聚合酶链反应技术在寄生虫学和医学昆虫学研究中的应用（综述）

聚合酶链反应技术在寄生虫学和医学昆虫学研究中的应用（综述）张玲敏（暨南大学医学院寄生虫学教研室，５１０６３２广州）聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是继Ｓｏｕｔｈｅｎ印迹（ｂｌｏｔ）技术和基因克隆技术之后又一个分子...

人体寄生虫学图鉴网络课件的设计与制作

教学技术的现代化是新世纪高等教育的发展趋势，而多媒体网络教学课件的制作与使用是实现教学技术现代化的主要手段之一。计算机网络课件可以将比较枯燥的寄生虫学知识以寄生虫的形态图、生活史图及病人的图及流行环境图等形式表现出来，使学生更易理解所学的知识，也调动了学生的学习积极性。介绍人体寄生虫学图鉴网络课件的设计和制作，课件的内容和特色以及应用效果。

人体寄生虫学实验教学方法改革研究

人体寄生虫学是医学的一门重要形态学课程，同时又是一门介于基础医学与临床医学之间的“桥梁”课程。通过改善实验室条件，将多媒体技术及网络技术用于实验教学；运用多种教学方法，如增加实验操作、增加活体标本观察、进行临床病例讨论及观看录像等，优化教学内容等一系列改革措施，使实验课更加生动、丰富，激发了学生的学习主动性和积极性。

寄生虫学教学探讨

用多种形式教学方法对９３级本科生进行《人体寄生虫学》教学探讨，并进行了问卷调查，通过统计分析，结果表明：学生最喜欢的教学方法是标本示教、教师讲课和播放录像；由于寄生虫学在实际生活中有用，又是一门医学基础课程，再加上教师上课生动，大多数学生对这门课程感兴趣，特别是寄生虫病例讨论，学生表现得非常积极、认真。在教学实践中，采用多中形式的教学活动，调动了学生的学习积极性，启发了非智力因素。

广州市大学生生殖健康相关知识、观念和行为的调查

[目的]了解广州市大学生对生殖健康问题的知识、态度、行为和需求。[方法]采用随机整群抽样的方法对广州市暨南大学在校大一到大五的1513名本科生进行现况调查。[结果]大学生掌握一定的生殖健康知识,但不全面。大学生的性观念比较开放,绝大多数人对婚前性行为持赞同态度。19.5%的学生已经有过性经历,男生的比例高于女生,外招生高于内招生。首次性行为的对象75.4%是恋人。只有27.1%个体在每次性行为时都采取避孕措施,个别大学生存在多个性伙伴。大学生希望在学校中设立青春期卫生咨询门诊。性心理、性生理、安全性行为、避孕以及性病的预防是同学们最想学习的生殖健康内容。[结论]在大学中加强生殖健康教育,提供适宜的门诊服务,促进大学生身心健康。

广州市某高校大学生自杀意念影响因素分析

目的了解社会支持、遭遇负性事件与大学生自杀意念的关系,为及时进行危机干预提供依据。方法采用统一的调查表,以便利抽样的方法调查广州市某高校大学生974名,通过单因素χ2检验和多因素Logistic回归模型筛选自杀意念的影响因素。结果在974名大学生中,138人曾有过自杀意念,发生率为14.17%。多因素Logistic回归模型分析揭示,因其貌不扬而被歧视(OR=3.365),曾遭受暴力(OR=2.988),单亲家庭(OR=2.965),有饮酒、吸烟或药物依赖(OR=1.827)是产生自杀意念的危险因素;而家庭关系融洽(OR=0.618)和大学生具有自信心(OR=0.390)是预防自杀意念发生的保护因素。结论大学生遭遇负性事件后可能产生自杀意念,应采取多种预防措施防止自杀行为的发生。

某高校大学生自杀态度及影响因素分析

目的了解目前广州市在校大学生对于自杀的态度及其影响因素。方法采用便利抽样方法对暨南大学在校的1037名大学生进行现况调查,调查大学生一般人口学特征和对自杀的态度。结果经过多元逐步回归分析发现,性别、专业、母亲的学历、佛教信仰、生源、年级被分别引入不同的自杀态度分量表。女生比男生更加明确、理性、客观地看待自杀行为。非医学专业对自杀行为的歧视成分更多,而医学专业的大学生更认同自杀是可以预防(Beta=0.237)并且可以自我控制的行为(Beta=0.124),认为自杀不仅影响社会的稳定而且会给国家造成巨大的经济损失(Beta=-0.123)。母亲文化程度越高、大学生对自杀行为的态度越消极。具有佛教信仰的大学生对自杀持相对宽容、同情的态度。结论大学生对自杀的态度相对明确。

大学生个性特征及应对压力与自杀意念的相关分析

目的了解大学生心理特征、遭遇压力、应对方式与自杀意念的关系。方法采用统一的调查表,以目的抽样的方法调查广州市某高校的大学生974名,通过单因素logistic回归和多因素的logistic回归模型筛选出自杀意念的影响因素。结果在974名大学生中,14.6%的男生、17.5%的女生有过自杀意念,二者之间无统计学差异。侨生中自杀意念的发生率(18.8%)高于中国内地生源(11.2%)。多因素的logistic回归模型分析揭示,“觉得自己总是不比别人好而自卑”(OR=4.072)、“遇到问题,不找人倾诉”(OR=2.263)、“较长时间陷入生活、学习、感情或经济压力”(OR=1.597)是自杀意念产生的危险因素;而通过体育运动放松心情(OR=0.519)是保护因素。结论引导和教育大学生树立正确的挫折观和人生态度,提高心理承受能力,防止自杀意念的产生。

小鼠血吸虫病肝纤维化的超微结构动态观察

目的 研究血吸虫病小鼠肝纤维化过程中几种相关细胞和肝组织超微结构动态变化 ,以探讨血吸虫病肝纤维化的可能机制。 方法 日本血吸虫尾蚴经皮肤感染小鼠建立血吸虫病肝纤维化模型。常规方法制作肝组织透射电镜标本并观察。常规 HE染色观察其病理变化。 结果 HE染色显示小鼠血吸虫病肝纤维化模型建立成功。电镜观察显示小鼠感染后 6 wk,急性肉芽肿周围的肝细胞发生坏死 ,肝窦内皮细胞窗孔减少 ,贮脂细胞 (FSC)脂滴减少 ,枯否细胞胞浆出现大吞噬体和粗面内质网。 8wk时部分肝细胞发生脂肪变性 ,少数肝细胞间隙增宽 ,间面出现微绒毛。肝窦周隙内充满大量胶原纤维 ,并形成肝窦毛细血管化。FSC胞浆出现含胶原原纤维的分泌泡 ,周围见大量胶原纤维。枯否细胞粗面内质网增加。 10 wk时 FSC转变为肌成纤维细胞。 12 wk时肌成纤维细胞减少 ,成纤维细胞和纤维细胞增加。 结论 FSC被激活转化为肌成纤维细胞是血吸虫病肝纤维化发生的关键环节 ,激活的枯否细胞、损伤的肝细胞和肝窦内皮细胞与 FSC的活化密切相关 ,肝窦毛细血管化可能加速肝纤维化的发展。

酶联免疫印迹技术分析广州管圆线虫雌虫抗原

应用酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）对广州管圆线虫雌成虫粗抗原（Ａｇ－Ｆ）蛋白组分及其免疫学特性进行分析。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，Ａｇ－Ｆ至少有３０条多肽区带，分子量分别为１１０、９５、７９、６８、６０、４４、４０、２９、２３、２１和１８ｋＤ等蛋白组分被实验感染广州管圆线虫大鼠血清识别，提示Ａｇ－Ｆ这些组分具有诊断价值。４２ｋＤ组分蛋白被猪蛔虫抗原免疫大鼠血清识别。实验感染广州管圆线虫大鼠血清抗Ａｇ－Ｆ的１００、９８、７９、６８和４４ｋＤ等组分的抗体出现于感染后第７ｄ。

壳聚糖植入兔角膜的生物学反应

目的 :探讨壳聚糖植入兔角膜的生物相容性 ,以评价其作为人组织工程角膜材料的可行性。方法 :将壳聚糖材料制成的膜植入新西兰兔角膜的板层内 ,进行裂隙灯观察并进行组织病理学检查。结果 :术后 1周有结膜睫状充血 ,角膜水肿 ;2周后充血水肿逐渐消失。兔眼的情况稳定 ,术后 2周角膜半透明 ;术后 8周新生血管消退 ,材料与角膜的生物相容性好 ,材料部分吸收溶解 ,角膜透明。电镜超微结构检查可见兔角膜标本中材料内有角膜基质细胞长入 ,细胞胞浆较多 ,细胞器丰富 ,有大量的新生胶原。结论 :壳聚糖与角膜组织具有良好的生物相容性 ,且能自然溶解吸收 ,可用作组织工程角膜的载体材料。

四种抗原间接酶联免疫吸附试验诊断广州管圆虫病实验研究

用广州管圆线虫雌虫全虫及其消化系统、生殖系统、体壁分别制备四种粗抗原，用间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测广州管圆线虫感染大鼠血清、曼氏迭宫绦虫裂头蚴抗原免疫大鼠血清，猪蛔虫抗原免疫大鼠血清及日本血吸虫感染大鼠血清抗体。结果，对广州管圆线虫感染大鼠血清四种抗原，ＥＬＩＳＡ阳性率和ＯＤ比值比较，差异无显著性，均具有较高敏感性和特异性。所用四种粗抗原分别与三种异源性血清进行交叉试验，结果，除一份猪蛔虫抗原免疫大鼠血清外均为阴性，广州管圆线虫感染大鼠血清ＯＤ比值均高于三种异源性血清。

α-三噻吩对白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的毒杀作用

目的:研究α-三噻吩(α-T)对白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的毒杀效果,与溴氰菊酯类药物是否存在交互抗性及对抗性品系幼虫生长发育的影响。方法:按WHO推荐的方法(幼虫浸渍法)测定α-T对白纹伊蚊抗性品系和敏感品系幼虫的LC50、LC95,α-T作用后抗性幼虫的化蛹率、羽化率、平均化蛹时间及平均羽化时间。结果:α-T对溴氰菊酯抗性品系幼虫的LC50为9.09μg/L,敏感品系幼虫LC50为5.34μg/L;α-T与溴氰菊酯的交互抗性倍数为1.70,α-T与拟除虫菊酯类药物溴氰菊酯之间不存在交互抗性;α-T能够显著抑制白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的发育和羽化:实验组的累计化蛹率(73.41%),累计羽化率(55.17%)明显低于对照组(83.44%、85.48%),平均化蛹时间(5.52 d)、平均羽化时间(5.91 d)均较对照组(3.87 d3、.16 d)明显延长。结论:α-T对常规农药产生抗性的蚊幼虫,是一种高效、实用的杀虫剂。

急性弓形虫病小鼠超氧化物歧化酶活性测定与同工酶分析

目的了解急性弓形虫病对宿主体内是否发生氧化损伤。方法用小鼠建立急性弓形虫病模型，采用羟胺法测定小鼠血浆及心、肝、肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性；采用薄层聚丙烯酸胺凝胶等电聚焦技术对SOD同工酶进行分析。结果小鼠于感染弓形虫后第3天其SOD活性呈反应性升高，于第6天显著下降；正常小鼠血浆及。心、肝、肺组织的SOD同工酶带分别为6、2、4与3条，感染弓形虫6d后的小鼠肝脏少一条酶带（PI＝8．1）。结论氧自由基参与了急性弓形虫病的病理生理过程。

Dot-ELISA检测广州管圆线虫抗体的研究

目的 研究Dot-ELISA诊断广州管圆线虫病的诊断价值。方法 用Dot-ELISA法检测广州管圆线虫感染大鼠血清抗体 ,并观察曼氏迭宫绦虫裂头蚴抗原免疫大鼠血清、猪蛔虫抗原免疫大鼠血清、日本血吸虫感染大鼠血清等 3种异源性血清有无交叉反应。结果 广州管圆线虫感染大鼠血清阳性率为 10 0 % ,猪蛔虫抗原免疫大鼠血清为 10 % ,其余检测血清均为阴性。结论 Dot -ELISA法用于检测广州管圆线虫病的诊断具有敏感性高 ,特异性强 ,并有简便快速等优点。

N-乙酰半胱氨酸对早期日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿的影响

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对早期日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿的影响。方法将36只健康小鼠随机分为NAC组、正常对照组、感染对照组。NAC组和感染对照组小鼠每只经腹部皮肤感染25±2条日本血吸虫尾蚴,于感染当天起给NAC组小鼠200 mg/kg NAC灌胃,2次／d,共42 d;正常对照组和感染对照组每只小鼠2 ml蒸馏水灌胃,2次／d,共42 d。感染第42天,各组小鼠全部处死后取血清和肝脏。对肝脏进行病理学观察,测定血清及肝组织的生化指标。结果NAC组小鼠的肝组织“+、++、+++”3级单个虫卵肉芽肿个数分别为1．80±0.25、1．37±0．23、0．53±0．15,均显著低于感染对照组(P<0．05)。NAC组小鼠血清中NO水平、GSH水平分别为0．53±0．17、229．66±9．47．相对感染对照组均有所下降(P<0．05),谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX活性为1101．99±140．81,相对感染对照组有所升高(P<0．05);肝组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、NO水平、还原型符胱甘肽(GSH)水平及GSH-PX活性分别为6．85±0．30、13．44±0．40、358．40±19．15、110．84±10．93,均显著低于感染对照组(P<0．05)。结论N-乙酰半胱氨酸可以减缓日本血吸虫病小鼠肝组织病理变化。

一氧化氮及一氧化氮合酶抑制剂对小鼠血吸虫病肝纤维化程度的影响

目的研究一氧化氮(NO)对小鼠日本血吸虫病肝纤维化程度的影响。方法昆明小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫,于感染后第4周末治疗组和抑制剂组分别给予NO前体-L-精氨酸(L-Arg)及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂-NG-左旋-硝基精氨酸甲基乙酯(L-NAME),于第10周末处死小鼠,取血,分离血清,剖取肝脏。应用病理组织学方法及生物化学方法,观察各组小鼠血吸虫病肝纤维化程度,同时测定血清NO、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、谷-草转氨酶(AST)及谷-丙转氨酶(ALT)活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。结果小鼠感染血吸虫后,感染组肝脏有明显的纤维化,血清中HA、LN、AST、ALT等指标显著升高,肝组织内Hyp含量也明显增加。与感染组相比:L-Arg高、中剂量组肝纤维化程度评分降低显著,低剂量组虽有减轻但无统计学意义,同时,L-Arg高、中剂量组血清LN、HA、AST、ALT的水平和肝组织Hyp的含量有所降低;低剂量组HA、LN、AST、ALT的水平虽然降低,但无统计学意义,Hyp水平降低明显;抑制剂组血清LN、HA、AST、ALT含量和肝组织Hyp的水平均明显升高。血清NO的水平随着精氨酸剂量的增加而显著增加,而精氨酸抑制剂组NO的水平降低明显。结论NO能明显降低血吸虫病肝纤维化的程度和减轻肝纤维化所造成的损伤作用。

姜黄素抗血吸虫病肝纤维化作用机制的研究

目的探讨姜黄素(CUR)在血吸虫病肝纤维化治疗中的作用。方法将60只小鼠随机分为6组,分别为对照组,感染组,溶剂组,CUR组(分低、中、高3个剂量)。CUR组于感染后第4周末开始通过灌胃给予CUR,感染后第10周末处死各组小鼠,剖取肝脏测定肝组织羟脯氨酸(Hyp),并检测肝脏基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)mRNA和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达水平。结果与感染组比较,肝组织中Hyp、胶原在CUR(低、中、高)组降低显著(t_(Hyp)=4.52、3.16、2.52,P<0.05、P<0.01;t_(胶原)=33.72、23.54、18.80,P<0.05、P<0.01);反转录PCR结果显示,随着CUR剂量的增加,MMP-1 mRNA的表达逐渐升高,TIMP-1 mRNA的表达逐渐降低,与感染组相比差异有统计学意义(t_(MMP-1)=16.98、21.43、25.49,P<0.05、P<0.01;t_(TIMP-1)= 40.20、37.59、34.23,P<0.05、P<0.01)。结论CUR有减轻肝组织损伤程度,延缓和阻止肝纤维化发生发展的作用,此作用可能与上调MMP-1,阻止TIMP-1的产生有关。

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定

目的 从白纹伊蚊中分离、克隆及鉴定乙酰胆碱酯酶 (ACh E)基因片段。 方法 根据已知的果蝇和斯氏按蚊 ACh E氨基酸序列保守区域设计简并引物 ,对白纹伊蚊 ACh E基因片段进行扩增 ,将凝胶回收的 PCR产物经与 T-载体质粒连接进行 T/ A克隆 ,用α互补筛选法筛选重组质粒克隆 ,用碱裂解法提取重组质粒 DNA并对重组质粒进行酶切鉴定和 PCR鉴定。 结果与结论 获得与设计相符的白纹伊蚊 ACh E基因片段

α-三噻吩对白纹伊蚊幼虫作用的组织学观察

目的 对α -三噻吩 (α -T)作用后的白纹伊蚊幼虫进行形态学观察 ,以进一步探讨α -T对蚊幼虫的毒杀作用机制。方法 对不同浓度α -T处理后的蚊幼虫用组织化学的方法进行光镜观察。结果 实验组蚊幼虫中肠细胞出现空泡 ,伸长 ,破坏 ;脂肪体细胞轮廓不清 ,被红染的小滴填充 ,棕色颗粒增多 ;马氏管管腔狭窄 ,形状不规则 ,胞内蓝色颗粒变浅增多。结论 α -T的主要作用靶器官包括中肠、脂肪体、马氏管 ,其主要作用方式包括触杀、胃毒等。经α -T和近紫外光 (UVA)