NLR、CRP、PLR、PCT在儿童支气管肺炎中的临床价值

目的 中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、降钙素原(PCT)在儿童支气管肺炎中的临床价值分析。方法 选取我院2020年11月至2021年7月收治的支气管肺炎患儿105例为观察组,依据病情严重程度分为轻型组(n=60)、重型组(n=45),另选取同期入院体检的健康儿童58例作为对照组,比较各组NLR、CRP、PLR、PCT水平,分析诊断价值。结果 与对照组比较,观察组NLR、CRP、PLR、PCT水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC曲线分析诊断支气管肺炎的价值,NLR诊断灵敏度为91.20%、特异性为100.00%,CRP诊断灵敏度为89.20%、特异性为82.80%,PLR诊断灵敏度为77.50%、特异性为86.20%,PCT诊断灵敏度为97.00%、特异性为100.00%,各指标联合诊断灵敏度为98.00%、特异性为100.00%,与各指标单独诊断相比,各指标联合诊断的灵敏度更高。与轻型组相比,重型组患儿NLR、CRP、PLR、PCT水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC曲线分析诊断支气管肺炎病情严重程度的价值,NLR诊断灵敏度为85.70%、特异性为86.70%,CRP诊断灵敏度为90.50%、特异性为75.00%,PLR诊断灵敏度为59.50%、特异性为80.00%,PCT诊断灵敏度为95.20%、特异度为93.30%,各指标联合诊断灵敏度为100.00%、特异性为100.00%,与单独诊断相比,联合诊断的灵敏度、特异性更高。结论 支气管肺炎患儿存在NLR、CRP、PLR、PCT水平升高情况,且与病情严重程度有关,各指标联合诊断此病的价值更高。

CircRNA-100395基因通过启动子区甲基化调控miRNA-136-5p/Smad3轴促进前列腺癌细胞增殖及侵袭的机制研究

目的 检测前列腺癌细胞中环状核糖核酸(circular RNAs,CircRNA)100395基因启动子区甲基化状态及其表达水平,研究CircRNA-100395基因去甲基化对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响及作用机制。方法 选择人正常前列腺上皮细胞(RWPE)和前列腺癌细胞系(LNCap,PC3和DU145)进行研究。采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测CircRNA-100395基因启动子区甲基化状态。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测上述细胞中CircRNA-100395 mRNA表达水平。应用去甲基药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(AZA)处理LNCap细胞,检测AZA去甲基化处理前后细胞中CircRNA-100395表达水平。采用CCK-8和Transwell实验检测CircRNA-100395基因去甲基化前后LNCap细胞增殖和侵袭能力。构建CircRNA-100395野生型和突变型质粒,通过双荧光素酶报告分析CircRNA-10039与miRNA-136-5p之间的靶向关系;利用qRT-PCR检测CircRNA-10039与miRNA-136-5p表达水平,验证其调控关系。采用Westernblot法检测AZA去甲基化和miRNA-136-5p过表达对Smad3,p-Smad3蛋白表达的影响。结果 前列腺癌细胞中CircRNA-100395呈高甲基化状态;LNCap,PC3及DU145细胞中CircRNA-100395相对表达水平分别为0.39±0.08,0.65±0.14,0.62±0.10,显著低于RWPE(1.12±0.15)细胞中表达水平,差异有统计学意义(F=42.076,P<0.001)。经AZA去甲基化处理后,LNCap细胞中CircRNA-100395表达水平为1.02±0.17,较未处理LNCap细胞(0.42±0.05)明显升高,差异有统计学意义(t=5.808,P<0.01)。AZA去甲基化处理显著抑制了LNCap细胞的增殖能力(t=8.764~12.970,均P<0.001)、迁移能力(t=6.092,P<0.01)。miRNA-136-5可能是CircRNA-100395的下游靶基因。未经AZA处理前LNCap细胞中CircRNA-100395,miRNA-136-5p表达水平分别为0.39±0.08,0.87±0.15,AZA处理后两者表达水平分别为1.02±0.17,0.35±0.08,差异有统计学意义(t=5.808,5.298,均P<0.01)。AZA处理后Smad3和p-Smad3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(t=7.394,11.889,均P<0.01);miRNA-136-5p过表达抑制了Smad3和p-Smad3蛋白表达,差异有统计学意义(t=4.996,5.422,均P<0.01)。结论 CircRNA-100395基因启动子区的高甲基化状态可以抑制CircRNA-100395在前列腺癌细胞中的表达水平,去甲基化处理后CircRNA-100395表达恢复,并抑制前列腺癌细胞增殖和侵袭,其作用机制可能与CircRNA-100395靶向调控miRNA-136-5p/Smad3轴有关。