抗CD19嵌合受体修饰的NK-92细胞的构建及其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用

目的:构建表达CD19的二代CAR-NK-92细胞系,探讨其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的特异性杀伤作用。方法:构建表达CD19-CAR基因的载体并包装慢病毒颗粒,感染NK-92细胞,流式细胞术检测感染率,并进一步分选阳性细胞,Western blotting检测CD19-CAR在NK-92细胞中的表达;以CD19阴性骨髓瘤细胞U-266、CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞ARH-77和HS-Sultan细胞为靶细胞,以CD19CAR-NK-92为效应细胞,流式细胞术检测细胞杀伤实验中存活肿瘤细胞的绝对数量并计算杀伤率。结果:成功构建慢病毒载体p LVX-CD19-CAR并包装病毒颗粒,感染NK-92细胞后CD19CAR-NK-92细胞纯度高于90%;Western blotting分析显示CD19-CAR已经成功表达在NK-92中。CD19CAR-NK-92对ARH-77[(70.10±1.86)%vs(1.95±0.63)%,P<0.01]和HS-Sultan[(74.98±1.60)%vs(0.58±1.49)%,P<0.01]细胞的杀伤率显著高于空载体对照组Zs GreenNK-92细胞,对U266的杀伤率无显著差别(P>0.05)。结论:成功构建了表达CD19CAR的NK-92细胞系,其对CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞有特异性杀伤作用。

精神分裂症患者尿路感染病原菌及外周血NLRP3/IL-1β通路表达

目的探讨精神分裂症患者尿路感染病原菌及外周血Nod样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素(IL)-1β通路表达。方法选取2020年1月-2023年1月杭州市第七人民医院收治的602例精神分裂症患者为研究对象,根据是否发生尿路感染分为感染组30例和非感染组572例,分析尿路感染病原菌,并进行药敏试验,比较两组患者外周血NLRP3、核因子κB(NF-κB)、IL-1β表达,三指标单独及联合检测对精神分裂症患者尿路感染的诊断价值。结果30例精神分裂症尿路感染患者,共培养出48株病原菌,主要为革兰阴性菌中的大肠埃希菌和革兰阳性菌中的粪肠球菌,真菌占比较少。大肠埃希菌对哌拉西林、左氧氟沙星耐药严重,对亚胺培南、阿米星卡敏感;粪肠球菌对苯唑西林、红霉素耐药严重,对呋喃妥因、替加环素敏感。感染组外周血NLRP3、NF-κB、IL-1β表达高于非感染组(P<0.05)。外周血NLRP3、NF-κB、IL-1β表达联合检测对精神分裂症患者尿路感染诊断的曲线下面积(AUC)高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度为93.33%,特异度为89.32%。结论精神分裂症尿路感染患者主要病原菌为大肠埃希菌和粪肠球菌,大肠埃希菌对亚胺培南、阿米星卡敏感,粪肠球菌对呋喃妥因、替加环素敏感,且NLRP3/IL-1β通路激活,外周血NLRP3、NF-κB、IL-1β联合检测诊断价值高。