精子顶体相关蛋白Dkkll在小鼠睾丸组织中的表达研究

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况，采用免疫组化方法检测Dkkl1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后，筛选得到1个差异表达杂交点，通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Dkkl1基因。RT-PCR结果表明Dkkl1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达，在出生31d小鼠睾丸开始高表达，在成年前达到高峰。Dkkl1蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 Dkkl1基因存在发育的表达调控，为小鼠年龄依赖性表达基因，其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性，且具有睾丸特异性表达的特征，因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。