阿尔茨海默症体外模型研究进展

阿尔茨海默症(AD)是一种严重影响患者生活质量的神经退行性疾病。迄今为止,AD的具体发病机制仍尚未阐明,仅有的5个批准上市的抗AD药物也存在副作用明显、疗效有限等问题。理想的疾病模型是探究病因与开发新药的重要工具。本文以传统"诱导型"AD体外模型为中心,对模型诱导剂、基本原理、主要特征和应用实例等方面进行阐述,同时总结近年来新型AD体外模型研究进展,以期为研究人员提供参考和指导。

miR-28-5p靶向Nrf2调控LPS诱导的急性肺损伤机制研究

目的探究miR-28-5p在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)进程中的作用和分子机制。方法将40只C57BL/6雄鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI-3h组、ALI-6h组和ALI-12h组,每组10只。利用LPS诱导小鼠ALI 3h、6h、12h,取肺组织进行荧光定量PCR(RT-PCR)检测miR-28-5p表达;同时体外利用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7发生炎症反应,RT-PCR检测细胞miR-28-5p表达;巨噬细胞过表达miR-28-5p mimic后利用LPS刺激,RT-PCR检测巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)表达情况;RT-PCR和Western blot检测抗氧化关键分子核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)表达水平;Targetscan 7.0预测miR-28-5p靶向基因,突变结合位点后,并通过荧光素酶报告基因系统检测miR-28-5p对靶基因的转录调控作用。结果与生理盐水组比较,LPS诱导小鼠ALI 3h、6h、12h TNF-α、IL-1β水平明显升高[TNF-α:(6.24±1.84)、(4.31±0.97)、(2.97±0.49)比(1.00±0.21),P<0.05;IL-1β:(6.29±1.06)、(4.95±0.93)、(3.59±1.05)比(1.00±0.53),P<0.05],肺组织miR-28-5p水平明显升高[(7.24±1.35)、(5.26±1.64)、(3.24±0.97)比(1.00±0.34),P<0.05];与生理盐水组比较,LPS刺激巨噬细胞炎症反应3h、6h、12h细胞miR-28-5p水平明显升高[(5.21±0.15)、(3.51±0.78)、(2.45±0.41)比(1.00±0.35),P<0.05];与mimic-NC组比较,巨噬细胞过表达miR-28-5p mimic组细胞炎症因子TNF-α和IL-1β表达水平明显升高[TNF-α:(4.86±0.59)比(1.00±0.52);IL-1β:(3.54±0.41)比(1.00±0.24),P<0.05];同时与mimic-NC组比较,miR-28-5p mimic过表达组抗氧化关键分子Nrf2及其下游HO-1、NQO1表达明显升高[Nrf2:(5.16±1.03)比(1.00±0.14);HO-1:(4.91±1.08)比(1.00±0.12);NQO1:(5.61±0.80)比(1.00±0.08),P<0.05];Targetscan 7.0预测发现miR-28-5p靶向Nrf2基因3'UTR序列,荧光素酶报告基因实验进一步明确miR-28-5p通过靶向Nrf2基因3'UTR序列调控其转录。结论miR-28-5p在LPS诱导的ALI中表达上调,并进一步加剧ALI病理进程,其作用机制可能是通过靶向巨噬细胞Nrf2,从而减弱胞内抗氧化能力,促进炎症因子分泌和巨噬细胞的活化。

聚多巴胺修饰的载榄香烯介孔二氧化硅纳米粒的制备及其靶向抗肿瘤活性研究

目的制备聚多巴胺(PDA)修饰的载榄香烯(ELE)介孔二氧化硅纳米粒(D/MSN-ELE),并对其进行处方工艺优化、质量评价、体外释放、体外抗肿瘤活性及促进细胞凋亡能力研究。方法通过溶液吸附法制备载榄香烯介孔二氧化硅纳米粒(MSN-ELE),聚合法制备聚多巴胺修饰的介孔二氧化硅纳米粒(D/MSN)和D/MSN-ELE,应用透射电子显微镜表征不同纳米粒的形态,热重分析计算PDA接枝率,HPLC法评价D/MSN-ELE载药量和包封率,透析袋法考察D/MSN-ELE的体外释放特性。采用MTT染色法,分析不同纳米粒对人胚胎成纤维HELF细胞和人非小细胞肺癌A549细胞的细胞毒性。采用流式细胞仪检测D/MSN-ELE活性氧水平和线粒体膜电位水平。结果最优制备工艺为药物与载体比例6∶1,温度为50℃,时间为8 h,此工艺条件下制备的D/MSN-ELE分布均一,粒径为(288.70±3.88)nm。其平均载药量和包封率分别为(11.58±0.73)%和(59.82±0.57)%。体外释药具有pH值响应性,累积释药量随pH值减小而增大。ELE、MSN-ELE和D/MSN-ELE对A549细胞的半数抑制浓度分别为91.29、27.56、6.02μg/m L。活性氧及线粒体膜电位检测结果进一步表明D/MSN-ELE能促进肿瘤细胞凋亡。结论优选工艺下的D/MSN-ELE具有较高的药物载药量、pH值响应性药物释放和大幅增强的抗肿瘤活性及促进细胞凋亡能力,为基于MSN的ELE药物靶向递送提供了进一步的实验基础。

代谢组学技术在痛风类疾病研究中的应用进展

目的对近年来代谢组学技术在痛风领域的相关研究进行综述,以期为痛风今后更深入的研究提供思路和方向。方法通过PubMed检索相关文献,分析和总结代谢组学技术在嘌呤代谢、高尿酸血症和痛风相关疾病研究中的应用。结果代谢组学技术被广泛应用于痛风类疾病的生物标志物发现、发病机制探索以及药物作用机制研究,同时代谢组学技术与其他组学技术结合成为新的研究趋势。结论代谢组学技术已经成为痛风等人类代谢疾病研究的重要工具,未来将进一步推动痛风类疾病的相关研究。