p53蛋白堆积和CK-18neo在非小细胞肺癌组织中的病理意义

目的 :检测非小细胞肺癌组织的p5 3蛋白堆积水平和细胞骨架蛋白 18新抗原决定簇 (cytokeratin 18neo-epitope,CK - 18neo)的暴露情况 ,探讨p5 3蛋白和CK - 18neo在肺癌发生发展过程中的作用及其临床病理意义。方法 :用免疫组化法检测 6 2例非小细胞肺癌以及 10例对照组织中p5 3蛋白的堆积和CK - 18neo的暴露情况。用显微图象分析仪测定p5 3免疫组化反应的强度 ,并作定量分析。以凋亡指数 (AI% )表示CK - 18neo的阳性检出率。结果 :①非小细胞肺癌组织中p5 3的阳性检出率为 48 39% (鳞癌为 5 1 72 % ,腺癌为 45 45 % ) ,对照组p5 3的阳性率为0 0 0 % (P <0 0 1) ;②非小细胞肺癌组织的AI%为 1 10 % (鳞癌 0 95 % ,腺癌 1 2 4% ) ,对照组为 1 0 6 % ,各组间无显著差异 ;③非小细胞肺癌组织中p5 3(- / + )、p5 3(5级 )和p5 3(PU)呈正直线相关关系 (P <0 0 1)。结论 :本实验结果提示 ,突变型p5 3基因可能参与NSCLC的发生机制 ,NSCLC的发生和发展与癌细胞的过度增生和细胞凋亡减少有关。

贲门癌中转移相关基因MTA1表达的临床病理研究

目的探讨MTA1的表达与贲门癌浸润转移及临床病理分级之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测60例贲门癌组织和18例癌旁黏膜组织中MTA1的表达。结果贲门癌中MTA1的表达显著高于癌旁黏膜(P=0.001),淋巴结转移组MTA1的表达显著高于无淋巴结转移组(P=0.045),低分化腺癌组MTA1的表达显著高于高、中分化腺癌组(P=0.039)。结论MTA1的表达促进贲门癌的转移且与贲门癌的分级有关;检测MTA1的表达可作为判断贲门癌的恶性程度、转移等生物学行为的参考指标。

基底细胞癌Sexton病理亚型标准与其生物学行为的关系

目的 探讨基底细胞癌 (BCC)Sexton病理亚型划分标准与其生物学行为的关系。方法 按该标准将 46例BCC划分为 6个亚型 ,并据此分为非侵袭性和侵袭性BCC组。采用免疫组化SP法检测Bcl- 2蛋白在石蜡切片上的表达 ,并进行图像分析以比较两组BCCBcl- 2蛋白的表达差异。结果 46例BCC中结节型、混合型和浸润型所占比例最高 ,分别为 39% ,2 8% ,1 7% ;非侵袭性BCC组 2 1例 ,侵袭性组 2 5例 ;前者Bcl- 2蛋白表达水平高于后者 ,P值为0 0 0 5。结论 对BCC作出病理亚型的诊断是必要的 ;Sexton病理亚型标准反映了BCC生物学行为的差异 ,采用该标准可区分非侵袭性和侵袭性BCC ,有利于治疗方法的选择。

多媒体技术在病理学教学中应用的利弊分析

多媒体技术极大地促进了病理学教学,深化了病理学教学的内涵、拓展了病理学教学的外延;但也带来某些负面影响.初步探讨了多媒体技术在病理学教学应用的利与弊,旨在促进多媒体技术更好地为病理学教学服务.

牙源性透明细胞癌的临床病理特征及鉴别诊断

目的 通过对罕见的牙源性透明细胞癌 (ClearCellOdontogenicCarcinoma,CCOC)临床病理特征的分析 ,探讨其组织学形态与恶性生物学行为的关系及鉴别诊断。方法 对 1例CCOC进行了组织学、组织化学、免疫组化及透射电镜研究。结果 肿瘤细胞的CK、EMA阳性。透明细胞PAS染色阳性 ,消化后阴性 ,电镜证实有糖原颗粒 ,且以线粒体明显增生、肿胀为特征。结论 原发于颌骨内的透明细胞癌 ,PAS染色及CK、EMA的阳性表达有助于牙源性透明细胞癌的诊断 ,并支持CCOC为牙源性上皮性肿瘤。肿瘤细胞的线粒体增生明显、线粒体内糖原沉积的特征可能与其侵袭力强 ,复发、转移早等恶性生物学行为有关。

乙型肝炎病毒感染与弥漫大B细胞淋巴瘤临床、病理及预后的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)临床、病理及预后的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2004年1月至2013年1月该院收治的150例DLBCL患者的乙肝5项和肝功能,并选取同期住院的其他肿瘤患者150例及门诊健康体检者150例作为对照。结果 DLBCL患者乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)的阳性率(22.7%)显著高于其他肿瘤组患者(9.3%)和健康对照组(8.0%)(P<0.05)。HBs Ag阳性组及HBs Ag阴性组DLBCL临床分期、肝脾受累、乳酸脱氢酶(LDH)含量、结节外受累区域和国际预后指数评分(IPI)差异具有统计学意义(P<0.05),且二组患者化疗前后肝功能损伤情况比较亦有统计学差异(P<0.05)。HBs Ag阴性组治疗完全缓解率及生存期均显著高于HBs Ag阳性组(P<0.05)。结论 DLBCL患者HBs Ag阳性率显著高于其他恶性肿瘤患者及健康对照,且HBV感染与DLBCL患者临床病理特征及预后相关。

粒细胞集落刺激因子干预性治疗大鼠心肌梗塞的实验研究

目的 :探讨用粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)干预性治疗心肌梗塞动物模型的作用。方法 :健康大鼠随机分为心肌梗塞干预性治疗组和心肌梗塞对照组。干预性治疗组予G -CSF 10 μg·kg-1·d-1皮下注射 5d ,并于第 3d用盐酸异丙肾上腺素 (ISO) 5mg/kg腹腔注射复制大鼠心肌梗塞模型。对照组皮下注射等量生理盐水 5d ,也于第 3d用ISO复制心肌梗塞模型。两组均于注射ISO后 2周、4周将动物处死 ,取出心脏 ,病理检查大鼠心肌梗塞的病理变化情况。结果 :注射ISO后 2周、4周 ,干预性治疗组心室肌疤痕组织面积显著小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,并可见到心肌细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞的再生。结论 :G -CSF能促进梗死后心肌组织再生 ,明显减少心肌梗塞后疤痕组织范围 ,可用于急性心肌梗塞的干预性治疗。

桂枝茯苓丸对子宫内膜异位症大鼠血管生成的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸对子宫内膜异位症(EM)模型大鼠血管生成因子(VEGF)和异位内膜微血管密度(MVD)的影响。方法:SD大鼠建模,3周后将建模成功的大鼠随机分为不用药组(U)、桂枝茯苓丸组(GFW)、丹那唑组(D)和联合用药组(S),设假手术组(C)为对照,予相应处理4周后,观察各组异位子宫内膜体积和形态学的变化,计数腹腔液巨噬细胞,放射免疫法测定各组大鼠外周血、腹腔液及巨噬细胞培养液白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α),免疫组化法测定血管内皮生长因子(VEGF)在异位内膜中的表达,并通过CD34标记异位子宫内膜血管,测定其微血管密度(MVD)。结果:GFW组、D组和S组异位内膜呈现不同程度萎缩,腺体明显减少,腹腔液巨噬细胞计数减少,GFW组、D组及S组大鼠外周血、腹腔液及巨噬细胞培养液IL-8、TNF-α降低,异位内膜VEGF表达减弱,MVD也明显减少,其中以S组最为明显。结论:桂枝茯苓丸和丹那唑可以抑制EM模型大鼠异位内膜的血管生成,使异位内膜萎缩,当二者联合用药时,作用更强。

肿瘤耐药相关蛋白及β-catenin在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

背景与目的:随着化疗药物在肿瘤临床治疗中的广泛应用,肿瘤对化疗药物产生多药耐药性的问题越来越突出,已成为肿瘤联合化疗失败的主要原因之一。本研究检测β-catenin以及肿瘤耐药相关蛋白MRP2、P-gp、Bcl-2在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcar cinoma,ESCC)中的表达,探讨它们在ESCC的多药耐药发生发展中的作用和相互关系。方法:运用组织芯片技术、免疫组织化学方法以及图像分析技术检测582例ESCC及其癌旁294例正常黏膜、92例单纯细胞增生和87例不典型增生上皮组成的组织芯片中MRP2、P-gp、β-catenin及Bcl-2的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果:MRP2、Bcl-2在ESCC中的累积光密度(integral optical density,IOD)值[分别为(195.7±175.9)×103和(90.5±112.5)×103]显著高于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(104.8±86.1)×103和(25.2±46.6)×103],差异有统计学意义(P<0.01);P-gp、β-catenin在ESCC中的IOD值[分别为(57.7±75.5)×103和(32.0±47.0)×103]显著低于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(114.8±106.6)×103和(46.1±35.7)×103],差异有统计学意义(P<0.01);随着ESCC的分化程度按高分化-中分化-低分化顺序依次改变,MRP2的IOD值依次递增,β-catenin在低分化ESCC中的IOD值大于其在中、高分化ESCC中的IOD值,Bcl-2在高分化ESCC中的IOD值低于其在中、低分化ESCC中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);β-catenin、Bcl-2在ESCC浸润至黏膜层的病例的癌组织标本中的IOD值大于其在ESCC浸润至肌层或浆膜层的病例的癌组织标本中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移的Bcl-2的IOD值显著高于无淋巴结转移(P<0.01);ESCC中P-gp的表达分别与MRP2、Bcl-2的表达呈明显正相关(r=0.288和r=0.253,P<0.01)。结论:P-gp与MRP2及Bcl-2可作为ESCC多药耐药的预测因子。β-catenin可能在ESCC的发生发展中起着重要作用。

中华眼镜蛇毒诱导HL-60细胞凋亡及其机制探讨

目的 观察中华眼镜蛇毒体外对白血病细胞凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法 本研究采用血清药理学方法 ,以人白血病细胞HL 60细胞为靶细胞 ,通过流式细胞仪分析、DNA片段凝胶电泳、免疫组织化学 (S P法 )观察中华眼镜蛇毒兔血清体外对细胞凋亡的诱导作用及癌基因表达的影响。结果 经DNA电泳、流式细胞仪分析显示 :中华眼镜蛇毒兔血清与HL 60细胞共同培养 48h可诱导其细胞凋亡增加 ,bcl 2、c myc基因蛋白表达下调。结论 中华眼镜蛇毒兔血清体外抑制HL 60细胞增殖可能与其诱导细胞凋亡及使细胞bcl 2、c

粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗大鼠急性心肌梗塞

目的 :探讨G -CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位 ,并分别于 2 4h、48h和 2周后杀死大鼠 ,取出心脏 ,检测心肌的病理变化情况。结果 :用ISO后 2 4h对照组可见散在心肌梗塞灶 ,坏死区周围有多量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻 ,浸润的细胞以单个核细胞为主 ;48h后对照组心肌梗塞灶进一步扩大 ,呈散在片状分布 ,而治疗组心肌梗塞灶扩大不明显 ,呈散在灶性分布 ,并可见成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞 ;2周后 ,治疗组未见明显心肌梗塞后疤痕组织 ,可见新生的心肌细胞生长。结论 :G -CSF对缺血濒死心肌有保护作用 ,用G -CSF动员骨髓来源的干细胞进行“自我移植” ,可用于急性心肌梗塞的治疗。

TGF-β1与乳腺癌中microRNA-21表达的关系

目的:研究乳腺癌中microRNA-21(miR-21)的表达及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)的关系。方法:用不同质量浓度的TGF-β1 0、1.25、2.5、5、10 ng/mL干预MCF-7细胞24 h,以及不同时间(0、6、12、24、48、72 h)TGF-β1干预MCF-7细胞,用茎环实时荧光定量聚合酶链反应法(Real-time PCR)测定miR-21的表达。分别用实时定量PCR和免疫组织化学SP法检测37例乳腺癌中miR-21和TGF-β1的表达情况及其相关性。结果:茎环实时定量PCR法检测miR-21表达的敏感性和特异性良好,MCF-7细胞中miR-21的表达随TGF-β1作用呈时间依赖性和浓度依赖性。乳腺癌组织中miR-21的表达与淋巴结转移及TGF-β1的表达程度有关(P<0.05)。结论:高表达的TGF-β1可引起miR-21表达升高,与乳腺癌的侵袭转移有密切关系。

神经生长抑制因子Nogo-A在缺血性脑梗塞大鼠脑组织中的表达

目的研究神经生长抑制因子Nogo-AmRNA在大鼠缺血性脑梗塞脑内不同时点表达的变化,探讨Nogo-A基因在缺血性脑梗塞时神经再生的作用。方法建立缺血性脑梗塞(MCAO)模型,采用原位杂交法结合免疫组化技术,检测80只在不同时期缺血性脑梗塞大鼠脑内Nogo-A的表达量。结果原位杂交法显示Nogo-AmRNA在脑梗塞后3d下降,7d后上升,2周达到高峰,第3、4周保持第2周水平;免疫组化显示Nogo-A含量在脑梗塞后3d下降,7d后上升,3周达到高峰,第4周保持第3周水平。结论脑内Nogo-A表达在脑梗塞急性期(3d)变化不明显,而在1周后较为明显,表明在脑梗塞后期Nogo-A表达有明显升高,它可能是造成成年哺乳动物损伤后神经再生障碍的重要原因之一。

眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人鼻咽癌CNE-2细胞株的影响

目的 :了解眼镜蛇毒灌胃后的兔血清 (serumofrabbittakingorallycobravenom ,SRCV)对人鼻咽癌CNE - 2细胞的影响。方法 :采用体外细胞培养的方法 ,观察SRCV对人鼻咽癌CNE - 2细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用 ,及对细胞生长和分裂指数的影响。结果 :发现SRCV能够明显抑制鼻咽癌CNE - 2细胞的生长 ,且其抑制效应随剂量的增加而增加 ,但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响。结论 :SRCV对鼻咽癌CNE - 2细胞的生长有明显的抑制作用 。

乳腺癌VEGF、p53表达与肿瘤血管新生和转移的关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、p5 3蛋白的表达与乳腺癌血管新生及浸润、转移的关系。 方法 :应用免疫组织化学S P法检测VEGF、p5 3在 76例乳腺癌组织和 2 0例良性乳腺病变组织中的表达 ,并应用计算机辅助图像分析系统对血管新生的强度进行定量分析 ,评估VEGF、p5 3表达以及微血管计数 (MVC)与浸润和转移的关系。结果 :癌组织VEGF和 p5 3表达阳性分别为 6 1例 (80 3% )和 4 5例 (5 3 9% ) ,表达强度均明显高于良性病变 (P <0 0 0 5 ) ,VEGF的表达强度在原位癌和浸润癌间差异有极显著性意义 (P <0 0 0 1) ,但是与淋巴结转移与否无明显关联 (P =0 39) ,p5 3的表达强度与浸润或转移均无明显关联 (P >0 1)。良性病变组织、导管原位癌及浸润性导管癌的MVC差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;癌组织的MVC平均为12 8 6± 4 3 7,且随着病变进展有明显增加的趋势。VEGF表达强度与MVC显著关联 (P =0 0 0 7) ,而 p5 3表达强度则与MVC无关 (P =0 34)。浸润性导管癌无论淋巴结是否转移 ,其VEGF、p5 3表达及MVC均无明显差异。结论 :VEGF与癌组织的血管新生及浸润生长关系密切 ,联合VEGF表达和MVC检测可提供预示乳腺癌恶性转归和预后更有价值的指标。

利用噬菌体随机肽库对神经胶质瘤母系SWO-38进行全细胞筛选

目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用噬菌体肽库可以简便。

肺癌侵袭力的影像学表现与c-erbB-2及bcl-2基因蛋白表达的关系

目的和方法：利用免疫组化技术ＬＳＡＢ法和计算机图像分析系统的结合，测定经手术病理证实之３７例肺鳞癌及４８例肺腺癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白的表达水平，分析其表达或共表达与反映肺癌侵袭力的影像征象的关系。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白在两种不同类型肺癌组织中的阳性表达及表达定位有明显的差异，并且，ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达阳性的肺癌，肿块毛刺征的出现率明显高于表达阴性者；ｂｃｌ－２基因蛋白表达阳性的肺癌，肿块毛刺征及三级支气管受累的出现率明显高于表达阴性者（Ｐ＜００５）；当两种基因蛋白在肺鳞癌中共表达时，肿块毛刺征及肺门或纵隔淋巴结转移的出现率明显高于它们单独表达者（Ｐ＜００５）。结论：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白与反映肺癌侵袭力的某些影像征象之间可能存在密切的关系。

食管鳞癌动物模型的研究进展

建立和应用真实模拟人类疾病的动物模型,从整体水平动态地揭示肿瘤发生机制,从而寻找防治对策和开发治疗新药,是成功开展转化医学研究的关键.食管癌是最高发的恶性肿瘤之一.由于相关活体动物模型研究和开发的相对滞后,对于食管鳞癌的病因、发病机制和相关分子通路缺乏全面系统深入的认识,直接导致无法有针对性地进行早期分子诊断标志物和有效药物靶点的开发和转化,严重影响早期诊断和治疗预后.合适的动物模型是改变这一现状的关键.本文就食管鳞癌动物模型的种类、构建和应用方面作一综述,并着重介绍了4-硝基喹啉-氧化物(4NQO)化学致癌结合基因工程的小鼠模型.

免疫共沉淀法用于肿瘤异质性研究的可行性分析

目的 探讨免疫共沉淀法在肿瘤异质性蛋白质分子机制研究中的可行性 ,为肿瘤异质性研究建立一种新的方法。方法 用免疫共沉淀法研究来自同一遗传背景的 2株人类胶质瘤细胞亚系 (SWOZ1和SWOZ2 )中鼠双微粒体基因 2 (Mu rinedoubleminute 2 ,MDM2 )相关蛋白表达的异质性。结果 在Mr370 0 0左右处可清楚看到有一蛋白条带SWOZ2明显深染于SWOZ1,提示在MDM2传导通路上此种Mr 在 370 0 0左右的蛋白可能与 2株亚系表现出的不同生物学行为有关。

小柴胡汤联合丹那唑抑制子宫内膜异位症大鼠血管生成的研究

目的 :探讨小柴胡汤、丹那唑及二者联合用药对子宫内膜异位症 (EM)模型大鼠血管生成因子和异位内膜微血管密度的影响。方法 :EM模型大鼠随机分为不用药组 (U)、小柴胡汤 (XCH)、丹那唑组 (D)和联合用药组(S) ,设假手术组 (C)为对照。四周后观察各组异位子宫内膜体积和形态学的变化 ,计数腹腔液巨噬细胞 ,放射免疫法测定各组大鼠外周血、腹腔液及巨噬细胞培养液白细胞介素 - 8(IL - 8)、肿瘤坏死因子 (TNF -α)的含量 ,免疫组化法测定血管内皮生长因子 (VEGF)在异位内膜中的表达 ,并通过CD34标记异位子宫内膜血管 ,测定其微血管密度(MVD)。结果 :XCH组、D组和S组异位内膜呈现不同程度萎缩 ,腺体明显减少 ,腹腔液巨噬细胞计数减少 ,XCH组、D组及S组大鼠外周血、腹腔液及巨噬细胞培养液IL - 8、TNF -α含量降低 ,异位内膜VEGF表达减弱 ,MVD明显减少 ,其中以S组最为明显。结论 :小柴胡汤和丹那唑可以抑制EM模型大鼠异位内膜的血管生成 ,使异位内膜萎缩 ,当二者联合用药时 ,作用更强。