大鼠耳蜗一氧化氮合酶的分布和表达

目的 本实验先用组织化学法 ,通过观察还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )的活性了解一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)在大鼠耳蜗内分布。再用亲合免疫细胞组织化学技术 ,研究大鼠耳蜗内神经元型NOS(neuronalNOS ,nNOS)与内皮型NOS(endothelialNOS ,eNOS)的表达。方法 组化组大鼠耳蜗切片用辅酶Ⅱ孵育液在 37℃条件下孵育 1小时。免疫组化组大鼠耳蜗切片经消除内源性过氧化物酶 ,3%山羊正常血清封闭非正常结合点后 ,用兔抗nNOS抗体、兔抗eNOS抗体 ,室温下孵育 6 0分钟 ,再用生物素标记的山羊抗兔第二抗体孵育、滴加ABC试剂 ,以DAB试剂显色。结果 大鼠耳蜗血管球内皮细胞有明显NADPH -黄递酶活性 ,血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH -黄递酶活性反应。大鼠耳蜗内、外毛细胞、螺旋神经节细胞nNOS、eNOS的表达呈阳性。血管纹细胞处有阳性nNOS、eNOS的表达。耳蜗血管球的内皮细胞无nNOS的表达 ,但eNOS的表达呈强阳性。