尿刊酸修饰纳米壳聚糖载体负载NGAL siRNA干扰结肠癌细胞NGAL基因的实验研究

目的探讨尿刊酸修饰壳聚糖负载siRNA对结肠癌细胞NGAL基因的沉默效应。方法采用对照组、尿刊酸修饰壳聚糖（UAC）组及壳聚糖（CTS）组分别包裹NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29,采用ELISA法检测NGAL蛋白水平。结果经转染siRNA后,ELISA法测得NGAL分泌蛋白量,UAC组为0.583μg/L,显著低于CTS组0.772μg/L和对照组1.071μg/L（P〈0.05）。结论尿刊酸修饰壳聚糖携载小干扰RNA可以明显下调HT29结肠癌细胞株NGAL基因和蛋白的表达。

血管内皮抑素微泡联合聚焦超声抗结肠癌肿瘤血管生成的实验研究

目的评估靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照抑制结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤血管生成的治疗效果。方法将65只结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤的Balb／c裸鼠模型随机分为5组，每组13只：A组为空白对照组，裸鼠肿瘤未行任何治疗组；B组为单纯超声辐照组，仅行超声辐照，未使用任何造影剂；C组为超声辐照联合SonoVue裸微泡治疗组；D组为超声辐照联合Targestar．SA裸微泡治疗组；E组为超声辐照联合包载血管内皮抑素的微泡治疗组。分别于辐照前、辐照后1、14和28d测量肿瘤体积，绘制肿瘤体积生长曲线。实时超声造影检查，脱机分析峰值强度（PI）、局部血容量（RBV）和局部血流量（RBF）等造影参数。实验结束后切除肿瘤组织行光镜及电镜病理学检查，并通过CD34免疫组织化学检测评估肿瘤坏死面积（NA）和微血管密度（MVD）。结果辐照前各组肿瘤体积的差异无统计学意义（P〉O．05）；辐照后28d，C组、D组和E组肿瘤体积明显小于A组和B组，且E组明显小于c组和D组（均P〈0．01）。辐照前各组PI、RBV和RBF的差异均无统计学意义（均P〉0．05）；辐照后28d，C组、D组和E组PI、RBF和RBV较辐照前明显降低且明显低于A组和B组（均P〈0．05），E组明显低于C组和D组（均P〈0．05）。电镜观察显示，C、D、E组肿瘤细胞核膜消失，核染色质溶聚，呈簇状不规则排列，线粒体空泡化和微血管内皮损伤出血，以E组最为明显，而A和B组鲜见。免疫组织化学染色显示，治疗后28d，E组肿瘤组织NA明显高于其他各组，而MVD则明显低于其他各组（均P〈0．01）。结论靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照可以破坏结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤微血管，并抑制肿瘤新生血管生成，增强结肠癌的治疗效果．将来可能是具有临床应用前景的结肠癌治疗新方法。

尿刊酸修饰壳聚糖载体负载中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白干扰RNA对结肠癌细胞增殖和迁移及凋亡的实验研究

目的 探讨尿刊酸修饰壳聚糖（UAC）负载siRNA对中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）的基因沉默作用及对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 采用UAC和壳聚糖（CTS）分别包裹NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29，采用实时荧光定量PCR检测NGAL的表达量，并分析NGAL基因沉默与细胞增殖、迁移及凋亡的关系。结果 荧光显微镜下显示，UAC-siRNA的转染效率为（37.52 ± 7.17）%，高于CTS-siRNA的（11.32 ± 3.39）%，差异有统计学意义（t= 6.102，P= 0.005）。siRNA转染48 h后，以GAPDH为内参，测得UAC组NGAL基因的相对表达量为0.350，CTS组NGAL基因的相对表达量为0.529，差异有统计学意义（t=-3.743，P= 0.02）。增殖实验显示，UAC和CTS两组与对照组相比，细胞增殖率稍有下降，但差异无统计学意义（F=9.520，P= 0.438）。而迁移实验显示，UAC组和CTS组HT29细胞的24 h迁移率均低于对照组（F= 6.756，P= 0.029）；其中UAC组HT29细胞的24 h迁移率为（77.90 ± 7.14）%，低于CTS组的（87.67 ± 3.98）%（t=-1.704，P= 0.164）。凋亡检测显示，转染后2 d，UAC组细胞凋亡率为（15.800 ± 1.054）%，高于CTS组的（12.900 ± 0.656）%和对照组的（11.933 ± 1.914）%，差异有统计学意义（F= 7.004，P= 0.027）。结论 CTS经尿刊酸修饰为UAC后，包裹能力及转染效率显著增加；以UAC为载体的siRNA干扰NGAL基因后，可沉默HT29结肠癌细胞株NGAL基因的表达，抑制HT29结肠癌细胞迁移，促进细胞凋亡。

经骶尾入路横切口手术治疗直肠后间隙肿瘤12例

目的探讨经骶尾入路横切口手术治疗直肠后肿瘤的安全性及疗效。方法回顾性分析2013年1月至2017年8月间在杭州市第三人民医院接受经骶尾入路横切口手术治疗直肠后肿瘤的12例患者的临床资料。结果所有患者肿瘤均完整切除,手术顺利,平均手术时间129.6(115~165)min,术中平均出血量48(20~80)ml,术后住院时间平均12.1(10~14)d,术后无切口感染、骶前静脉丛大出血、肛门失禁、骶前脓肿、肛瘘、输尿管损伤、泌尿生殖功能障碍等并发症发生,无术中输血和围手术期死亡病例。术前2例排粪困难、1例排尿困难、1例骶尾部疼痛症状术后均完全缓解。术后病理报告:表皮样囊肿8例,畸胎瘤3例,神经鞘瘤1例。术后平均随访18.5(2~35)个月,1例畸胎瘤术后14个月复发,再次经骶尾入路手术切除后痊愈。结论经骶尾入路横切口手术治疗直肠后间隙肿瘤操作简便、创伤小,术后并发症少,复发率低,安全可行,可作为直肠后间隙肿瘤的常规手术方法。