“读、议、练”在预防医学专业药理学教学中的应用及思考

目的探索"读、议、练"教学模式在预防医学专业药理学课程教学中的应用与效果。方法分别以2011级和2010级预防医学专业学生作为实验组和对照组,以期末考试成绩、学生科研能力和综合素质等方式评价教学效果。结果通过"读、议、练"教学模式改革,增强了预防医学专业学生学习药理学的主动性和积极性,多环节提升了药理学的教学效果,实验组期末药理学理论考试优秀率增加,不及格率降低;学生的科研能力和综合素质明显提高。结论在预防医学专业实施药理学"读、议、练"教学模式改革,有助于提高药理学课程教学质量,并全面推动学生综合能力的提高。

自噬在神经突起变性过程中的作用

自噬是细胞内物质的降解途径之一,介导长寿命蛋白和部分细胞器的降解,对维持神经元内环境稳态具有重要的生理功能。蛋白质聚集体在神经元内外的堆积是多种神经系统退行性疾病的共同病理表现。神经元轴突和树突(或统称"突起")细长,因而对蛋白质聚集和细胞内受损细胞器的堆积尤为敏感。神经系统退行性疾病发病早期,常伴随突触病变、轴突末梢变性和突起萎缩等病理现象。因此,通过自噬途径有效清除蛋白聚集物和受损细胞器,可能可以缓解神经突起的变性。然而也有研究表明,自噬不足或过度活化也将加剧神经突起损伤。本文介绍了神经突起中自噬的相关研究进展,包括神经突起中自噬的形成和运输,自噬对神经突起生长和损伤的调控,及自噬与神经系统退行性疾病中突起损伤的相关性。

半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。

齐留通减轻小鼠小胶质细胞介导的鱼藤酮对PC12细胞的毒性作用

目的：观察5-脂氧酶选择性抑制剂齐留通对小胶质细胞介导的鱼藤酮神经毒性的影响.方法：以鱼藤酮预处理的小鼠小胶质BV2细胞条件培养液培养PC12细胞,通过MTT法和乳酸脱氢酶（LDH）释放分析PC12细胞损伤和活性变化,Hoechst/碘化丙啶荧光双染检测PC12细胞死亡,并评估齐留通对小胶质细胞介导细胞毒性的作用.结果：1、3、10 nmol/L鱼藤酮对PC12细胞无直接毒性,但是其预处理的BV2细胞条件培养液间接诱导PC12细胞形态改变、活性下降,LDH释放和细胞死亡明显增加;0.01、1μmol/L齐留通能有效减轻小胶质细胞介导的鱼藤酮细胞毒性作用.结论：5-脂氧酶抑制剂齐留通能减轻小胶质细胞介导的鱼藤酮神经毒性,提示5-脂氧酶通路在小胶质细胞炎症诱导的神经细胞死亡中有重要作用.

新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。

5-脂氧酶在小鼠帕金森病模型中的表达

目的5-脂氧酶蛋白（5-lipoxygeanse,5-LOX）是生成炎性介质白三烯类（leukotrienes,LTs）物质的关键酶,参与脑缺血、脑外伤、脑肿瘤以及阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）等中枢神经系统疾病的发生,但其在帕金森病（Parkinson’s disease,PD）中的作用及表达变化特点仍不清楚,因此对PD动物模型中5-LOX蛋白的脑内表达变化特点进行了研究.方法C57BL-6小鼠腹腔连续注射PD神经毒素MPTP（30mg·kg^-1）3d,首次注射前、最后1次注射后3h处死小鼠,免疫组化和Westernblot检测小鼠纹状体和黑质内5-LOX蛋白表达.对照组腹腔注射生理盐水（0.1ml/10g）.结果正常小鼠脑内纹状体和黑质中5-LOX蛋白呈弱表达,经MPTP处理后,纹状体和黑质内5-LOX蛋白表达增加.此外,纹状体内5-LOX在细胞胞质和核内表达;在黑质内,5-LOX主要表达于细胞胞质中.结论MPTP诱导小鼠纹状体和黑质内5-LOX蛋白表达增加,可能参与PD的发生.

亚精胺调控细胞自噬在衰老和神经退行性疾病中的作用研究进展

亚精胺普遍存在于动植物细胞中,发挥广泛的生物学作用。自噬是细胞内重要的降解途径之一,细胞通过自噬-溶酶体通路,清除长寿命蛋白和受损细胞器,维持细胞内环境稳定。大量研究结果表明,亚精胺调控的细胞自噬参与众多生理病理过程,其表达水平异常又可加速衰老、诱发神经退行性疾病等。本文对亚精胺诱导细胞自噬的病理生理学作用进行综述,并以衰老和神经退行性疾病为例,阐释亚精胺调控的细胞自噬与人类生理病理的相关性。

神经炎症和自噬在脑损伤中的作用

神经炎症反应在脑损伤的发病机制中起重要作用。自噬是降解细胞内机能障碍的蛋白质和损伤的细胞器的关键生物学过程。自噬异常通过影响炎症反应参与中枢疾病的发病过程。本文对炎症和自噬参与脑损伤病理过程的研究进展进行综述,并进一步讨论自噬对炎症反应的调节机制。