深圳地区女性感染人乳头瘤病毒基因类型分析

目的 了解深圳地区各年龄段与不同生殖道疾病女性感染人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）基因类型分布状况，为深圳地区HPV分子流行病学研究提供依据。方法 利用反向杂交技术分别对2005年1月～2005年12月来医院就诊的801例可疑患者进行23种HPV基因亚型检测，其中包括18种高危亚型（HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，83，MM4）及5种低危亚型（HPV6，11，42，43，44）。结果HPV阳性检出率为17．5％（140／801），其中高、低危型检出率分别为16．9％（135／801）与2．6％（21／801），高危型中主要为HPV16，58感染，低危型中主要为HPV11感染。不同生殖道疾病（宫颈炎性病变、尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变（≥CIN））与正常对照组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。20-30y，31-40y，40～50y和〉50y各年龄组中HPV阳性的比率为32％，38．5％，22．4％和7．1％。结论 HPV11，16，58是深圳地区HPV感染的主要型别，20-50y为感染的高峰人群，对HPV阳性者进行定期的跟踪，是防治尖锐湿疣与宫颈癌的重点。

碱性成纤维细胞生长因子对离体和在体关节软骨细胞影响的实验研究

目的 观察bFGF对离体和在体关节软骨细胞的影响。方法 分离培养家兔关节软骨细胞 ,采用MTT法观察bFGF对离体培养关节软骨细胞增殖的影响 ,利用创伤性关节软骨损伤动物模型 ,观察bFGF对在体关节软骨细胞的作用。结果 经bFGF处理的关节软骨细胞增殖明显增强 ,并呈明显的量效关系 ,其峰值浓度为 10ng ml。将此浓度应用于在体条件 ,发现实验组修复组织填充快 ,质量好 ,为透明软骨性修复。结论 bFGF不仅促进离体培养软骨细胞增殖 ,在体条件下依然能有效地促进软骨细胞的增殖 。

高危型HPV型别、病毒载量与宫颈癌前病变的相关性研究

目的 研究高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染的型别、载量与宫颈癌及癌前病变的相关性。方法 采用双色荧光定量PCR方法对307例宫颈组织细胞样本进行8种高危型HPVDNA（主要高危型：HPV16，18，45，31和次要高危型HPV33，52，58，67）分型及病毒载量检测。结果 307例样本HPVDNA与液基细胞学（LCT）检测结果均是阴性236例，两者均为阳性34例；62例HPVDNA阳性结果中LCT阴性28例、宫颈炎26例以及宫颈上皮肉瘤样病变（CIN）I～Ⅲ8例，245例HPVDNA阴性结果中LCT阳性9例；LCT阴性者感染HPV主要表现为次要高危型（15／28）与HPV16（12／28）感染，宫颈炎感染HPV主要表现为次要高危型HPV（17／26）、HPV16及HPV16伴随其它型别的多重感染（6／26）和HPV31（4／26）感染，不同型别HPV感染，感染的HPV病毒载量均≥102copies／cell。LCT阴性者与富颈癌前病变患者（宫颈炎、CINⅠ～Ⅲ）之间HPV感染率差异有显著性（P〈0．05），而病毒载量差异无显著性（P〉0．05）。结论 HPV16与HPV次要高危型感染是宫颈炎与宫颈癌前病变的主要诱因，高危型HPV病毒载量与宫颈癌前病变无明显相关性。

HPV DNA病毒载量检测在亚临床型女性宫颈癌筛查中的应用价值

目的探讨人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）DNA的病毒载量检测在亚临床型女性宫颈癌筛查中的应用价值。方法拟设计4条分别针对HPVl6，18，33，58与人肛球蛋白的特异性引物与探针，建立一种新型的荧光定量PCR方法，对541例亚临床型女性宫颈组织细胞进行HPV型别和病毒栽量检测。结果541例样本中p球蛋白结果阳性的标本521例，其中56例HPVDNA阳性。HPV16，HPV18型以及多重感染的阳性检出率分别为46．42％（26／56），23．21％（13／56），30．36％（17／56）；感染的最低病毒栽量分别为≥10。拷贝／“细胞”，≥10^4拷贝／“细胞”，≥10^2拷贝／“细胞”；单一型别HPV感染的病毒载量高于多重感染的病毒载量，且二者之间差异有统计学意义（P〈O．05）。结论HPVl6，HPVl8是亚临床女性感染HPV的主要型别，HPVDNA病毒载量的检测为宫颈癌的常规筛查提供了一个动态监测手段。

反向斑点杂交技术应用于人乳头瘤病毒基因分型的研究

人乳头瘤病毒（HPV）感染、传播是宫颈癌与尖锐湿疣发生的重要病因，且HPV多重感染是宫颈癌的一个极其重要的危险因素。目前，已经确定的HPV型别有100多种，其中42种与生殖道疾病有关，不同地区HPV感染类型有较大差异。本研究利用反向斑点杂交法，可同时检测23种HPV型别，包括18种高危型与5种低危型。

双色荧光定量PCR快速分型、定量高危型人乳头状瘤病毒

目的针对高危型人乳头状瘤病毒（humanpapillomavims，HPV）亚型的多样性以及感染病毒载量的高低，旨在建立高危型HPV的定量与分型的快速检测方法，为HPV筛查与治疗提供依据。方法利用2种荧光染料分别标记HPV-16、HPV-33／52／58／67和HPV-18／45、HPV-31探针，同时以B球蛋白基因作为内对照，对120份疑为HPV感染的宫颈脱落细胞样本进行I{I＇V分型与定量，定量范围为5×10^1-5×10^7拷贝/ml，以HC-2杂交捕获法作为“金标准”，评价该方法的特异性与灵敏度。结果荧光定量PCR阳性检出率为52．5％（631120），其中HPV-16、HPV-18／45、HPV-31和m．V-33，52，58，67阳性率分别为36．51％（23／63）、11．11％（7／63）、12．70％（8／63）、58．73％（37／63）；HPV感染的平均病毒载量为1．08×10^7拷贝/ml。荧光定量PCR的特异性为100％，灵敏度为81．82％。结论双色荧光定量PCR能快速分型、定量高危型HPV，可用于HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及疗效观察。