中期因子诱导上皮间质转化促进结直肠癌细胞增殖和侵袭的分子机制

目的:探讨中期因子(midkine,MK)诱导肠癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)促进结直肠癌增殖和侵袭的分子机制。方法:MTT法检测MK对肠癌细胞增殖及侵袭的影响,倒置显微镜下观察其形态学变化,Western blot检测其EMT标志物、NF-κB(p65)、Zbe1和MMP-9蛋白表达变化。结果:在10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml和200ng/ml的MK作用下,SW480细胞的增殖率分别为:(106.33±4.57)%、(119.83±6.01)%、(148.52±8.3 1)%和(1 6 2.5 1±8.9 8)%,(F=70.954,P<0.01);HCT116细胞的增殖率分别为:(116.49±9.77)%、(129.79±2.31)%、(155.38±8.98)%和(158.11±6.75)%,(F=55.027,P<0.01)。100ng/ml MK作用下,SW480细胞的侵袭数为每视野(40.34±2.52)个,而NF-κB信号通路抑制剂5μmol/L Bay11-7082预处理后的侵袭数为每视野(14.13±2.06)个,(F=41.391,P<0.01);HCT116细胞的侵袭数为每个视野(42.21±3.25)个,而Bay1 1-7 0 8 2预处理后的细胞侵袭数为每视野(14.32±2.52)个,(F=69.206,P<0.01)。MK诱导SW480和HCT116呈现梭形或长条形改变,E-cad蛋白表达下调,Vimentin、β-catenin、NF-κB(p65)和MMP-9蛋白表达上调,而Zbe1蛋白表达无明显变化。结论:MK通过上调NF-κB(p65)信号蛋白诱导肠癌细胞上皮间质转化,促进下游靶蛋白MMP-9表达上调,从而促进肠癌细胞增殖和侵袭。