中波紫外线辐射角质形成细胞核因子kB和P53信号通路的交互作用

目的研究中波紫外线(UVB)辐射对表皮角质形成细胞核因子 kB(NF-kB)和 P53信号通路的影响以及 NF-kB 和 P53信号通路的交互作用。方法正常人表皮角质形成细胞(NHEK)(含野生型 p53)和永生化人角质形成细胞株 HaCaT(含突变型 p53)各分2组于37℃、5%CO_2环境培养。当细胞融合达85%时进行 UVB(60 mJ/cm^2)辐射,其中1组于辐射前1 h 加入终浓度为5μmol/L 具有抗 NF-kB 活化作用的 BAY11-7082。分别提取辐射前后 NHEK 和 HaCaT 细胞蛋白和核蛋白,应用 Western 印迹检测 NF-kB、P53和 P21蛋白的表达水平,应用电泳迁移变更分析(EMSA)检测NF-kB 的转录情况。结果 UVB 辐射可激活 NHEK 和 HaCaT 的 NF-kB、P53和 P21的蛋白表达和NF-kB 的转录活性。BAY11-7082对 NHEK 和 HaCaT 的 NF-kB 的转录活性均具有显著的抑制作用。作为 NF-kB 的抑制剂,BAY11-7082还显著抑制了 NHEK 的 P53和 P21的蛋白表达(P53:0.08±0.07vs 0.78±0.32,P<0.01;P21:0.65±0.22 vs 1.58±0.77,P<0.05),但不影响 HaCaT 的 P53和 P21的蛋白表达。结论 UVB 辐射激活表皮角质形成细胞的 NF-kB 和 P53信号通路存在交互作用,这种交互作用与 P53功能状况相关。