免疫介导小鼠再障模型方法的改进

目的 :探讨建立免疫介导小鼠再障模型中的最适照射剂量。方法 :采用不同剂量的 [60 Co γ]射线对BALB/c小鼠进行全身照射 ,并输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞 ,于照射并输入细胞后第 14d处死实验小鼠观察股骨骨髓增生程度及病理改变 ,以确定诱导再障发生的情况。结果 :6 0Gy、5 5Gy和 5 0Gy各照射剂量再障诱导组的再障发生率分别为 85 7%、84 6 %和 2 2 2 %。各实验组小鼠第 14d存活率分别为 5 7 1%、10 0 %和10 0 %。结论 :本实验条件下 ,5 5Gy的照射剂量对建立免疫介导小鼠再障模型较为合适。

酸解离HBsAg免疫复合物以提高HBsAg检出率的探讨

酸解离ＨＢｓＡｇ免疫复合物以提高ＨＢｓＡｇ检出率的探讨广州暨南大学医学院微生物和免疫学教研室（５１０６３２）林晨，罗伟中，刘小澄，韦静附属医院检验科宋爱华用ＥＬＩＳＡ检测乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）时。有时出现与临床不符的阴性结果。我们考虑是否病毒...

癫痫患者免疫状态的探讨

本文观察了７０例癫痫（ＥＰ）患者的免疫状态，首次检测了Ｂ淋巴细胞亚群，ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ，对各项免疫学指标进行了对比研究，发现ＩｇＡ，ＩｇＭ含量明显降低，ＣＩＣ含量明显增高（Ｐ＜０．０１），Ｃ＿３明显降低（Ｐ＜０．０５），显示患者体液免疫功能低下；淋巴细胞亚群测定发现ＣＤ＿３￣＋，ＣＤ＿４￣＋明显降低，ＣＤ＿８￣＋明显增高，ＣＤ＿４￣＋／ＣＤ＿８￣＋比值明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），表明细胞免疫功能低下，在Ｂ细胞亚群检测中发现ＣＤ＿（１０）￣＋，ＤＲ￣＋明显增高，ＣＤ＿（２０）￣＋明显降低（Ｐ＜０．０１），提示体液免疫功能低下与成熟Ｂ细胞免疫功能低下密切相关；同时血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平明显增高（Ｐ＜０．０１）进一步表明ＥＰ患者的免疫功能受到抑制；ＴＮＦ水平与对照组相比差异无显著性（Ｐ＞０．０５），本资料表明，ＥＰ患者的免疫功能低下与不同发作类型，病史长短及服用抗癫痫药物与否无明显的相关（Ｐ＞０．０５），提示ＥＰ患者免疫功能的低下可能存在某些内在因素，而不是受临床表现和抗ＥＰ药物的影响，提示ＥＰ患者免疫调节网络处于失衡状态。

裸鼠实验性矽结节形成与免疫应答关系的探讨

先天性胸腺缺陷的裸鼠及正常ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔注射二氧化硅（ＳｉＯ＿２）后，连续８周动态观察血清ＩｇＭ，ＩｇＧ，抗ｓｓＤＮＡ抗体的变化及其与矽结节形成的关系，结果表明：两组实验鼠在形成矽结节过程中，免疫反应不同，ＢＡＬＢ／Ｃ鼠诱导形成的矽结节明显大于裸鼠组，ＢＡＬＢ／ｃ组鼠血清ＩｇＭ，ＩｇＧ，裸鼠组血清ＩｇＭ明显升高，两组鼠抗ｓｓＤＮＡ抗体均异常升高，ＢＡＬＢ／ｃ鼠组抗ｓｓＤＮＡ抗体阳性率明显高于裸鼠组，结果说明Ｔ细胞在矽结节形成过程中有一定作用，血清抗体的异常升高作为继发因素参与矽结节形成。

血清标本中HBsAg免疫复合物对检测HBsAg的影响

０．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ处理ｌｈ后解离ＨＢｓＡｇ一抗Ｈｈ免疫复合物，并变性抗ＨＢｓＡｇ抗体而对ＨＢｓＡｇ免疫反应性无影响，３４例临床抗ＨＢｓ＋血清样品经ＨＣｌ处理前后，常规ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＳＡｇ比较，结果：酸处理前ＨＢｓＡｇ阳性率为１１．７６％，处理后增加至４１．１８％（Ｐ＜０．０１），实验表明血清样品经酸处理后能明显提高临床乙肝ＨＢｓＡｇ检出率。

重组病毒炎症蛋白Ⅱ长期静脉注射对食蟹猴免疫系统的影响

目的研究重组vMIP-Ⅱ在体内对食蟹猴免疫系统的影响。方法食蟹猴随机分为阴性对照组(静脉注射人白蛋白)和实验组(分别连续13周静脉注射50、250和1250μg/kg剂量的重组vMIP-Ⅱ),于不同时间采集血液(给药前、给药6周、给药13周和恢复期2周)及各器官、淋巴组织(给药13周和恢复期2周)样品。ELISA测定血清中重组vMIP-Ⅱ抗体,分离外周血单个核细胞(PBMCs),FACS计数CD3+、CD4+以及CD8+细胞并测定淋巴细胞转化率;各器官及淋巴组织样品做病理学检查,并采用末端转移酶介导的缺口标记(TUNEL)法检测淋巴组织细胞凋亡指数。结果长期大剂量静脉注射重组vMIP-Ⅱ并不引起食蟹猴产生中和抗体;在用药期间动物外周血CD3+T细胞、CD4+以及CD8+T细胞计数显著性增强(P<0·05),CD4+/CD8+比值仍属正常,同时体外观察到淋巴细胞转化率增加(P<0·05);各器官无病理学改变,淋巴组织出现增生,并且重组vMIP-Ⅱ注射组食蟹猴增生的淋巴组织细胞凋亡指数与阴性对照组相比无明显改变;在恢复期以上指标均有所降低。结论在重组vMIP-Ⅱ对食蟹猴免疫原性不明显的情况下,长期大剂量注射重组vMIP-Ⅱ具有刺激食蟹猴免疫系统、T淋巴细胞增生和增加T淋巴细胞功能的作用。

MTT法在抗真菌药敏实验中的应用

目的:研究MTT法在抗真菌药敏实验中的应用。方法:采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐方案测定两性霉素B和伊曲康唑对5种常见真菌(白色念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、申克孢子丝菌和石膏样小孢子癣菌)的最低抑菌浓度(MIC),终点判定分别采用NC CLS推荐的直接观察法和MTT法,对两法进行比较。结果:MTT法与常规直接观察法进行MIC终点判定所得结果具有很好的一致性。MTT法测得的A值与接种菌量具有正相关性。两性霉素B与伊曲康唑对丝状真菌和念珠菌都具有很好的抑制作用,MTT法测得的A值随药物浓度的增加而显著降低。结论:MTT法较之常规直接观察法结果更为客观、准确,且可量化,因而可以很好的替代肉眼观察法来判定真菌药敏试验的终点。

原因不明不孕症妇女月经周期与解脲脲原体感染关系的探讨

本文检查了７４例不明原因的不孕症妇女生殖道解脲脲原体感染的情况，其中３９例阳性（５２．７０％），正常组５１例１４例阳性（２７．４５％），两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。同时观察到解脲脲原体检出率的高低与月经周期有关，排卵前７天至排卵后８天不孕症组的阳性率为６３％（３２／４７），明显高于卵泡早期２３％（３／１３）（Ｐ＜０．０１）和黄体晚期２８．５７％（４／１４）（Ｐ＜０．０１），正常组的阳性率为５５．５５％（１０／１８），明显高于卵泡早期７．６９％（１／１３）（Ｐ＜０．０５）和黄体晚期１５％（３／２０）（Ｐ＜０．０５）。提示女性生殖道的解脲脲原体感染与月经周期和性激素水平的变化有关，排卵前后几天解脲脲原体感染率的增高与导致不孕有一定的关系。

中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响及机制

中药臭灵丹中黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3′,4′-tetramethoxyflavone,HTMF)体外对多种肿瘤细胞有抑增殖作用,但机制尚未完全清楚.为探讨HTMF对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响,用MTT法检测HTMF对CNE细胞株的增殖抑制率,倒置显微镜观察HTMF作用于CNE细胞后细胞形态变化,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态的变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的变化,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位(△准m)值的改变,并用JC-1荧光染料染色,激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化.结果显示,分离自臭灵丹的HTMF呈浓度、时间双重依赖性显著抑制CNE细胞的增殖,诱导细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降及凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的活化.提示:3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞的生长有显著的抑制作用,并可通过降低线粒体膜电位激活Caspase9,进而活化Caspase3诱导CNE细胞凋亡.

瑶药枸骨叶不同溶剂组分体外抑菌活性比较

采用微量稀释法测定瑶药枸骨叶5种不同溶剂组分的最小抑菌浓度(MIC),探讨枸骨叶不同溶剂提取物的体外抑菌活性.结果表明枸骨叶中的3种溶剂组分均显示一定的抑菌效果,其乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的抑菌效果最为显著,醇提物和正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌也显示较好的抑菌效果.

性病门诊人群泌尿生殖道沙眼衣原体混合感染及分型研究

目的了解性病门诊人群泌尿生殖道沙眼衣原体混合感染及基因型分布特点。方法对2048例性病门诊就诊者分别取尿道或宫颈拭子,实时聚合酶链反应(PCR)检测沙眼衣原体(CT)感染,阳性标本用套式PCR扩增ompl VD2区片断,反向线点杂交(RLB)检测特异性型别。结果CT总体感染率为15.9%(325/2048)。对287份阳性标本成功分型,型别分布为:F21.6%,E20.9%,J19.9%,D12.9%,G8.4%,K4.2%和H1.4%,31份(10.8%)为混合感染。结论在性病门诊人群中CT感染率较高,主要流行型别为F、E和J型,且具有较高的混合感染率。

玉米特异启动子驱动下结核hsp65基因植物表达载体构建及鉴定

以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将globulin1-Hsp65联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中;电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。结果表明:成功构建了pC1300GHsp65质粒,酶切鉴定得到3Kb和8.6Kb两条带,测序分析表明,克隆的Hsp65与NCBI上公布序列一致;成功转化到农杆菌中,酶切从农杆菌中所提的质粒条带大小与预期结果相符合。结果显示,已成功构建和转化了pC1300GHsp65质粒,为成功研制利用转基因植物生产抗结核口服疫苗奠定了基础。

湖南汉族人群HLA-DR位点等位基因多态性与鼻咽癌的相关性研究

目的探讨湖南汉族人群HLA-DR位点等位基因多态性与鼻咽癌遗传易感性之间的关系。方法应用PCR/SSO基因分型技术对93例湖南汉族鼻咽癌患者和93例健康对照作HLA-DRB1、-DRB3、-DRB4、-DRB5基因分型,采用χ2检验比较两组各位点等位基因频率、单倍型频率分布的差异。结果NPC组DRB11101明显低于对照组,DRB10801明显高于对照组,但P值经Bonferroni校正后,差异均无显著(Pc>0.05)。结论湖南汉族人群HLA-DR位点与鼻咽癌无明显相关。

重组骨形成蛋白-2与珊瑚人工骨复合物应用于拔牙窝修复的动物实验研究

目的 :探讨重组骨形成蛋白 - 2 (recombinanthumanbonemorphogeneticprotein ,rhBMP - 2 ) /珊瑚人工骨复合物 (复合骨 )与珊瑚人工骨 (珊瑚骨 )在拔牙窝修复中的作用。方法 :12只成年狗作为实验动物 ,拔除两侧上颌第 2及第 3切牙 ,并去除牙槽窝之间的牙槽间隔 ,一侧随即植入复合骨 ,对侧植入珊瑚骨作为对照。并于植骨后 4、8、12周取材 ,采用组织学观察及计算机图像分析方法 ,观察比较两种植入材料在拔牙窝内的骨修复能力及修复效果。结果 :复合骨具有较强的骨修复作用 ,植入牙槽窝后 ,材料被逐渐降解吸收 ,新骨不断形成 ,12周后 ,植入材料完全被成熟的骨组织取代 ;图像分析结果显示复合骨组新生骨形成的比值明显高于珊瑚骨组 ,两组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5)。结论 :复合骨在拔牙窝中的骨修复能力和修复效果明显优于珊瑚骨。

癫痫患者血清可溶性白细胞介素2受体的检测

癫痫患者血清可溶性白细胞介素２受体的检测李君武，韦静，赖祥青，李鸿智我们首次观察了刀例癫痫（ＥＰ）患者血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ—ＺＲ）水平，现报告如下。检测对象７０例ＥＰ，患者均为我院门诊和住院病人．根据临床症状，脑电图及其它有关辅助检查确...

小鼠肝脏局部纤维化的实验性研究

目的:探讨二氧化硅(SiO2)致小鼠肝脏局部纤维化的方法及其可能的机制。方法:C57BL/6J小鼠24只随机分成实验对照组(生理盐水)、碘油组(超液化碘油)、混和液组(超液化碘油+SiO2),分别用生理盐水、超液化碘油及混和液各0.2 mL局部注射小鼠右肝,3个月后观察注射局部病理变化并分别统计比较变性坏死、纤维化及巨噬细胞和纤维化结节的面积差异,测量血清免疫球蛋白G(IgG)、血清免疫球蛋白M(IgM)变化。结果:3组动物注射局部处肉眼观察无明显差别;镜下观察,3组小鼠注射局部变性坏死面积不同,其中混和液组引起局部变性坏死面积最大(χ2=15.4,P<0.01);混和液组与碘油组两两比较变性坏死面积差异无显著性意义(Z=-0.8,P>0.05);在混和液组可见肝脏组织局部的巨噬细胞结节和纤维细胞增生,局部纤维细胞增生较碘油组差异有显著性意义(Z=-2.5,P<0.05);3组小鼠血清IgM水平均数不同(F=1 720.3,P<0.01),其中,混合液组最高(314.7±10.7)mg/L。结论:SiO2与超液化碘油的联合应用可以显著地引起小鼠肝脏局部纤维细胞增生,其机制可能与体液免疫因素IgM水平的变化有关。

胃癌组织CDKN2A基因座p14^(ARF)基因变异及意义

目的 :探讨胃癌组织p14ARF基因变异及其意义。方法 :应用PCR、PCR -SSCP、PCR甲基化分析法和RT -PCR分别检测 48例胃癌及癌旁组织中p14ARF基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及其mRNA表达状况。结果 :①胃癌组织p14ARF基因纯合性缺失率为 3 1 3 % (15 / 48) ,癌旁组织均未见纯合性缺失。② 3 3例无纯合性缺失的胃癌及癌旁组织均未见p14ARF基因点突变。③胃癌组织p14ARF基因甲基化率为 47 9% (2 3 / 48) ,癌旁组织仅 2例甲基化 ,两者差异有显著 (P <0 0 1)。④ 45 8% (2 2 / 48)的胃癌组织p14ARFmRNA无表达。 3例外显子E1β和E2共甲基化者p14ARFmRNA均无表达 (10 0 % ) ,2 0例单纯E2甲基化者仅 3例无表达 (15 % ) ,两者差异有显著 (P <0 0 5 )。结论 :胃癌中p14ARF基因失活多由纯合性缺失和 5’CpG岛甲基化所致 。