SRAP与TRAP分子标记及其在植物研究中的应用

文章详细阐述了SRAP和TRAP标记的原理、引物设计、扩增检测条件及特点,综述了两种标记近年来在植物遗传多样性、遗传图谱构建及重要性状基因标记研究等方面的最新应用,并对其应用前景进行了展望.

转mtlD/gutD基因稻米对大鼠性腺毒性的实验研究

研究了转mtlD/gutD双价基因稻米对大鼠的性腺毒性。通过对大鼠90d喂养观察及对各组动物的睾丸和卵巢进行组织切片检查,未见有意义的病理改变。比较雌性大鼠的性成熟、雄性大鼠的精子畸变率及雌雄大鼠的性激素水平,各实验组与对照组均无显著差异(P>0.05)。结果初步表明用转mtlD/gutD双价基因水稻秀水11品系T18-7-8-1稻米喂养大鼠90d对大鼠性腺器官的结构和功能无明显影响。

应用RMAPD分子标记技术研究兰属植物间的亲缘关系(简报)

兰属是兰科兰族萼足兰亚族的一个属。全世界约有兰属植物70种，主要分布于亚洲热带与亚热带地区，向南到澳大利亚北部。根据Du Puv＆Cribb分类系统，我国有49种兰属植物和一些变种,产于秦岭以南各省。我国兰花的市场交易额巨大。这是由于兰属植物不仅具较高的观赏价值。还具重要的药用价值。

13种石斛属植物遗传多样性的AFLP分析

采用AFLP技术对13种石斛属植物的遗传多样性进行了分析。选择性扩增引物组合E+ACT/M+CAC、E+AAC/M+CAC和E+ACA/M+CAC分别对这13种材料进行扩增,得到丰富的条带。在100-300bp共得到346条带,多态性带342条,多态性百分率为98.8%。聚类分析结果表明,在相似系数0.54处,可将13种材料分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类。Ⅰ类包括:串珠石斛、铁皮石斛、广东石斛、重唇石斛、晶帽石斛、细叶石斛、滇桂石斛、报春石斛、玫瑰石斛、球花石斛;Ⅱ类包括:鼓槌石斛;Ⅲ类包括:美花石斛(花,浅红)、美花石斛(花,淡白)。AFLP分析结果与传统分类学的结果基本一致,表明该标记技术对石斛属植物的遗传多样性和分类研究是可行的。

兰属Cymbidium植物ISSR遗传多样性分析

将简单重复序列区间扩增多态标记(inter-simple sequence repeats,ISSR)技术应用于16种兰属的遗传多样性分析,15个引物共扩增出836条带,其中有227条多态带,多态百分比为27.2%。UPGMA聚类结果显示:春兰与春剑的亲缘关系最近,而兔耳兰与其他15种兰属植物的距离最远。ISSR聚类结果与传统分类结果基本相似,表明该技术能在分子水平上对传统兰属分类进行必要补充。

10种冬青属植物遗传多样性RAPD和AFLPs分析

采用RAPD和AFLP技术,对10种冬青属植物基因组进行DNA片段扩增,以研究该属种间遗传多样性。结果表明:在RAPD分析中,通过对100种10个碱基随机引物的筛选,发现11种引物能得到多态性较高扩增产物,11种引物共扩增出301条多态性条带,多态率为98.63%。在AFLP分析中,3对选择性引物组合均扩增出了丰富的多态性片段。利用RAPD和AFLP技术分析,结果按UPGMA类平均法进行聚类,聚类结果显示冬青和代茶冬青,木姜冬青和浙江冬青以及光枝刺缘冬青与毛枝三花冬青之间的亲缘关系最近。

植物蜡质合成与分泌的研究进展

植物蜡质是指植物裸露在空气中的植物组织表皮脂质,它在降低植物非气孔水分散失,保护植物抵御紫外线、病虫害中起到重要作用。本文对近年来蜡质成份的研究及相关基因克隆的研究进展进行了综述,同时并对蜡质基因的应用前景进行了展望。

石斛叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化

以石斛叶片为材料,建立了一套适用于石斛蛋白质组分析的双向电泳体系,探讨了石斛叶片蛋白的提取、蛋白定量以及双向电泳的一些关键技术。结果表明,通过三氯乙酸(TCA)法提取、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得稳定、清晰的双向电泳图谱,获得了可分辨蛋白质斑点数约613个。

乔松根特异启动子PmPgPR10驱动Na^+/H^+逆转运蛋白提高转基因水稻的耐盐性

为获得抗盐水稻,将小麦液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因TaNHX2与乔松(Pinus griffithii)根诱导型特异表达启动子PmPgPR10融合(PmPgPR10∷TaNHX2)并转化水稻,以研究PmPgPR10启动子对TaNHX2基因表达的影响以及转基因植物的耐盐性。PCR、Southern和实时PCR试验结果表明,PmPgPR10∷TaNHX2基因已通过农杆菌介导法整合进水稻基因组,而且外源基因已在受体细胞中正确表达。在盐胁迫处理时,转PmPgPR10基因植株的耐盐性以及外源基因的表达量显著高于对照植株,说明PmPgPR10启动子可以调控TaNHX2基因在根中特异表达。为了进一步分析转基因植株耐盐机理,比较了日本晴和转基因T3代植株中液泡腺苷三磷酸酶(V-ATPase)和液泡焦磷酸酶(V-PPase)活性,发现转PmPgPR10∷TaNHX2基因水稻的V-ATPase和V-PPase酶活性显著高于非转基因对照,说明V-ATPase和V-PPase活性提高在转TaNHX2基因水稻耐盐性过程中发挥重要作用。在盐胁迫处理时,V-ATPase和V-PPase活性只能在转基因植株的根中但不能在叶片中被检测到,进一步说明PmPgPR10启动子在根中特异性表达。因此,PmPgPR10具有在根中增强下游TaNHX2基因表达,并显著提高转基因植株耐盐性的能力。

DNA分子标记在铁皮石斛研究中的应用

铁皮石斛具有滋阴养胃、润肺止咳、抗癌和延年益寿等功效,是我国的名贵药材。近年来,由于过度采收及生境破坏严重,铁皮石斛资源非常紧缺;另外,目前市场上商品铁皮石斛掺假现象十分常见,严重影响了商品铁皮石斛的质量。综述了DNA分子标记技术在铁皮石斛研究中的应用进展,为铁皮石斛的精确鉴定及对其种质资源合理开发和保护提供了有效的分子技术依据。

金钗石斛相关序列扩增多态性反应体系的正交优化研究

目的建立金钗石斛Dendrobiumnobile相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系,为金钗石斛分子生物学研究提供技术支持。方法运用L25(56)正交设计对影响金钗石斛SRAP反应的5个因素:模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物在5个水平上进行优化试验,对PCR结果进行极差分析。结果金钗石斛SRAP反应最佳体系为:25μL PCR体系中含有20 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,1 UTaq酶,0.6μmol/L引物。各因素对SRAP反应的影响依次为:Taq酶>Mg2+>dNTPs>模板DNA>引物。结论所建立的金钗石斛SRAP反应体系具有标记位点清晰、多态性丰富、稳定性好等特点,可用于金钗石斛分子生物学的研究。