活性氧自由基对心肌细胞损伤效应研究

为探讨活性氧自由基对心肌细胞的影响 ,采用胰蛋白酶酶消化法分离SD乳鼠心肌细胞 ,培养于适当的条件并观察其形态学和生理学方面的特征 ;加入H2 O2 活性氧刺激心肌细胞 ,模拟氧自由基损伤心肌细胞方式 ,构建心肌细胞缺血再灌注损伤的模型并了解H2 O2 对心肌细胞的损伤作用。结果表明胰蛋白酶消化分离的心肌细胞能够在体外完好生长 ,并能够在一段时间内维持其原有的生理特性 ;MTT检测结果和形态学观察结果表明H2 O2 对心肌细胞的损伤与其浓度和作用时间呈正比关系 ,TUNEL和DNA凝胶电泳分析结果显示 ,H2 O2 在心肌细胞中的积累是造成细胞凋亡的主要因素之一。

非促分裂型haFGF对H_2O_2损伤心肌细胞的保护作用研究

目的:了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况,并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm -haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立H2 O2 损伤心肌细胞的模型,检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化,以评价H2 O2 对心肌细胞的损伤状况,并加入一定浓度的nm -haFGF ,观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变,以及凋亡的变化。结果:H2 O2对心肌细胞的损伤呈浓度依赖地加剧;在H2 O2 压力作用下,10 - 80 μg/Lnm -haFGF逐步提高H2 O2 损伤心肌细胞的存活率,其中80 μg/L组的细胞存活力明显大于对照组(P <0 . 0 5 ) ,同时逐步提高SOD活性和降低MDA含量,其中4 0和80 μg/L组的SOD活性明显大于阳性对照组(P <0 .0 5 ) ,4 0和80 μg/L组的MDA含量明显小于阳性对照组(P <0. 0 5 ) ;此外,在0. 0 1mmol/LH2 O2 作用2 4h后,10 μg/L和4 0 μg/Lnm -haFGF组的心肌细胞凋亡百分率分别为32 . 4 %和10 . 7%。结论:心肌细胞的损伤与H2 O2 的浓度呈剂量依赖关系;nm -haFGF对由H2 O2 引起的心肌细胞损伤具有拮抗作用。

酸性成纤维细胞生长因子在培养的乳鼠心肌细胞中分泌表达及其意义

目的 :研究非促分裂型haFGF(non mitogenichumanacidicfibroblastgrowthfactor,nm haFGF)真核表达载体 (pSecTag/nm haFGF)在原代培养的新生SD乳鼠心肌细胞中的分泌表达及其对心肌细胞生理特性的影响。方法 :采用脂质体转染的方法将真核表达载体pSecTag/nm haFGF转染原代培养的心肌细胞 ,转染 4 8h后用免疫印迹法 (westernblotting)检测nm haFGF的表达状况 ,同时用H2 O2 造成心肌细胞损伤 ,观察nm haFGF对心肌细胞的保护作用 ,并观察心肌细胞生理特性的变化。结果 :转染后 4 8h ,心肌细胞在转染nm haFGF基因后能够表达目标蛋白 ,而空载体实验组和未转染组均为阴性 ;MTT法检测结果表明 ,nm haFGF基因的表达产物具有生物活性 ,对H2 O2 造成的心肌细胞损伤有一定的保护作用 ;pSecTag/nm haFGF组的细胞搏动率明显高于阴性对照组 ,nm haFGF基因的表达产物对维持心肌细胞的生理特性具有积极的作用。结论 :转染nm haFGFcDNA能够在原代培养的SD乳鼠心肌细胞中分泌表达 ,并具有其相应的生理活性 ,对H2 O2

伊曲康唑对45例甲真菌病治疗的临床观察

在过去的15年里,广谱抗真菌药伊曲康唑在临床应用治疗真菌感染取得了令人鼓舞的成效.其有效性、安全性和耐药量均优于以往的一些抗真菌药,如两性霉素B、氟胞嘧啶等[1].在皮肤真菌感染中,甲真菌病占了约30%左右,温热南方此比例还略高.我院一直在抗真菌药方面进行努力探索,现将4年来临床使用伊曲康唑治疗甲癣的临床观察报告如下: