了健康人群中性粒细胞表达CD16b和CD177的参考范围分别为CD16b>95.36%、CD177>53.25%(即>x珋-1.96s)。59例患者中有23例(39.0%)ANA阳性,其中ANC<2.0×109/L患者的ANA阳性率(50.0%)远高于ANC>2.0×109/L患者(27.6%)。ANA阳性患者经激素治疗后,WBC和ANC上升。结论 FCM检测抗中性粒细胞CD16b和CD177抗体是自身免疫性中性粒细胞减少症(AIN)实验简便、快捷的诊断方法,有助于AIN的诊断、鉴别诊断和疗效判断。

COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体变化的临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体[趋化因子C-C基序受体-1(CCR1)和Toll样受体(TLR)2、TLR4]变化的临床意义。方法建立用于检测COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体的流式细胞术方法。采用流式细胞术检测30例COPD患者(COPD组)、30例肺炎患者(肺炎组)和30名体检健康者(正常对照组)外周血及痰液(正常对照组除外)中性粒细胞氧化吞噬功能及其表面CCR1、TLR2和TLR4的表达水平。结果肺炎组和COPD组外周血中性粒细胞氧化吞噬功能均显著低于正常对照组(P<0.05),肺炎组与COPD组之间差异无统计学意义(P>0.05)。COPD组、肺炎组及正常对照组之间外周血中性粒细胞表面CCR1表达差异均有统计学意义(P<0.05),而TLR2、TLR4表达3组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著低于肺炎组(P<0.05),CCR1表达显著高于肺炎组(P<0.05),TLR2和TLR4表达2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬阳性率与CCR1表达呈负相关(r=-0.548,P<0.01),与TLR2、TLR4表达均无相关性(r值分别为-0.206、-0.219,P>0.05)。结论COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著下降,其表面CCR1表达升高。COPD患者气道中性粒细胞的氧化吞噬功能受损可能是COPD发病的机制之一。

胆石病患者胆道细菌学分析及抗生素应用探讨

目的 为了解胆石病患者胆道感染时细菌学特点 ,药敏情况 ,为选用廉价、有效的抗生素提供依据。方法 对 117例胆石病患者术中抽取胆汁进行需氧和厌氧培养及药敏试验。结果 培养阳性结果 5 4例 ,阳性率 46 .2 %。共培养出 81株细菌以肠球菌、大肠杆菌最常见。培养阳性率随胆道感染严重程度增加而增加。年龄 >6 0岁者 ,阳性率显著升高。G+ 菌对广谱青霉素、喹喏酮类较敏感 ,G-菌对氨基糖甙类、喹喏酮类和氧哌嗪青霉素较敏感。结论 胆石病患者胆汁细菌培养阳性率和胆道感染严重程度及年龄有重要关系 ,抗生素首选氧哌嗪青霉素或喹喏酮类 ,次选氨基糖甙类。不主张首选第三代头孢菌素。

内镜与手术中肝总管胆汁细菌培养对比研究——附59例分析

目的 :通过对内镜与术中肝管胆汁细菌培养和药敏试验的结果进行对比研究 ,以明确前者在指导临床应用抗菌药物的价值。方法 :以感染严重评分 (SSS) <3 0和感染评分 (SS) <10作为入选条件 (Psss=0 .42 6,Pss=0 .52 9) ,分为内镜组 (n =3 1)和手术组 (n =2 8) ,内镜组经肝管插管获取胆汁 ,手术组经穿刺肝管获取胆汁 ,立即进行细菌培养和药敏测试 ,对结果进行对比分析。结果 :对比内镜组与手术组的阳性率 (P =0 .510 6) ,革兰阴性菌菌株分布 (P =0 .43 4 ) ,革兰阳性菌分布 (P =0 .860 )。革兰阴性菌药物敏感 (P =0 .644) ,中度敏感(P =0 .3 72 )。革兰阳性菌药物敏感 (P =0 .668) ,中度敏感 (P =0 .3 90 )。P值均大于 0 .0 5,两组没有统计学差异。结论 :通过内镜取材进行细菌培养可以正确反映胆管内细菌学状况 。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白的低温诱导表达纯化及免疫原性的鉴定

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）PBP2a的原核表达及其免疫源性的鉴定。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列，设计合成了一对寡核苷酸引物，将mecA基因的70～2006bp克隆至pET28a载体，转化E．coliBL21（DE3）；经IPTG低温诱导表达后，利用镍琼脂糖凝胶亲和层析技术纯化目的蛋白；用抗PBP2a抗体鉴定纯化蛋白的免疫源性。结果成功构建了不合跨膜区的PBP2a原核表达载体，在低温诱导条件下获取的蛋白纯化后无杂蛋白；该蛋白能与商品化抗PBP2a单克隆抗体结合。结论利用分子克隆技术，获得了高纯度的不合跨膜区的PBP2a蛋白，且该蛋白具有免疫源性，为进一步制备抗PBP2a单克隆抗体奠定了基础。