低强度氦-氖激光对体外培养的兔角膜内皮细胞增殖的影响

目的探讨不同条件低强度氦氖激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞增生的影响。方法体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后,MTT比色法检测其增生活性;通过生物显微镜、组织化学染色观察其照射前后形态学变化;通过流式细胞仪检测其照射前后细胞周期的变化等。结果MTT检测结果显示,体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后,其增生活性提高,本实验中最适照射强度和时间分别是5mW·cm-2、600s;流式细胞仪细胞周期检测结果显示:激光照射组的细胞增生指数明显高于对照组,而与碱性成纤维细胞生长因子组比较差别无显著性意义。结论低强度激光在一定程度上可促进角膜内皮细胞的增生。

转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶构建三维角膜基质

目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力。结果实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长。2组细胞均随培养时间延长明显增生(P=0.000)。共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富。实验组透光度稍差于对照组。实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强。结论酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建。