干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。

量子点在生物分子、细胞及体内生物成像的研究进展

长期以来，有机染料一直被用来标记生物大分子来研究各种蛋白之间的相互作用以及对细胞功能的影响。但是由于有机染料的一些缺点，例如较窄的激发谱，光稳定性较差，荧光寿命短等，限制了其作为标记物在生物分子、细胞、体内生物成像研究中的应用。量子点（QDs）是近年来发现的一种新型荧光标记物，由于其具有良好的光谱特征和光化学稳定性，良好的水溶性，对细胞、生物体无毒性，因此QDs将成为一种有广泛应用前景的新型标记物。现就量子点在生物分子、细胞及体内生物成像的研究进展进行文献综述。