大白菜细胞质雄性不育系和其保持系的RAPD分析

利用RAPD技术对大白菜细胞质雄性不育系CMS3411-7和其保持系3411-7的基因组DNA进行了比较分析,共使用了269个随机引物,其中有163个引物在两系之间都得到了扩增产物,79个引物扩增结果在两系之间表现出了遗传多态性.找到了不育系和保持系的特异扩增条带CMSOPL01670和MOPB04600.并对这些特异片段的来源及其在细胞质雄性不育中的作用进行了讨论.

载脂蛋白E基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞关系的研究

应用聚合酶链反应(PCR)扩增ApoE基因外显子4中编码112位和158位氨基酸的DNA片段 ,将该长为292bp的PCR产物以HhaI酶切 ,根据其限制性片段长度多态性图谱确定ApoE基因型。对广东汉族人群的50例动脉粥样硬化脑梗塞 (ACI)患者和50例健康对照者的ApoE基因多态性频率的研究结果表明 :所研究的人群中 ,ApoE基因多态性频率与ACI没有关联。ACI患者中各基因型亚组之间血清TG和TC浓度无显著性差异。

大白菜细胞质雄性不育系RAPD特异扩增片段的克隆及其序列分析

利用RAPD技术从大白菜细胞质雄性不育系CMS3411-7的DNA中得到1个特异扩增片段CMSO-PL01670,进一步以该片段为探针进行Dot和Southern杂交证实了该片段为不育系所特有。回收该特异扩增片段并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行序列测定。测序结果表明该片段全长673bp,其碱基组成为A+T=67.16%。通过与GenBank+EMBL+DDBJ+PDB中的455972个序列进行比较,同源性均小于30%,表明该片段为一新发现序列。并且该序列的+4～+216的区域内含有1个可编码70个氨基酸的开放阅读框架。上述结果为今后从分子水平进一步研究大白菜细胞质雄性不育打下了坚实的基础。

封闭循环养殖系统中驼背鲈和斜带石斑鱼生长的研究

研究闭合循环水养殖条件下驼背鲈(Cromileptesaltivelis)和斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)的生长特性。经343d养殖 ,驼背鲈幼鱼平均体质量由24.16g增加到124.4g,平均日生长率为1.2 % ,体质量与养殖时间的关系式为M=32.674e0.0048t,体质量与体长的关系式为M=0.0042L3.6184;斜带石斑鱼幼鱼体质量由20.10g增加到490g,平均日生长率为6.8% ,体质量与养殖时间的关系式为M=34.319e0.0984t,体质量与体长的关系式为M=0.0656L2.7102。

钝顶螺旋藻在LED光电板式光生物反应器中的培养研究

分析研究了LED集成光电板光辐射强度对螺旋藻生物量浓度、螺旋藻比生长速率、藻光合放氧量及藻光合色素等螺旋藻生长特性的影响 ,并分析了LED集成光电板辐射红光及红、蓝组合双波长光质与冷白荧光灯光质对藻类各有效组成部分的影响。结果表明 ,在光辐射强度尚未达到饱和光辐射强度之前 ,光辐射强度决定螺旋藻的比生长速率;超过饱和光辐射强度 ,光合作用产氧量趋向恒定 ,说明螺旋藻光合器官具有光合稳定性 ;与冷白荧光日光灯组相比 ,LED集成光电板辐射红光及红 ,蓝组合双波长光质非常适合螺旋藻的生长并促进细胞干重、叶绿素、藻胆蛋白的增加 ,在相同的光辐射强度[275.9μmol/(m2·s)]下 ,采用LED集成光辐射板辐射单色红光与冷白荧光日光灯光组相比 ,藻胆蛋白、藻细胞干重及叶绿素a分别增加43.39% ,98.40% ,51.563%。

组织工程支架材料偏磷酸钙玻璃陶瓷的多孔性能

文章采用二次烧结法,没有添加发泡剂,制备了一种新型泡沫多孔玻璃陶瓷,主要考察了其多孔性能,分析了其成孔机制并作出成泡沫假设,验证其降解性能和生物相容性能。多孔玻璃陶瓷的制备过程中没有采用发泡剂,但材料可以发泡成孔,材料的配方中,其钙磷物质的量比为0.47,烧结温度选择680℃。X射线衍射图谱证实所得多孔玻璃陶瓷主晶相为偏磷酸钙(β-Ca(PO3)2,CMP)。液体(水)静力称重法计算出其吸水率、显气孔率及体积密度分别为34.6%,43.6%和1.26g/cm3,与树脂成孔法结果类似。扫描电镜图显示,偏磷酸钙玻璃陶瓷孔隙丰富,大孔(100～300μm)和微孔(2～20μm)相互贯通。降解性能检测显示,偏磷酸钙块浸泡于37℃生理盐水28d,失重率9.2%;扫描电镜显示其表面形貌有较大的改变,出现了一些细小条状物质,原因需进一步的分析。细胞实验显示,人骨髓间充质干细胞在偏磷酸钙孔洞里大量生长,且与偏磷酸钙材料表面结合紧密。提示采用二次烧结工艺,无需添加发泡剂,利用其自身配方和性质即可以制备多孔偏磷酸钙玻璃陶瓷,其发泡的主要原因为不定相偏磷酸钙的降解能力强。降解实验和生物相容实验表明所得偏磷酸钙玻璃陶瓷是一种非常有潜力的组织工程支架材料。

T7启动子具有真核生物聚合酶Ⅱ顺式作用因子的功能

根据ａ－鹅膏蕈碱（ａ－ａｍａｎｉｔｉｎ）对真核生物ＲＮＡ聚合酶的选择性抑制，以氯霉素乙酰转 移酶基因（ＣＡＴ）作为报道基因进行体内表达实验，证明Ｔ７噬菌体启动子可为真核生物ＲＮＡ 聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性ＤＮＡ－蛋白质凝胶泳动技术，分别以ＴＡＴＡ框、ＣＡＡＴ 框、ＧＣ框和八核苷酸序列（ｏｃｔａｍｅｒ）为竞争性寡核苷酸分子，发现人工合成的Ｔ７启动子可能 与 ＴＦⅡＤ起始转录因子结合，形成 ＤＮＡ－核蛋白质结合物。将 ＴＡＴＡ框和八核苷酸序列分别 接入Ｔ７启动子上游，ＣＡＴ实验显示八核苷酸序列可以增强ＲＮＡ聚合酶Ⅱ对Ｔ７启动子的转录 起始作用。实验结果表明Ｔ７启动子可作为ＲＮＡ聚合酶Ⅱ的顺式作用因子。

生物传感器在渔业监测中的研究进展

论述了生物传感器在监测渔业环境中的BOD、N、P、病原体、农药和重金属等方面的国内外最新进展 ,分析了生物传感器在海洋渔业应用中存在的主要问题及原因 ,同时阐述了利用基因工程微生物技术、分子烙印技术、多成分实时分析技术等先进技术提高生物传感器的性能并扩大其在海洋渔业领域中的应用范围 ,在海洋渔业环境中为实现生物传感器与计算机在线自动监测与控制 ,开拓新的广阔前景。

在光生物反应器培养螺旋藻中pH值的调控作用分析

在光辐射板式光生物反应器中 ,为实现螺旋藻单藻种群优势生长 ,分析研究了螺旋藻在光生物反应器培养过程中 ,pH值的调控作用。研究结果表明 ,溶液的 pH值不仅显著影响培养基中无机碳源营养基质的离解程度 ,螺旋藻的光合放氧特性 ,而且是控制螺旋藻优势单种培养的必要条件和关键因素 ,当溶液的 pH值控制在 9 0～ 9 5时 ,即使螺旋藻处于低温或营养限制性生长时 。

光生物反应器内设LED光源的特性研究

从LED集成光电板的光电特性、光热效应、光衰减性、光辐射特征与植物和藻类光吸收特征的相匹配性及LED辐射单色光对螺旋藻的光合色素含量的影响等几方面 ,分析研究了LED集成光电板作为光生物反应器内部光源的特性及可行性 ,研究结果表明 ,LED集成光电板作为光生物反应器的内部光源 ,它所发射的单色光谱红光 (6 6 0～ 6 80nm、蓝光 (430～4 50nm) ,不仅能覆盖植物和藻类光合作用所需要吸收的光谱能带 ,促进叶绿素a对光能的吸收和螺旋藻的生长 ,增强光合作用 ,使细胞生物量与光合色素含量显著提高 ;而且不被吸收的光谱减少 ,节能达 38 75% 。

钝顶螺旋藻在LED光电板式光生物反应器中的培养研究

在LED光电板式光生物反应器中.分析研究了LED集成光电板辐射光照强度对螺旋藻生物量浓度、螺旋藻比生长速率、藻光合放氧量及藻光合色素等螺旋藻生长特性的影响,并分析了LED集成光电板辐射红光及红、蓝组合双波长光质与冷白荧光灯光质对藻类各有效组成部分的影响,结果表明,在光照强度尚未达到饱和光照强度之前,光照强度决定螺旋藻的比生长速率;超过饱和光照强度,光合作用产氧量趋向恒定,说明螺旋藻光合器官具有光合稳定性;与冷白荧光日光灯组相比,LED集成光电板辐射红光及红、蓝组合双波长光质非常适合螺旋藻的生长并促进细胞干重、叶绿素、藻胆蛋白的增加,在相同的光辐射强度(50W/m^2)下,采用LED集成光辐射板辐射单色红光与冷白荧光日光灯组相比,藻胆蛋白、藻细胞干重及叶绿素a分别增加43.39％、98.40％、51.563％。

二苯噻吩的微生物脱硫及其在脱煤中有机硫的应用

评述了煤中有机硫的模型化合物二苯噻吩 ( dibenzothiophene,简称 DBT)的微生物脱硫最新进展 ,对二苯噻吩的特异性脱硫的微生物和机理作了较新的介绍并提出了独到的看法 ,指出了当今研究存在的问题和今后的研究方向及其在脱煤中有机硫的应用前景。

杉木粉对塔玛亚历山大藻生长的抑制作用(英文)

近年来 ,世界范围内赤潮 (HABs)发生的频次有明显增长的趋势。尽管已发展了多种控制赤潮的方法 ,但真正能推广应用的方法寥寥无几 ,寻找新的、高效、经济、无污染的赤潮防治方法仍然是赤潮领域研究的热点。本文研究了杉木粉对赤潮藻———塔玛亚历山大藻 (Alexandriumtamarense)生长的影响 ,并对其机制进行了初步探讨。结果显示 ,杉木粉能明显抑制塔玛亚历山大藻的生长 ,杉木粉对藻细胞有明显的沉降作用 ,其多酚提取物具有显著的抑藻作用。这些结果提示 ,杉木粉可能是一种潜在的控制赤潮藻生长的新材料 ,其抑藻机制可能与杉木粉中的多酚类活性物质和杉木粉对藻的沉降作用有关。

光合细菌固定化及其处理含油废水的研究

采用固定化光合细菌PSBRS(Rhodobacter sphaeroides)处理含油废水。比较了3种不同包埋材料固定化光合细菌处理含油废水的效果,对固定化光合细菌去除废水中油的工艺条件进行了优化,并分析了油降解后的脂肪酸成分。通过几种固定化工艺的比较,确定了2%沸石+2%海藻酸钠(CA)的凝胶剂组合作为共固定材料。结果表明,该固定化颗粒降解1000mL含油废水的最佳使用条件为:好氧避光条件下,粒径4mm,包埋比1∶2,颗粒投加量10g。6d后含油废水中油、NH4+-N、PO34-的去除率分别为80.1%、87.4%、96.3%。通过固定化光合细菌与游离态光合细菌对油去除率的比较,固定化光合细菌去油率达到74.95%,与游离态PSBRS(去油率为35.31%)相比,提高约50%以上。此外,分析了油降解后的脂肪酸成分,固定化光合细菌对脂肪酸的去除效果显著,为今后开展高效处理含油废水的微生物筛选和固定化技术研究奠定了基础。

天蚕素A-蜂毒素杂合肽用pBV220载体的表达、纯化和活性测定

为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首先将其拼接成融合肽的完整基因,然后通过前后接头将融合肽基因连接成两侧具有EcoRI和SalI酶切位点的同向串连的多拷贝基因。将5份拷贝的基因克隆至pBV220表达载体,转化E.coliDH5α,温度诱导得到表达量为35%的融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式存在,将包涵体溶解,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得纯化的融合蛋白。融合蛋白再经CNBr切割和阳离子交换层析,得到纯化的抗菌肽,经蛋白质N端测序确认序列正确。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。

抗菌肽与碱性成纤维细胞生长因子基因的融合及其在酵母中的表达

从重组质粒ｒＢＳ上切下柞蚕抗菌肽Ｄ基因片段，切去终止密码后连接到重组穿梭质粒ｐＶＴ－ＧＦ上碱性成纤维细胞生长因子ｃＤＮＡ的５′端，使密码框正确排列，构建成融合基因重组质粒ｐＶＴ－ＣＤＧＦ，转化到酵母中进行表达。转化子酵母蛋白粗提物用Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２Ｄ３１作指示菌进行抑菌圈测试，初步检出具有抑菌活性，用ＥＬＩＳＡ检测证明其具有碱性成纤维细胞生长因子的抗原性。

LDL受体基因内含子15结构分析及其在家族性高胆固醇血症基因诊断中的应用

为了解人类 ＬＤＬ受体基因内含子 １５的遗传背景，利用长链 ＰＣＲ和锚定 ＰＣＲ分离了 ＬＤＬ受体基因外显子１５－内含子１５－外显子１６和内含于１５的３’末端片段。利用Ｄｙｎａｌｂｅａｄｓ 固相单链分离ＰＣＲ产物直接测序法测定了内含子１５ ３’末端１２２２个碱基序列。序列显示：３’ 末端含有由１６个碱基组成的典型３’末端剪接位点；３’端上游第３１个碱基处含有经典分支位 点。除了经典分支位点外，在３’末端上游第２０个碱基处，还含有一个可能的隐蔽分支位点。 序列还显示了被认为与血清胆固醇水平相关的ＰｖｕⅡ酶切多态性的碱基变异性质，即碱基由 Ｃ－Ｔ的改变同时利用所测的序列，设计了相应的引物，建立了ＰＣＲ检测ＬＤＬ受体基因内含 子 １５ ＰｖｕⅡ多态性技术，并证实此技术可以快速、简便地应用到家族性高胆固醇血症的基因 诊断上。

镧对塔玛亚历山大藻生长的影响

随着稀土的大规模使用 ,天然水体中的稀土积累越来越多 ,稀土对水生态体系的影响引起了人们的广泛关注。本文模拟稀土镧积累的水体环境 ,研究此种情况对塔玛亚历山大藻生长的影响 ,结果显示低浓度镧的积累对塔玛亚历山大藻的生长有促进作用 ,并呈一定的时间、剂量效应关系。

硝酸铈对钙调素及调节蛋白Ca^(2+)-ATP酶基因表达的影响

运用逆转录聚合酶链式反应研究了硝酸铈对大白鼠肝脏CaMⅠ ,PMCA1b基因表达的影响。腹腔注射高、低浓度硝酸铈均不会引起CaMⅠ ,PMCA1b基因表达的变化 ,提示硝酸铈对钙调素、Ca2 + ATP酶的影响可能仅处于转录后水平。

铁对尖刺拟菱形藻生长及光合作用的影响

目的:研究铁对尖刺拟菱形藻生长及光合作用的影响,探讨其作用机制及生态意义.方法:以赤潮硅藻尖刺拟菱形藻为材料,采用细胞计数、测光合放氧和测DCMU增益叶绿素荧光的方法,研究了不同铁浓度对该藻生长和光合作用的影响.结果:尖刺拟菱形藻的最适生长铁浓度为10-7～10-6mol/L,缺铁(10-9～10-8mol/L)抑制其生长.在10-9～10-6mol/L,随着铁浓度的增加,光合放氧及叶绿素合成均受到促进,荧光增益比率FD/FN上升,荧光产额F/Chla下降.结论:缺铁使光合器官吸收的光能减少,光合电子传递链的活性降低,从而抑制光合作用,延缓生长.提出"临界铁浓度"概念,并有可能作为预报赤潮的指标.