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瘦素与绿色荧光蛋白融合基因的合成及其高效表达
1
作者
庞实锋
吴晓萍
+4 位作者
李校堃
郑青
于平野
曲红艳
王艳萍
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期276-279,共4页
目的 :为了便于追踪瘦素 (Leptin)在体内的去向 ,对其进行体内定位 ,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针。方法 :用PCR技术将LeptincDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG ,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中 ,构建成原核表达工程菌BL2 ...
目的 :为了便于追踪瘦素 (Leptin)在体内的去向 ,对其进行体内定位 ,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针。方法 :用PCR技术将LeptincDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG ,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中 ,构建成原核表达工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG。用Western blot杂交检测重组蛋白的免疫原性 ,用荧光显微镜观察融合蛋白及其诱导菌休的发光活性。结果 :DNA测序结果证实设计合成的融合基因与预期一致 ;构建的工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG获得了表达 ,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 ;Western blot杂交检测表明重组蛋白具有Leptin的免疫原性 ;经IPTG诱导后的菌体及蛋白粗提液在荧光显微镜下可观察到其能发射出强烈的绿色荧光。结论 :融合基因在大肠杆菌中实现了高效表达 ,表达的融合蛋白具Leptin的免疫原性和GFP的发光特性。为利用绿色荧光蛋白标记Leptin在动物体内的药物治疗的研究提供了一种新的途径。
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关键词
瘦素
绿色荧光蛋白(GFP)
融合基因
高效表达
下载PDF
职称材料
题名
瘦素与绿色荧光蛋白融合基因的合成及其高效表达
1
作者
庞实锋
吴晓萍
李校堃
郑青
于平野
曲红艳
王艳萍
机构
暨南大学
药学院
生物
制药教研室
暨南大学国家教育部基因组医药生物技术研究开发中心
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期276-279,共4页
基金
广东省生物技术与生物药物重点实验室基金资助项目 (No .2 0 0 2B60 119)~~
文摘
目的 :为了便于追踪瘦素 (Leptin)在体内的去向 ,对其进行体内定位 ,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针。方法 :用PCR技术将LeptincDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG ,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中 ,构建成原核表达工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG。用Western blot杂交检测重组蛋白的免疫原性 ,用荧光显微镜观察融合蛋白及其诱导菌休的发光活性。结果 :DNA测序结果证实设计合成的融合基因与预期一致 ;构建的工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG获得了表达 ,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 ;Western blot杂交检测表明重组蛋白具有Leptin的免疫原性 ;经IPTG诱导后的菌体及蛋白粗提液在荧光显微镜下可观察到其能发射出强烈的绿色荧光。结论 :融合基因在大肠杆菌中实现了高效表达 ,表达的融合蛋白具Leptin的免疫原性和GFP的发光特性。为利用绿色荧光蛋白标记Leptin在动物体内的药物治疗的研究提供了一种新的途径。
关键词
瘦素
绿色荧光蛋白(GFP)
融合基因
高效表达
Keywords
Leptin
Green Fluoresent Protein (GFP)
Fusion Gene
Overexpression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
瘦素与绿色荧光蛋白融合基因的合成及其高效表达
庞实锋
吴晓萍
李校堃
郑青
于平野
曲红艳
王艳萍
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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