阿托伐他汀对冠状动脉慢血流患者心率恢复的影响

目的:探讨冠状动脉慢血流(coronary slow flow phenomenon,CSFP)患者运动负荷实验后3 min内的心率恢复(heart rate recovery,HRR)改变以及阿托伐他汀对这类患者心率恢复的影响。方法:入选56例CSFP患者,分为常规治疗组(16例)和阿托伐他汀组(40例),另选15例健康体检者为正常对照组。患者治疗前后均进行心电图运动负荷试验,记录静息心率、峰值心率、代谢当量(metabolic equivalent,METs)及运动后3 min内的心率,计算运动后3 min的心率恢复(HRR1,HRR2,HRR3)及心率恢复的校正值(percent recovery of HRR,HRR1%,HRR2%,HRR3%),比较三组间心率恢复指标及METs的关系。结果:(1)治疗前常规治疗组和阿托伐他汀组前2 min的心率恢复值、心率恢复的校正值及METs比较,差异无统计学意义(P>0. 005),但与对照组比较显著减低,差异有统计学意义(P <0. 01)。(2)治疗12周后,阿托伐他汀组前2 min心率恢复值、心率恢复的校正值及METs改善,较治疗前及常规药物治疗后差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:冠状动脉血流缓慢患者心率恢复明显减低,给予阿托伐他汀治疗后可以有效改善其心率恢复指标及代谢当量。

趋化素通过上调磷酸化JNK促进小鼠血管平滑肌细胞的增殖

目的:利用慢病毒构建趋化素基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株,观察沉默趋化素基因后血管平滑肌细胞的增殖情况并探讨其机制。方法:将正常血管平滑肌细胞、趋化素基因干扰对照血管平滑肌细胞株和趋化素基因缺陷性血管平滑肌细胞株分成正常组、增殖组、对照组和沉默组,增殖组加入血小板源性生长因子BB促进增殖,采用细胞计数和Brd U法检测血管平滑肌细胞增殖,采用Western blot检测丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的蛋白水平。结果:增殖组血管平滑肌细胞的细胞数目和Brd U的A值显著高于正常组(P<0.05);与正常组相比,沉默组的血管平滑肌细胞数目和Brd U的A值显著降低(P<0.05);与此同时,对照组与正常组之间的血管平滑肌细胞增殖情况无明显差异。各组血管平滑肌细胞之间的p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38 MAPK和p38 MAPK水平无明显变化,增殖组血管平滑肌细胞的p-JNK蛋白表达增加,而沉默组血管平滑肌细胞的p-JNK水平下降。结论:趋化素具有促进小鼠血管平滑肌细胞增殖的作用,该作用可能与p-JNK表达上调相关。

微小RNA-146a上调cyclin D1表达诱导大鼠血管平滑肌细胞的增殖

目的:采用基因芯片技术研究小分子RNA-146a(miR-146a)促进血管平滑肌细胞增殖的作用靶点并进行验证。方法:原代培养大鼠血管平滑肌细胞,分成mimics组、inhibitor组、control组、sham组,分别体外转染miR-146a mimics(50nmol/L)、miR-146a inhibitor(50 nmol/L)、miR-146a错义链(50 nmol/L)、PBS,Real time PCR测定转染后miR-146a水平,CCK8法检测转染后血管平滑肌细胞增殖情况。采用基因芯片检测inhibitor组和control组基因表达谱,通过生物信息学技术筛选出差异基因和调控的信号通路。对筛选出来的信号通路用Real time PCR和Western blot进行验证。结果:转染48 h后,inhibitor组血管平滑肌细胞的miR-146a水平明显低于control组和sham组(P<0.01),inhibitor组血管平滑肌细胞的OD值明显低于control组、sham组(P<0.05)。通过对基因表达谱分析发现,p53信号通路被miR-146a上调。用Real time PCR和Western blot进行检测发现,p53信号通路中关键分子p53、caspase3、PTEN的mRNA和蛋白水平无明显变化(P>0.05),而mimics组VSMC中cyclin D1的mRNA和蛋白水平增加(与sham相比,P<0.05),inhibitor组VSMC中cyclin D1的mRNA和蛋白水平下降(与sham相比,P<0.05)。结论:miR-146a可能通过上调细胞周期蛋白cyclin D1的表达促进大鼠血管平滑肌细胞的增殖。

ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化进程中趋化素表达的变化及意义

目的:观察ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生过程中趋化素表达的变化,探讨趋化素与动脉粥样硬化之间的关系。方法:在ApoE^(-/-)小鼠中通过高脂高胆固醇喂饲构建动脉粥样硬化模型,分别在喂饲后第0、4、8、12、16周时采血和分离主动脉组织,通过H-E染色和油红O染色观察主动脉组织的斑块形态,计算主动脉内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量;通过免疫荧光观察主动脉组织中趋化素的表达;采用ELISA法检测血清趋化素水平。结果:在高脂高胆固醇饲养后第8周时ApoE^(-/-)小鼠主动脉组织开始出现动脉粥样硬化,在第16周时主动脉粥样硬化最显著,主动脉组织的内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量显著升高;第8周时主动脉组织中趋化素开始出现阳性表达,第16周时趋化素的表达最显著;血清趋化素水平从第4周时开始上升,第8周时达到高峰,第12周开始下降,但到第16周时ApoE^(-/-)小鼠血清趋化素水平仍明显高于0周时的水平。结论:趋化素可能与ApoE^(-/-)小鼠主动脉粥样硬化的发生发展相关。

趋化素促进小鼠血管平滑肌细胞增殖的实验研究

目的:利用慢病毒构建趋化素基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株,观察沉默趋化素基因后血管平滑肌细胞的增殖情况。方法:将正常血管平滑肌细胞、趋化素基因干扰对照血管平滑肌细胞株、趋化素基因缺陷性血管平滑肌细胞株分成正常组、增殖组、对照组和沉默组,增殖组、沉默组加入血小板源性生长因子-BB促进增殖,采用细胞计数和BrdU法检测血管平滑肌细胞增殖。结果:增殖组血管平滑肌细胞的细胞数目和BrdUOD值显著高于正常组(P<0.05);与正常组相比,沉默组的血管平滑肌细胞数目和BrdUOD值显著降低(P<0.05);与此同时,对照组与正常组之间的血管平滑肌细胞增殖情况无明显差异(P>0.05)。结论:趋化素具有促进血管平滑肌细胞增殖的作用。

ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化进程中microRNA-146a的表达变化

目的:观察ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生过程中microRNA-146a(miR-146a)的变化,探讨miR-146a与动脉粥样硬化之间的关系。方法:在ApoE^(-/-)小鼠中通过高脂高胆固醇喂饲构建动脉粥样硬化模型,分别在喂饲后第0周、4周、8周、12周、16周时采血和分离主动脉组织,通过HE染色和油红O染色观察主动脉组织的斑块形态,计算主动脉内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量;采用Real-Time PCR检测第0周、4周、8周、12周、16周时血浆和主动脉组织的miR-146a水平。结果:在高脂高胆固醇饲养后第8周时ApoE^(-/-)小鼠主动脉组织开始出现动脉粥样硬化,在第16周时主动脉粥样硬化最显著,16周时主动脉组织的内膜/中膜比值和主动脉斑块的脂质含量显著升高(P<0.01);在动脉粥样硬化发生过程中,小鼠血浆和主动脉组织中的miR-146a水平均明显升高,其中血浆miR-146a的峰值出现在第8周(P<0.01),之后血浆miR-146a逐渐下降;而主动脉组织的miR-146a水平从第4周开始升高(P<0.05),逐渐上升至16周时达到峰值(P<0.01);主动脉组织中miR-146a水平与ApoE^(-/-)小鼠主动脉粥样硬化呈强正相关性(r=0.892 5,P<0.000 1)。结论:miR-146a可能参与了ApoE^(-/-)小鼠主动脉主动脉粥样硬化的发生。