基于“精准病理”的肾穿刺活检在IgA肾病与膜性肾病病因分析中的应用价值及其安全性评价

目的:分析基于“精准病理”的肾穿刺活检在IgA肾病与膜性肾病病因分析中的应用价值及安全性评价,为临床推广使用提供依据和数据支持。方法:选择我院2020年01月—2022年02月间收治的92例IgA肾病和膜性肾病患者作为研究对象,其中IgA肾病共28例,膜性肾病64例;患者均行基于精准病理的肾穿刺活检;详细观察并记录患者血压、血红蛋白水平,并记录患者外科手术并发症、输注血制品、介入栓塞并发症等情况。结果:IgA组和膜性肾病组患者病因存明显差异,且差异存在统计学意义(P<0.05);IgA肾病光镜检查见系膜增生性病变,电镜检查结果显示在系膜旁区或系膜区出现高敏度电子致密物,免疫病理结果显示,C3和IgA在系膜区出现高强度沉积。膜性肾病患者光镜检查见钉突,基底膜增厚,电镜检查出现上皮下有多量电子致密物沉积,免疫病理检查见基底膜外侧C3和IgG呈细颗粒状高强度沉积;所有患者均未出现外科手术并发症、输注血制品、介入栓塞并发症等,IgA肾病组和膜性肾病组患者血压和血红蛋白水平在活检前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用基于“精准病理”的肾穿刺活检可有效区分IgA肾病与膜性肾病病因,具有较高的安全性。

常用肌肉减少症筛查工具在老年脑梗死营养评定的应用效果评价

目的 观察常用肌肉减少症筛查工具在老年脑梗死营养评定中的应用效果。方法 选取该院2019年1月至2022年6月收治的老年脑梗死患者122例,应用简易五项评分(SARC-F)问卷、微型肌肉减少症风险评估(MSRA)问卷、Ishii评分、改良版肌肉减少症五条目(SARC-CalF)问卷,对老年脑梗死患者进行营养评定;以微型营养评定法(MNA)的评估结果为金标准,比较4种筛查工具的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及约登指数。结果 经MNA问卷评价,122例脑梗死患者中营养正常72例(59.0%),处于营养不良状态或存在营养不良风险50例(41.0%);SARC-F问卷、MSRA问卷、Ishii评分、SARC-CalF问卷的灵敏度分别为30.0%、60.0%、64.0%、82.0%,特异度分别为87.5%、66.7%、76.4%、97.2%,阳性预测值分别为62.5%、55.6%、65.3%、95.4%,阴性预测值分别为64.3%、70.6%、75.3%、88.6%,约登指数分别为0.18、0.27、0.40、0.79。SARC-CalF问卷的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及约登指数均高于其他3种工具。结论 SARC-F问卷、MSRA问卷、Ishii评分、SARC-CalF问卷对老年脑梗死患者营养评估均具有一定的临床实用性和营养评估价值,SARC-CalF问卷对老年脑梗死营养评估的灵敏度、特异度更高。

过氧化物还原酶3参与肾透明细胞癌发生与发展的分子机制

【目的】探讨肾透明细胞癌组织中硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3(PRDX_3)的表达与肾透明细胞癌发生发展的关系。【方法】本研究首先在16例肾透明细胞癌组织及癌旁组织中验证了PRDX_3的表达。根据表达量构建了786-O的PRDX_3过表达细胞系及敲低表达细胞系,考察了PRDX_3过表达和敲低表达后,肿瘤细胞的生长情况。通过pull-down试验联合LC-MS/MS技术寻找PRDX_3的相互作用蛋白。初步探究了PRDX_3与过氧化物酶1(PRDX_1)的相互作用关系及PRDX_3参与肾透明细胞癌发生发展的机制。【结果】16例肾透明细胞癌组织样本的western blot检测结果表明,有14例样本PRDX_3下调表达,下调均值1.78倍左右。成功筛选到PRDX_3过表达的786-O单克隆细胞系和对照细胞系[786O-PRDX(_3+)和786O-PRDX(_3-)]和PRDX_3敲低表达的786-O单克隆细胞系和无意义序列对照细胞系(786O-PRDX_3KN和786O-PRDX_3NCi)。qPCR和western blot结果表明,相比786O-PRDX(_3-)组,786O-PRDX(_3+)组在mRNA水平过表达约2.1倍,在蛋白水平过表达约1.8倍;相比786O-PRDX_3NCi组,786O-PRDX_3KN组在mRNA水平低表达约0.48倍,在蛋白水平低表达约0.51倍。CCK-8试验表明,相比786O-PRDX(_3-),786O-PRDX(_3+)细胞生长速率明显降低。但敲低PRDX_3的表达后,敲低组和其对照组细胞的生长速率却无显著性差异。Pull-down试验发现PRDX_3可能与PRDX_1存在相互作用。结合质谱分析及数据库检索,发现PRDX_3通过二硫键与PRDX_1结合并发挥作用,分别通过plink软件鉴定到二者可信的结合位点,初步探讨了PRDX_3参与肾透明细胞癌发生发展的可能机制。【结论】PRDX_3在肾透明细胞癌组织中下调表达,可能参与了肿瘤的发生发展。提高PRDX_3的表达水平,能显著降低肿瘤细胞的生长速率。基于PRDX_3蛋白,可能开发针对肾透明细胞癌的靶向药物。

女性生殖道具有中肾形态特征的腺癌七例临床病理分析

目的探讨女性生殖道不同部位具有中肾形态特征的腺癌在组织形态、免疫表型等方面的异同。方法收集浙江大学医学院附属妇产科医院2018年1月至2020年10月间确诊的子宫颈中肾腺癌(MA)2例及子宫体、卵巢中肾样腺癌(MLA)5例,病变组织行HE染色、免疫组织化学染色及KRAS基因突变检测,并复习相关文献。结果子宫颈MA与子宫体、卵巢MLA有相同形态特征,表现为腺管、乳头、实性等多种结构的混合。然而2例子宫颈MA主体位于宫颈间质内,肿瘤周边存在中肾管残余,4例子宫体MLA主要累及子宫内膜及肌层,1例卵巢MLA可见局部子宫内膜异位,且MLA病例均未见中肾管残留。免疫组织化学GATA3在全部7例MA/MLA中表达,TTF1仅在4/5例MLA中表达。所有病例雌激素受体、孕激素受体阴性,p53野生型。所检测的5例MA/MLA病变均存在KRAS基因突变。在6~32个月的随访中,1例患者出现复发,其余均无瘤生存。结论女性生殖道子宫颈MA与子宫体、卵巢MLA有相似的形态特征、免疫表型,且均存在KRAS基因突变;但与子宫颈MA起源于中肾残余不同,后者与苗勒上皮关系密切。

PAX2在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中PAX2的表达情况及临床意义。方法 收集32例宫颈鳞状癌患者标本进行回顾性分析。实时荧光定量PCR和Western blot分别检测CSCC组织及癌旁正常组织中PAX2 mRNA和蛋白的表达水平,免疫组化染色检测石蜡包埋组织切片中PAX2的表达情况,并分析其表达与临床病理特征之间的联系。结果 PAX2在CSCC组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.01),在组织切片中的高表达率(20/32,62.5%)显著高于癌旁正常组织(5/32,15.63%)(P<0.01)。32例病例中,PAX2的表达水平与肿瘤组织分化程度(P<0.05)和淋巴结转移(P<0.05)的临床病理特征显著相关,但与年龄无关(P>0.05)。结论 PAX2在CSCC组织中高表达且与肿瘤的分化转移有关,可能是CSCC新的预测标志物及治疗靶点。

Nup88通过钙调蛋白调控乳腺癌细胞侵袭能力

目的 探讨核孔蛋白88kDa(Nup88)基因影响乳腺癌细胞系BT-20细胞侵袭能力的分子机制。方法 敲低Nup88基因后,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭能力,通过TMT标记的定量蛋白质组技术,采用流式细胞术检测Nup88敲低细胞的钙离子水平,通过明胶酶谱实验检测Nup88敲低表达后,乳腺癌BT-20细胞分泌基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的情况。通过pull-down试验寻找并验证与Nup88存在相互作用的蛋白。结果 敲低Nup88基因表达后,细胞培养48h后,划痕愈合率低于对照组,穿膜细胞数量亦显著低于对照组,BT-20细胞的迁移能力减弱。蛋白质组学分析得到差异蛋白247个,其中Nup88基因敲低细胞株的Nup88蛋白表达水平降低约48%。GO分析表明,敲低Nup88的表达可能影响了钙结合相关蛋白的表达。细胞实验结果表明,细胞中钙离子含量显著降低,分泌MMP2和MMP9的活性显著低于阴性对照组细胞(P<0.05)。Pull-down结果证实Nup88与多个钙结合蛋白存在相互作用,可能通过二硫键与钙结合蛋白39(CAB39)相同作用,共同调控钙离子水平。结论 Nup88可能通过与CAB39结合,调节胞内钙离子含量,调节基质金属蛋白酶的活性,进而影响肿瘤细胞的侵袭能力。