多重PCR方法检测EHEC和EPEC毒力基因

目的 建立简易实用的检测EHEC和EPEC多种毒力基因的方法。方法 应用多重PCR同时检测大肠埃希菌菌株的stx1、stx2、EPEC和EHEC共同的eaeA(eaeA -gen)等靶基因 ;用常规PCR检测EHECO15 7特异的eaeA(eaeA -O15 7)基因 ,以区分EHEC和EPEC的eaeA基因。结果 对分别分离自美国和我国江苏的EHECO15 7菌株以MPCR检测 ,stx1、stx2和eaeA -gen基因均阳性 ,同时常规PCR扩增eaeA -O15 7也阳性。在 8株分离自杭州的志贺毒素阴性的大肠埃希菌O15 7菌株中 ,stx1、stx2和eaeA -O15 7基因均阴性 ,仅 2株扩增出EPECeaeA基因。在 2 8株EPEC血清型、12株ETEC血清型、12株EIEC血清型大肠埃希菌菌株中 ,stx1和stx2基因均阴性 ;3株EPEC血清型菌株eaeA - gen基因阳性。结论 MPCR技术可同时检测菌株的stx1、stx2和eaeA基因 ,可为EHEC和EPEC感染的诊断及流行病学调查 ,提供一种简便、实用。