过表达miR-498通过下调STAT3抑制类风湿性关节炎患者Th17细胞分化

本文旨在探讨微小RNA-498(miR-498)影响类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th17细胞分化的作用机制。从50例RA患者和50例对照人群中分别收集外周血,分离PBMCs。流式细胞术检测CD4^+IL-17^+T(Th17)细胞或者CD4^+FOXP3^+T(Treg)细胞比例,并分析Th17/Treg比值。Real-time PCR检测细胞中miR-498和STAT3基因表达,Western blot检测STAT3的蛋白表达,ELISA检测外周血血清或细胞上清中IL-17的浓度。荧光素酶报告基因实验验证miR-498靶向结合STAT3的3’非翻译(3’untranslated region,3’UTR)。miR-498 mimic或/和pc DNA-STAT3瞬时转染CD4^+T细胞,进一步考察miR-498影响Th17细胞分化的机制。结果显示,RA患者的PBMCs中,Th17细胞比例显著高于对照,且Th17/Treg比值也显著高于对照(P<0.05)。miR-498低表达而STAT3高表达于RA患者的PBMCs中,且RA患者血清中的IL-17浓度显著高于对照(P<0.05)。在转染野生型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor后,荧光酶活性、STAT3的基因和蛋白表达均明显改变(P<0.05),但是在转染突变型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor,上述指标没有显著变化(P>0.05)。此外,miR-498 mimic转染CD4^+T细胞后,显著降低Th17细胞比例,且细胞分泌IL-17的水平减少(P<0.05),而与pcDNA-STAT3共转CD4^+T细胞后,Th17细胞比例明显提高,细胞分泌IL-17的水平增加(P<0.05)。以上结果提示,在RA患者CD4^+T细胞中,过表达miR-498靶向下调STAT3,进而抑制Th17细胞分化。

整合素aV亚基在类风湿性关节炎中的表达及其与Th17细胞分化的关系

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者整合素aV亚基的表达,分析其与辅助性T细胞17(Th17)分化的关系。方法选取30例类风湿性关节炎患者(RA组)、20名健康体检者作为对照组,运用流式细胞术(FCM)检测外周血PBMCs中Th17细胞和调节性T细胞比例以及PBMCs和树突状细胞DCs中表达整合素aV亚基的CD11c^+αν^+DC比例。结果与对照组相比,RA组Th17/Treg细胞比值显著升高(P<0.05);RA患者外周血及DCs中CD11c^+αν^+DC细胞在CD11c^+DC中占比均高于对照组(P<0.05);Spearman相关性分析发现RA患者中树突状细胞整合素aV亚基的表达与Th17/Treg细胞比值呈正相关(r=0.478,P<0.05)。结论整合素aV亚基可能参与类风湿性关节炎患者Th17细胞分化的调控。