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可替宁单克隆抗体的制备及其在免疫学检测中的应用
被引量:
1
1
作者
雷雅静
周丽芳
+1 位作者
王安行
陈枢青
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期765-771,共7页
目的:研制可替宁单克隆抗体(单抗),并建立检测人体尿液样本中可替宁的免疫检测方法。方法:利用人工合成的可替宁-牛血清白蛋白(COT-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选一种对可替宁具有高特异性和敏感性的单抗,并将该单抗用于建...
目的:研制可替宁单克隆抗体(单抗),并建立检测人体尿液样本中可替宁的免疫检测方法。方法:利用人工合成的可替宁-牛血清白蛋白(COT-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选一种对可替宁具有高特异性和敏感性的单抗,并将该单抗用于建立间接竞争ELISA(ic-ELISA)和胶体金免疫层析试纸,检测人体尿液中可替宁的含量。结果:所研制的可替宁单抗经ic-ELISA鉴定,半数有效抑制浓度为21 ng/mL,经胶体金免疫层析试纸鉴定,截断值为100 ng/mL。所建立的ic-ELISA方法检测限为0.1 ng/mL,回收率为99.41%~117.98%,批间和批内变异系数分别小于等于15.31%和15.07%。所建立的胶体金免疫层析试纸稳定性和重复性检测准确率均为100%。结论:以制备的可替宁单抗为基础开发的ic-ELISA和胶体金免疫层析试纸可快速、可靠地检测人体尿液中可替宁含量,可作为环境烟草烟雾在人体内暴露程度的有效检测方法。
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关键词
可替宁
单克隆抗体
间接竞争酶联免疫吸附测定
胶体金免疫层析试纸
尿液
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职称材料
多重PCR-LDR法检测人体药物代谢酶基因位点多态性
被引量:
2
2
作者
雷雅静
周丽芳
+1 位作者
朱银焕
王安行
《中国现代应用药学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期439-444,共6页
目的构建一套基于多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应(polymerasechainreaction-ligasedetectionreaction,PCR-LDR)体系的分型法,用于同时检测多种人体主要药物代谢酶基因位点的突变。方法选择药物代谢酶相关单核苷酸多态性(single nucl...
目的构建一套基于多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应(polymerasechainreaction-ligasedetectionreaction,PCR-LDR)体系的分型法,用于同时检测多种人体主要药物代谢酶基因位点的突变。方法选择药物代谢酶相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,设计合成各SNP位点的PCR引物和LDR探针,以人口腔黏膜细胞中提取的DNA为模板,获得PCR-LDR反应连接产物,采用ABI 3130XL进行检测分析。结果采用本研究建立的PCR-LDR分型方法,对不同个体的14个SNP位点进行分型,分型结果与测序结果完全一致。结论本研究建立的PCR-LDR分型方法能够同时对14个SNP位点进行一次性分型,结果准确、可靠,是一种简便有效且低成本的SNP分型方法。
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关键词
药物代谢酶
单核苷酸多态性
PCR-LDR
原文传递
题名
可替宁单克隆抗体的制备及其在免疫学检测中的应用
被引量:
1
1
作者
雷雅静
周丽芳
王安行
陈枢青
机构
杭州仟源恩氏基因技术有限公司
浙江大学药学院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期765-771,共7页
文摘
目的:研制可替宁单克隆抗体(单抗),并建立检测人体尿液样本中可替宁的免疫检测方法。方法:利用人工合成的可替宁-牛血清白蛋白(COT-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选一种对可替宁具有高特异性和敏感性的单抗,并将该单抗用于建立间接竞争ELISA(ic-ELISA)和胶体金免疫层析试纸,检测人体尿液中可替宁的含量。结果:所研制的可替宁单抗经ic-ELISA鉴定,半数有效抑制浓度为21 ng/mL,经胶体金免疫层析试纸鉴定,截断值为100 ng/mL。所建立的ic-ELISA方法检测限为0.1 ng/mL,回收率为99.41%~117.98%,批间和批内变异系数分别小于等于15.31%和15.07%。所建立的胶体金免疫层析试纸稳定性和重复性检测准确率均为100%。结论:以制备的可替宁单抗为基础开发的ic-ELISA和胶体金免疫层析试纸可快速、可靠地检测人体尿液中可替宁含量,可作为环境烟草烟雾在人体内暴露程度的有效检测方法。
关键词
可替宁
单克隆抗体
间接竞争酶联免疫吸附测定
胶体金免疫层析试纸
尿液
Keywords
Cotinine
Monoclonal antibody
Indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay
Immunochromatographic strip
Urine
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
多重PCR-LDR法检测人体药物代谢酶基因位点多态性
被引量:
2
2
作者
雷雅静
周丽芳
朱银焕
王安行
机构
杭州仟源恩氏基因技术有限公司
出处
《中国现代应用药学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期439-444,共6页
文摘
目的构建一套基于多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应(polymerasechainreaction-ligasedetectionreaction,PCR-LDR)体系的分型法,用于同时检测多种人体主要药物代谢酶基因位点的突变。方法选择药物代谢酶相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,设计合成各SNP位点的PCR引物和LDR探针,以人口腔黏膜细胞中提取的DNA为模板,获得PCR-LDR反应连接产物,采用ABI 3130XL进行检测分析。结果采用本研究建立的PCR-LDR分型方法,对不同个体的14个SNP位点进行分型,分型结果与测序结果完全一致。结论本研究建立的PCR-LDR分型方法能够同时对14个SNP位点进行一次性分型,结果准确、可靠,是一种简便有效且低成本的SNP分型方法。
关键词
药物代谢酶
单核苷酸多态性
PCR-LDR
Keywords
drug metabolism enzyme
single nucleotide polymorphism
PCR-LDR
分类号
R969.1 [医药卫生—药理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
可替宁单克隆抗体的制备及其在免疫学检测中的应用
雷雅静
周丽芳
王安行
陈枢青
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
下载PDF
职称材料
2
多重PCR-LDR法检测人体药物代谢酶基因位点多态性
雷雅静
周丽芳
朱银焕
王安行
《中国现代应用药学》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
原文传递
已选择
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条
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参考文献
引证文献
统计分析
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