生物技术药物药代动力学研究的方法学和实验设计

生物技术药物由于自身具有的特点 ,使得其在体内的药代动力学机制比传统药物更为复杂。近年来 ,对于这类药物在体内的代谢机制的研究日趋增加 ,研究方法也日趋成熟。概述了生物技术药物的药代动力学研究方法以及实验设计的特点。

聚乳酸壳聚糖复合支架材料的生物相容性研究

为改善聚乳酸作为骨组织工程支架材料降解速率过快、亲水性差和降解产物呈酸性等缺点,本研究制备了一系列高孔隙率的聚乳酸/壳聚糖三维多孔复合支架材料,通过软骨细胞培养、动物皮下和肌肉植入试验对其进行了生物相容性研究。软骨细胞培养试验表明软骨细胞能在复合支架材料贴附增殖,材料无明显毒性;植入试验结果显示纯聚乳酸在体内2个月左右已经降解吸收,失去力学强度,复合材料三个月后仍能保持一定的力学强度和形状,而且组织切片也同时表明复合材料的炎症反应远远低于纯聚乳酸材料。

现代技术在莪术研究中的应用

莪术在提取、药理学研究、质量控制、种属鉴定中广泛运用了分子生物学技术等现代技术,文章介绍了目前莪术的最新研究技术。

利用荧光定量PCR技术快速检测转基因产品的研究

针对转基因植物普遍含有的35S启动子进行了通用引物和Tapman荧光探针的设计合成,利用荧光定量PCRfluorescencequantitativepolymerasechainreactionFQ-PCR技术对转基因大豆、玉米和辣椒进行非特异性检测,结果显示出转基因样本有阳性扩增条带,非转基因样本呈现阴性。实验表明,荧光定量PCR检测较普通的检测方法具有高效、准确的特点,在转基因产品的分析检测方面提供了一个实用的方法。

浅谈高校产学研合作促进护肤品原料开发及技术创新

我国护肤品产业起步相对较晚,法规相对滞后及企业在基础研发上投入不够等,护肤品企业以中小型为主,缺乏核心竞争力。加大基础研发投入,提高护肤品牌的核心竞争力是本土护肤品企业的当务之急。高校处于技术前沿,加强高校产学研合作,推动校企优势互补,对提升国产护肤品品牌的科技内涵和主动创新具有非常重要的意义,将对护肤品企业的发展起到积极推动作用。

生物活性多肽TVA促进蛋白类大分子经皮渗透行为的研究

目的评价生物活性多肽TVA(Tvigour A)及其促进大分子蛋白皮肤渗透的行为。方法分别在细胞、在体大鼠皮肤和健康志愿者手臂皮肤进行TVA自身及促进大分子蛋白透皮吸收的能力测试实验。激光共聚焦观察TVA携带血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)进入大鼠嗜铬神经瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC12)的经时过程;荧光显微镜观察TVA在SD大鼠皮肤内的分布;胶带粘贴法结合ELISA测定TVA携带的表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)渗透到健康志愿者手臂皮肤表皮的含量。结果生物活性多肽TVA能携带大分子多肽/蛋白PDGF进入PC12细胞;在大鼠皮肤表皮层和真皮层均观察到绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的TVA;D-squame R盘所取各层皮肤角质细胞中的基因重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF),rhEGF含量在各时间点均比单rhEGF水溶液组高。结论生物活性多肽TVA可以提高大分子药物进入细胞的数量,提高大分子药物的透皮吸收,可作为大分子化合物的皮肤促渗剂。

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进创伤愈合的研究

目的 研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rh-a FGF)对兔创伤的促愈合作用。方法 采用兔背部刀割伤模型 ,将 rh-a FGF溶液隔日一次滴注于创面 ,用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第 4、8、1 2、1 6天创面面积 ,用注水法测量伤腔容积 ,伤后第 8、1 6天取创面组织 ,观察创面的病理学变化 ,包括肉芽组织生长与再上皮化情况。结果 rh-a FGF可明显加速兔皮肤创伤的愈合 ,使创面面积明显缩小 (P<0 .0 5 ) ,使伤腔容积明显减少 (P<0 .0 5 )。组织学检查 :rh-a FGF组创面伤后 8天成纤维细胞生长活跃、数量多 ,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组 ;伤后 1 6天 ,创面收缩与再上皮化明显 ,新生上皮向创面中心爬行较快。结论 rh-a FGF对兔背部刀伤创面有明显的促修复作用。

生物活性多肽护肤品的基础及应用

生物活性多肽在人体内含量极少 ,但生物活性极高 ,具有多种重要的生物学效应和生理功能。多种生物活性多肽与皮肤细胞的生长、分裂、分化、增殖和迁移有关 ,它们能够提供皮肤养分 ,延缓皮肤衰老 ,促进皮肤创面修复。实验研究和临床应用均表明 ,将生物活性多肽添加到美容化妆品中 ,可以有效地与皮肤细胞发生作用 ,发挥其突出的美容护肤功效 ,对于护肤品功能提高具有重要意义。

天蚕抗菌肽AD基因在AcNPV载体系统中的表达研究

目的 研究利用昆虫杆状病毒载体系统在昆虫培养细胞和虫体中高效表达新型多肽抗生素天蚕抗菌肽AD(cecropinAD ,CAD)。方法 采用聚合酶链反应 ( polymerasechainreaction ,PCR)点突变技术改造CAD基因 ,改造后的CAD基因先克隆到质粒 pGEM Teasyvector中进行鉴定和序列分析 ,然后再亚克隆到苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (Autographacalifornicanuclearpolyhedrosisvirus ,AcNPV)表达载体pAcGP67B中 ,获得重组病毒载体 pAcAD。用重组病毒载体 pAcAD和野生AcNPVDNA共感染草地夜蛾 (Spodopterafrugiperdoda)Sf9细胞 ,经空斑法筛选得到重组病毒AcNPVAD。重组病毒AcNPVAD经PCR扩增鉴定 ,证实了CAD基因已经整合到重组病毒AcNPVAD中。结果 以AcNPVAD转染Sf9细胞和苜蓿丫纹夜蛾幼虫 ,抑菌活性试验证实CAD基因在昆虫培养细胞Sf9和苜蓿丫纹夜蛾幼虫虫体中均得到表达 ,表达产物具有抑菌作用。通过离子交换层析 ,杂蛋白基本去除 ,重组抗菌肽获得初步纯化 ,重组抗菌肽活性峰位于 0 75mol/L处。结论 CAD基因在昆虫杆状病毒载体系统获得了表达 ,表达产物具有抑菌活性。

紫外辐射对皮肤角化细胞的影响及其防护的研究

利用紫外线照射人皮肤角化细胞 ,采用流式细胞技术观察细胞周期的进程和细胞凋亡情况 ,并研究了人参皂甙单体Rg -1和Rb -1对紫外辐射的保护作用。结果表明一定剂量的紫外线可明显诱导人皮肤角化细胞S期阻滞及细胞凋亡 ,人参皂甙单体Rg -1和Rb -1能够释放S期阻滞、抑制细胞凋亡 ,对细胞的紫外辐射损伤具有不同程度的保护作用 。

兰索拉唑抗实验性胃溃疡作用的研究

目的 :研究注射用兰索拉唑对大鼠实验性胃溃疡的影响。方法 :采用大鼠出血休克性胃溃疡、水浸应激性胃溃疡及幽门结扎性胃溃疡模型 ,观察兰索拉唑静脉注射对损伤胃粘膜的保护作用。结果 :兰索拉唑 15 - 6 0mg/kg事先给药 ,对 3种胃溃疡模型都有明显的抑制溃疡形成作用 ,且有良好的量效关系。在同等剂量下兰索拉唑和奥美拉唑的抗溃疡作用无显著差异 ,但对水浸应激性胃溃疡的疗效明显强于后者 (P <0 0 1)。结论 :兰索拉唑静脉注射明显抑制大鼠实验性胃溃疡的形成。

基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究

目的 :观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用。方法 :治疗组 (12 82例 )和对照组 (439例 )被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区 (包括刃厚和中厚供皮区 )和慢性 (包括残余小创面和慢性溃疡 )创面 4大类。分别观察应用rbFGF后不同时间创面愈合面积的百分比、创面完全愈合时间 ,以及用药前后的全身情况和不良反应。结果 :浅Ⅱ度烧伤 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 1 7%± 2 6 4 %和 (12 6± 2 9)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 70 6 %± 2 5 0 %和 (10 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。深Ⅱ度烧伤 15d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 3 3%± 2 5 4 %和 (2 1 9± 5 5 )d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 6 9 7%± 2 7 0 %和 (18 5± 4 4 )d(P <0 0 0 1)。供皮区创面 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 7 6 %± 2 9 4 %和(11 4± 2 7)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 72 1%± 2 8 0 %和 (9 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。慢性创面完全愈合时间 ,对照组为 (2 8 0± 18 0 )d ,治疗组 (2 2 1± 16 )d(P =0 0 6 8)。用药前后血常规、肝、肾功能无异常变化。结论

人参三醇组甙抗辐射作用的研究

目的:探讨人参三醇组甙(panaxatriol)的辐射防护作用,为开发相关的护肤产品提供实验依据。方法:小鼠接受X射线照射前用人参三醇组甙灌胃,照射后3h取小鼠骨髓细胞制备染色体标本,观察骨髓细胞染色单体型和染色体型畸变以及畸变细胞数。结果:辐照前给予人参二醇组甙200～400 mg/kg可降低辐射诱发染色体和细胞的畸变;给药剂量和给药时间与防护效应呈正相关,照射剂量与防护效应呈负相关。结论:人参三醇组甙对骨髓细胞染色体具有较好的辐射防护作用。

莪术油喷雾剂的研制及抗病毒作用的实验研究

目的:研制莪术油喷雾剂,并对其抗病毒作用进行实验研究。方法:对莪术油葡萄糖注射液进行剂型改革,确定莪术油喷雾剂的处方和制备工艺,用HPLC法测定莪术醇和=牛儿酮的含量,同时进行了莪术油喷雾剂体内外抗病毒实验。结果:制备的莪术油喷雾剂质量可控,对流感病毒,副流感病毒Ⅰ、Ⅲ,呼吸道合胞病毒,3、7型腺病毒有轻微抑抑制作用,对副流感Ⅱ型病毒有较强的抑制作用。结论:本莪术油喷雾剂制备简单易行,给药方便,具有一定的抗病毒作用。

地塞米松影响小鼠胸腺细胞c-Myc表达以及凋亡研究

目的 :研究在地塞米松 (DEX)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中c -Myc信号变化特点及其与下游caspase - 3变化的相关性 ,以进一步探讨c -Myc在小鼠胸腺细胞凋亡过程中的作用机制。方法 :以终浓度 1μmol/L地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡 ,通过AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术测定 30min、3h、6h和 9h凋亡和坏死细胞比率 ,在 6h时点电镜观察细胞形态 ,利用SDS -PAGE及Westernblot检测 0min、30min、1h和 3h细胞内c -Myc和caspase - 3信号变化特点。结果 :在 1μmol/LDEX诱导下 ,小鼠胸腺细胞在 30min、3h、6h和 9h凋亡比率分别为(5 70± 0 4 6 ) %、(35 79± 1 13) %、(5 0 6 1± 2 15 ) %和 (35 5 2± 1 6 6 ) % ,对照组分别为 (5 97± 0 2 5 ) %、(10 2 0±0 71) %、(12 10± 0 6 6 ) %和 (15 4 5± 0 5 1) % ,组间差异显著 (P <0 0 1)。相应DEX组坏死比率分别为 (4 5 8±0 5 1) %、(4 6 6± 0 6 7) %、(2 5 36± 1 6 4 ) %和 (46 99± 2 6 7) % ,对照组分别为 (4 38± 0 39) %、(4 19± 0 73) %、(9 6 3± 1 2 5 ) %和 (13 38± 0 72 ) % ,组间差异显著 (P <0 0 1) ;电镜观察结果显示DEX处理 6h见较多典型凋亡细胞。对照组在 0min即可检测到c -Myc的明显表达 ,30min略见增多 ,1h?

多肽、蛋白类药物脂质体研究进展

脂质体做为多肽、蛋白类药物一种新型给药载体有控制药物释放、降低药物的毒性、提高药物的靶向性等突出优点,具有广阔的应用前景。通过查阅近10年来多肽和蛋白类药物脂质体研究的相关资料,总结论述了脂质体作为多肽、蛋白类药物载体在新的制备方法、新型脂质体、产业化进展三个方面的最新研究动向,指出了多肽、蛋白类药物脂质体在研究应用中存在的不足,并展望了多肽、蛋白类药物脂质体未来发展方向。

地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡和ERK1/2 MAPK及钙离子浓度关系的研究

目的 :研究胸腺细胞凋亡和ERK1/ 2途径及钙离子内流之间关系 ,以进一步探讨细胞凋亡可能的信号通路机制。方法 :以地塞米松 (DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型 ,通过流式细胞术和电镜测定模型的稳定性 ,利用激光扫描共聚焦分析测定细胞内 [Ca2 + ] i、SDS PAGE及Westernblot检测细胞内总量和磷酸化ERK1/ 2MAPK。结果 :仅在完全RMPI 1640培养基培养条件下 ,小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为 (2 90±0 62 ) % ,而在 2 5× 10 -6mol/LDEX诱导下 ,3h培养组 (12 70± 2 44) %、6h培养组 (53 55± 4 59) %发生了细胞凋亡 ,细胞内Fluo 3绿色荧光明显增强 ;正常细胞ERK1/ 2总量随时间变化不明显 ,而DEX刺激下 ,ERK1/ 2总量随时间呈递减趋势。结论 :DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中 ,磷酸化ERK1/ 2信号被迅速抑制 ,细胞内 [Ca2 + ] i迅速上升 ,推论磷酸化ERK1/ 2信号阻断与 [Ca2 + ]

复方莪术油溶液抗H5N1亚型禽流感病毒的作用研究

目的:对复方莪术油溶液在流感病毒的MDCK细胞上和在非免疫鸡内抗禽流感H5N1亚型病毒的作用进行了研究。方法:采用细胞病变效应(CPE)抑制试验和MTT测定法,研究复方莪术油溶液及其有效成分莪术醇和金丝桃素在MDCK细胞上对H5N1病毒的灭活作用,对病毒感染的阻滞作用,对病毒吸附的抑制作用以及对被病毒入侵的细胞的治疗作用;另外,用复方莪术油溶液对14日龄非免疫试验鸡连续经口喂药1周,采用禽流感病毒H5N1攻击鸡群,攻毒的同时开始给药,观察药物对鸡的保护作用。同时与单方莪术油溶液、贯叶连翘水提取液和阳性对照药奥司他韦以及金刚烷胺进行了比较。结果:在体外实验中,复方莪术油溶液及其有效成分莪术醇和金丝桃素通过灭活病毒,阻滞病毒感染,抑制病毒吸附和治疗病毒引起的损伤而发挥抗H5N1亚型禽流感病毒的作用;在体内实验中它们对染毒鸡具有较好的预防保护作用,可延长染毒鸡的平均存活天数,与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.01),奥司他韦与金刚烷也具有相似的抑制病毒的作用。结论:复方给药的效果优于单方,并且主要在预防病毒感染环节发挥抑制作用。