骨化三醇对桥本甲状腺炎患者TPOAb、TgAb、Th17/Treg相关细胞因子的影响

目的分析骨化三醇对桥本甲状腺炎(HT)患者血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、辅助性T细胞/调节性T细胞(Th17/Treg)相关细胞因子IL-10、IL-17水平的影响,从而探讨骨化三醇治疗桥本甲状腺炎可能的机制。方法将70例桥本甲状腺炎患者随机分为治疗组(36例)和对照组(34例)。治疗组患者均口服骨化三醇胶丸0.25μg/次,1次/d,持续12周,对照组患者无特殊治疗。观察治疗前后两组患者甲状腺激素(TSH、FT3、FT4)、TPOAb、TgAb、IL-10、IL-17、血钙等指标变化。结果治疗12周后治疗组25(OH)D、TPOAb、TgAb、IL-10、IL-17水平与治疗前、对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。两组在治疗前后血钙水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05),无高钙血症发生。治疗组TPOAb水平与IL-10水平呈负相关(r=-0.463,P<0.01),与IL-17水平呈正相关(r=0.385,P<0.05);而TgAb水平与IL-10水平呈负相关(r=-0.591,P<0.01)。结论骨化三醇可以降低HT患者TPOAb、Tg Ab水平,其可能通过影响Th17/Treg相关细胞因子IL-10、IL-17水平从而发挥疗效。

雷公藤内酯醇干预高糖影响小鼠肾脏足细胞Nephrin蛋白表达的研究

目的:通过观察雷公藤内酯醇(triptolide,TP)及对照药物缬沙坦(valsartan,Val)干预高糖环境培养的足细胞肾小球足细胞裂孔隔膜(GPSD)核心蛋白nephrin的表达,来深入探讨雷公藤治疗糖尿病肾病(DN)蛋白尿的分子生物学机制。方法:(1)将培养成熟的足细胞分为对照组1、对照组2、模型组、雷公藤内酯醇干预组及缬沙坦干预组(干预组均设低、中、高3个剂量),培养24h后以RT-PCR法检测各组足细胞nephrin mRNA的表达。(2)将培养成熟的足细胞设为对照组、模型组、雷公藤内酯醇干预组及缬沙坦干预组,培养24h后行间接免疫荧光法检测nephrin蛋白的表达。结果:(1)与模型组相比,不同剂量TP和Val组均能提高nephrin mRNA表达(P<0.05),并且中剂量TP组和高剂量Val组效果最好(P<0.05)。(2)与对照组相比,间接免疫荧光法可见模型组nephrin表达下降。经TP和Val干预24h后,TP和Val组足细胞nephrin蛋白的表达均有一定程度提高。结论:雷公藤内酯醇和缬沙坦均能上调高糖诱导的足细胞nephrin的表达下降,这可能是雷公藤及缬沙坦在临床上有效治疗DN蛋白尿的机制之一。

雷公藤内酯醇对小鼠肾小球足细胞裂孔隔膜核心蛋白表达干预作用的研究

目的观察雷公藤内酯醇(TP)干预高糖环境培养的小鼠肾小球足细胞裂孔隔膜nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨雷公藤治疗糖尿病肾病(DN)蛋白尿的分子生物学机制。方法培养成熟的小鼠足细胞随机分为对照组1、对照组2、高糖组和TP干预组,TP干预组进一步分为低剂量、中剂量和高剂量组。用不同浓度的TP(8、16和32ng/ml)干预高糖(25mmol/L的Glu)培养24h后的小鼠足细胞,用RT-PCR法检测干预前后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达;用间接免疫荧光法检测16ng/ml TP干预后nephrin和podocin蛋白的表达。结果(1)与对照组相比,高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达均明显减弱(均P<0.01)。(2)TP显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达(均P<0.05)。(3)16ng/ml TP能明显上调高糖对足细胞nephrin和podocin(均P<0.05)蛋白表达的抑制。结论 TP显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是其降低DN蛋白尿的机制之一。

雷公藤内酯醇干预高糖诱导足细胞转分化作用机制的研究

目的观察不同浓度雷公藤内酯醇(TP)体外干预高糖环境下小鼠足细胞上皮细胞向间充质细胞转分化(EMT)及TGF-β/Smad信号通路的调节作用,探讨其保护足细胞损伤的可能机制。方法将培养成熟的小鼠足细胞随机分为25mmol/L葡萄糖培养液干预组(高糖组),5mmol/L葡萄糖培养液干预组(对照组)和在25mmol/L葡萄糖培养液中分别加入浓度为8、16、32ng/ml的TP干预组(低、中、高TP组)。体外培养48h后,倒置显微镜下观察足细胞形态变化,采用RT-PCR和Western-blot技术分别检测各组足细胞NEPH1、desmin、TGF-β_1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化。结果高糖组和高、中、低TP组的小鼠足细胞NEPH1和Smad7 mRNA和蛋白的表达水平均较对照组低,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。高、中、低TP组足细胞NEPH_1和Smad7的mRNA和蛋白的表达水平均高于高糖组,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均低于高糖组,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);中TP组NEPH1和Smad7的mRNA和蛋白的表达水平均高于低TP组和高TP组,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均低于低TP组和高TP组(均P<0.01)。结论TP可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路缓解高糖诱导的足细胞转分化。

奥利司他降低超重肥胖患者体质量的临床效果及安全性评价

目的评价奥利司他降低超重肥胖患者体质量的临床效果及安全性。方法选取我院2016年10月~2019年1月收治的原发性肥胖患者94例,采用随机数字表法分为两组。两组患者均给予控制饮食、有氧运动等综合治疗,对照组给予安慰剂治疗,观察组给予奥利司他治疗,均连续治疗12周。分析两组患者治疗后的疗效、安全性及体重、体质量指数(BMI)、体脂百分比、白细胞介素-1β(IL-1β)、脂联素(APN)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、瘦素(Leptin)的水平变化。结果观察组总有效率(93.62%)高于对照组(78.72%),总不良反应率(10.64%)与对照组(2.13%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗前体重、BMI、体脂百分比组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后体重(68.56±4.01)kg、BMI(25.75±1.43)kg/m2、体脂百分比(30.10±2.42)%低于对照组(P<0.05)。两组治疗前IL-1β、APN、mTOR、Leptin水平组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后APN水平高于对照组,IL-1β、mTOR、Leptin水平低于对照组(P<0.05)。结论奥利司他可降低超重肥胖患者体质量、BMI、体脂百分比,调节血清APN、IL-1β、mTOR、Leptin的表达水平,且安全性好。

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞转分化的影响

目的通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的变化,探讨高糖损伤足细胞的机制。方法将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0软件完全随机分为高糖1、2、3组(葡萄糖浓度分别为15、25和30mmol/L)和对照组(葡萄糖浓度5mmol/L),倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT—PCR和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化。结果与对照组相比,高糖环境下培养48h后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1和Smad7的mRNA表达较对照组显著减少(P<0.05或0.01),desmin和TGF-β1的mRNA表达较对照组增加(P<0.05或0.01)。其中高糖2组的NEPH1和Smad7的蛋白表达较对照组显著减少(均P<0.01),而desmin和TGF—β1的蛋白表达较对照组显著增加(P<0.01)。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA和desmin mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.993,P<0.01);NEPH1 mRNA和TGF—β1 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.989,P<0.01);TGF-β1 mRNA的表达和Smad7 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.996,P<0.01)。结论高糖可能通过激活TGF—β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。

小鼠肾脏足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的变化

目的通过观察高糖环境培养的肾小球足细胞裂孔隔膜（GPSD）核心蛋白nephrin、podocin和CD2AP的表达，探讨糖尿病肾病蛋白尿的发生机制。方法以RT—PCR方法检测不同浓度（5、10、20和40mmol／L）葡萄糖培养液培养小鼠足细胞24h后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平。结果足细胞nephrin mRNA的表达在5mmol／L葡萄糖培养液培养24h后即显著减弱（P〈0.05），在其它浓度葡萄糖培养液培养24h后几乎无表达（均P〈0.01）；podocin和CD2AP mRNA的表达在10mmol／L葡萄糖培养液培养24h后显著下降（P〈0．01）。但随着培养液的葡萄糖浓度增加，podocin和CD2AP mRNA的表达却逐渐上调。结论口糖环境抑制足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达，可能是糖尿病肾病蛋白尿发生、发展机制之一。

雷公藤内酯醇对足细胞EMT相关蛋白mRNA表达的影响

目的通过观察雷公藤内酯醇(TP)对高糖刺激下ILK、MMP9、NEPH1蛋白表达的影响,探讨TP抑制足细胞上皮-间充质转分化(EMT)治疗糖尿病肾病的可能机制。方法将培养分化成熟的足细胞分为对照组(D-葡萄糖5 mmol/L)、高糖组(D-葡萄糖25 mmol/L)、低TP组(25 mmol/L D-葡萄糖+8 ng/m L TP)、中TP组(25 mmol/L D-葡萄糖+16 ng/m L TP)以及高TP组(25 mmol/L D-葡萄糖+32 ng/m L TP)。体外培养48 h后,倒置显微镜观察细胞形态,并采用PCR半定量分析技术检测ILK、MMP9、NEPH1的表达。结果高糖刺激下足细胞NEPH1的表达较对照组显著减少(P<0.01),而ILK、MMP9的m RNA表达较对照组显著升高(P<0.01)。各剂量TP组足细胞NEPH1 m RNA的表达均较高糖组明显上调(P<0.01),ILK、MMP9 m RNA的表达较高糖组明显下降(P<0.01),其中以中TP组的干预作用最显著(P<0.01)。结论 TP可能通过抑制ILK信号通路来抑制足细胞EMT。

缬沙坦抑制高糖环境下足细胞损伤的机制探究

目的通过观察缬沙坦对高糖环境下足细胞EMT过程中ILK、MMP9、NEPH1 mRNA表达的影响,探讨缬沙坦保护受高糖损伤足细胞的可能机制。方法将培养分化成熟的足细胞随机分为5 mmol/L葡萄糖培养组(对照组)和25 mmol/L葡萄糖培养组(高糖组),在25 mmol/L葡萄糖培养液中分别加入2×10^(-7)mol/L(低Val组)、2×10^(-6)mol/L(中Val组)和2×10^(-5) mol/L(高Val组)缬沙坦。体外培养48 h后,倒置显微镜观察细胞形态,并采用PCR半定量分析技术检测ILK、MMP9、NEPH1的表达。结果高糖组细胞NEPH1的表达较对照组显著减少(P<0.01)。而各剂量缬沙坦干预组NEPH1的表达与高糖组相比均显著升高。与对照组比较,高糖组足细胞ILK和MMP9的表达显著升高,而各剂量缬沙坦干预组足细胞ILK和MMP9的表达对比高糖组均明显减少(P<0.01),其中以高Val组的干预作用最显著(P<0.01),高Val组ILK和MMP9的表达与对照组无明显差异(P>0.05)。结论缬沙坦可能通过抑制ILK通路保护高糖环境下受损的足细胞。

糖尿病大鼠肾皮质节活化正常T细胞表达与分泌因子和desmin表达及其干预的研究

目的研究糖尿病大鼠肾皮质RANTES和desmin表达及雷公藤内酯醇对其干预作用。方法 SD大鼠随机分为正常组(NG)、模型组(DM)和小、大剂量雷公藤内酯醇组(T1,T2:0.2,0.4 mg·kg-1),灌胃。实验第4,8,12周,检测各组5只大鼠的血糖、肾重、24 h尿白蛋白;同时观察肾皮质中RANTES和demin mRNA的表达。结果 DM组,肾皮质RANTES和demin的表达在第4,8,12周较NG组显著升高(P<0.05),且从第4周末起,逐渐增高到12周末(P<0.05);T1、T2组较DM组表达量显著降低(P<0.01);且T2组较T1组各周的表达更低(P<0.05);从第4周末起,T1组的RANTES mRNA表达逐渐下降至12周末(P<0.05);与第4周末相比,T2组的RANTES mRNA表达在第12周末显著下降(P<0.01);T1组和T2组的desmin mRNA表达在第12周末均较第4周末均显著下降(P<0.05)。DM组RANTES mRNA的表达与desmin mRNA的表达和24 h尿蛋白显著正相关。结论雷公藤内酯醇可能通过抑制糖尿病大鼠肾皮质RANTES的过度表达,缓解足细胞损伤,减轻蛋白尿。

利拉鲁肽联合替米沙坦治疗糖尿病肾病患者的临床研究

目的观察利拉鲁肽联合替米沙坦对糖尿病肾病患者转化生长因子-β1(TGF-β1)和尿蛋白与肌酸酐比值(UACR)的影响。方法将我院内分泌科收治的56例糖尿病肾病患者随机分为试验组和对照组,每组28例。2组均给予替米沙坦口服治疗,初始剂量为每次40 mg,每天1次,若血压控制不理想,可逐渐加大至最大剂量每次80 mg,每天1次,持续2个月。对照组在此基础上给予百令胶囊,每次2 g,每天1次,口服,持续2个月。试验组在此基础上给予利拉鲁肽,起始剂量为每天0.6 mg,每天1次,1周后增加至每天1.2 mg,每天1次,可逐渐增加至最大每天1.8 mg,腹部注射,持续2个月。比较2组患者的炎症因子、血糖(Glu)、肾功能、UACR的水平和药物不良反应发生率。结果治疗后,试验组患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、TGF-β1、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FBG)和餐后2 h血糖(2 h PBG)、UACR、尿酸(UA)和尿素氮(BUN)水平分别为(18.73±3.13)pg·mL^-1,(99.24±15.14)pg·mL^-1,(103.12±30.37)μg·mL^-1,(5.64±0.89)%,(6.23±1.23)mmol·L^-1,(8.41±1.32)mmol·L^-1,(142.12±49.25)mg·g^-1,(239.73±37.13)μmol·L^-1,(4.26±0.54)mmol·L-1,对照组分别为(23.36±4.81)pg·mL^-1,(125.45±24.69)pg·mL^-1,(128.76±35.17)μg·mL-1,(6.87±1.31)%,(8.47±1.34)mmol·L^-1,(10.18±1.53)mmol·L^-1,(172.43±45.46)mg·g^-1,(296.36±41.38)μmol·L^-1,(5.45±0.69)mmol·L^-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组肾小球滤过率(GFR)分别为(62.12±10.37),(51.76±11.17)mL·min^-1(P<0.05)。试验组和对照组药物不良反应发生率分别为10.71%(3例/28例),17.86%(5例/28例),差异无统计学意义(P>0.05)。结论利拉鲁肽联合替米沙坦可以有效降低糖尿病肾病患者TGF-β1和UACR的水平,改善患者的肾功能,减缓了糖尿病肾病的进程。

糖尿病周围神经病变患者的胆红素变化对硫辛酸疗效的预测作用

目的探讨糖尿病周围神经病变(DPN)患者血清胆红素水平及其变化对硫辛酸疗效的预测价值,为DPN的抗氧化应激治疗提供指导。方法选择2016年8月至2017年6月在杭州市中医院内分泌科住院的232例2型糖尿病患者为研究对象,收集研究对象的基线资料、治疗前后的生化指标等,根据是否合并DPN分为DPN组和对照组,各116例。所有患者均严格控制血糖,进行调脂治疗,其中DPN组在对照组治疗基础上给予硫辛酸注射液600 mg/d,静滴14 d,比较对照组和DPN组治疗前、后的生化指标,以及DPN组治疗前、后的神经传导速度检测数据和周围神经病变的总症状评分(TSS)。根据治疗前后DPN组血清总胆红素(TBIL)变化值又分为TBIL增高组(50例)和TBIL降低组(66例),比较两组临床资料和生化指标。采用SPSS 20.0软件进行t检验、χ~2检验、协方差分析、非参数检验、Pearson相关分析、logistic回归分析和多元线性逐步回归分析。结果 DPN组基线血清TBIL、直接胆红素(DBIL)显著低于对照组基线水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。经过硫辛酸治疗后,DPN组患者运动和感觉神经传导速度显著改善,差异均有统计学意义(P<0.01)。TBIL增高组的TSS改善率(78.00%)高于TBIL降低组(56.06%),而TBIL增高组基线TBIL、间接胆红素(IBIL)、DBIL及游离脂肪酸(FFA)水平显著低于TBIL降低组基线水平,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。logistic回归分析显示,TBIL变化值是影响硫辛酸疗效的独立危险因素,有统计学意义(OR=6.072,95%CI:1.104~33.408,P<0.05)。Pearson分析结果显示,TBIL变化值与基线FFA水平呈正相关(r=0.249,P<0.01)。多元线性逐步回归分析结果显示,基线FFA水平是TBIL变化值的影响因素。结论 DPN患者血清胆红素水平低下。TBIL水平变化可以反映DPN患者抗氧化应激疗效,可能是硫辛酸疗效评估的一项预测指标。

雷公藤多苷联合糖皮质激素治疗免疫球蛋白A肾病的临床研究

目的评价雷公藤多苷联合糖皮质激素治疗免疫球蛋白A(Ig A)肾病的临床疗效和安全性。方法 120例Ig A肾病患者随机分为试验组58例和对照组62例,对照组口服醋酸泼尼松片0.5 mg·kg-1,qd和氯沙坦钾50 mg·d-1,qd,试验组在对照组的基础上口服雷公藤多苷片1 mg·kg-1,tid,2组患者疗程均为3个月。观察2组的临床疗效、肾功能指标及不良反应发生率。结果试验组和对照组总有效率分别为89.7%和74.2%,试验组显著高于对照组(P<0.05);试验组治疗后尿素氮、尿酸和血肌酸酐均显著低于对照组(P<0.05),且较治疗前显著降低(P<0.05)。2组不良反发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论雷公藤多苷联合糖皮质激素治疗Ig A肾病较单用糖皮质激素疗效更为明显,且不增加不良反应发生率。

缬沙坦对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护机制研究

目的观察不同浓度缬沙坦体外干预高糖环境下小鼠足细胞间充质细胞转分化及转化生长因子-β1(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法复苏和传代小鼠足细胞,用Rand A 1.0软件完全随机分组法将培养成熟的小鼠足细胞随机分为5 mmol·L^(-1)葡萄糖培养液干预组(A组)和25 mmol·L^(-1)葡萄糖培养液干预组(B组),在25 mmol·L^(-1)葡萄糖培养液中分别加入2×10^(-7)mol·L^(-1)(C组),2×10^(-6)mol·L^(-1)(D组)和2×10^(-5)mol·L^(-1)(E组)缬沙坦。体外培养48 h后,倒置显微镜下观察足细胞形态变化,用实时定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)和western-blot技术分别检测各组足细胞肾小球足细胞相关蛋白1(NEPH1)、desmin、TGF-β1和Smad7的mRNA和蛋白表达的变化。结果与A组相比,B组足细胞形态和数量显著变化;C、D、E组足细胞形态和数量均不同程度的接近A组,以E组恢复程度最为明显。A组足细胞NEPH1mRNA为0.75±0.08,NEPH1蛋白为2.30±0.14;Smad7 mRNA为1.97±0.14,Smad7蛋白为1.88±0.16;desmin mRNA为0.54±0.08,desmin蛋白为1.52±0.11;TGF-β1mRNA为0.35±0.08,TGF-β1蛋白为0.22±0.10。B组足细胞NEPH1 mRNA为0.58±0.14,NEPH1蛋白为1.91±0.12;Smad7 mRNA为0.34±0.11,Smad7蛋白为0.34±0.12;desmin mRNA为0.670±0.059,desmin蛋白为2.02±0.17;TGF-β1mRNA为1.69±0.10,TGF-β1蛋白为1.60±0.13,与A组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。C组NEPH1 mRNA为0.60±0.15,NEPH1蛋白为1.92±0.13;Smad7 mRNA为0.37±0.16,Smad7蛋白为0.49±0.11;desmin mRNA为0.66±0.13,desmin蛋白为2.01±0.09;TGF-β1mRNA为1.53±0.09,TGF-β1蛋白为1.44±0.11,与A组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。D组NEPH1 mRNA为0.63±0.08,NEPH1蛋白为1.95±0.09;Smad7为mRNA 0.66±0.13,Smad7蛋白为0.72±0.12;desmin mRNA为0.62±0.16,desmin为1.96±0.13;TGF-β1mRNA为0.98±0.08,TGF-β1蛋白为0.87±0.11,与B组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。E组NEPH1 mRNA为0.72±0.14,NEPH1蛋白为2.13±0.16;Smad7 mRNA为1.41±0.12,Smad7蛋白为1.65±0.12;desmin mRNA为0.56±0.17,desmin蛋白为1.55±0.12;TGF-β1mRNA为0.54±0.12,TGF-β1蛋白为0.52±0.14,与B、D组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论缬沙坦通过抑制TGF-β/Smad信号通路缓解高糖诱导的足细胞转分化,是其保护受损足细胞的可能机制。

国医大师葛琳仪运用癫狂梦醒汤治疗慢性失眠经验

失眠为临床常见的睡眠障碍,其中慢性失眠具有病程长、病情顽固等特点,对患者造成严重的身心困扰。西医治疗慢性失眠,多以镇静催眠药为主,此类药物大多具有耐药性、成瘾性、依赖性等,长久服用后效果逐渐减退甚至失效,而中医运用整体观念和辨证论治调治失眠具有针对性强且不良反应少的优势。国医大师葛琳仪教授在50年的行医经验中总结得出癫狂梦醒汤在治疗慢性失眠时颇具疗效,文章将对其经验加以阐述并以真实验案浅析于文中。