基于生物反应器的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)悬浮培养工艺研究

为了优化生物反应器全悬浮培养技术制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺,试验首先通过摇瓶培养对病毒接种时的细胞密度、胰酶浓度、接毒剂量和收毒时间等培养条件进行优化;之后按照摇瓶培养确认的工艺进行生物反应器全悬浮培养工艺验证,同时对pH值、溶氧值(DO)、转速等培养参数进行优化,以病毒含量(TCID_(50))为指标,最终筛选出在15L生物反应器中培养猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的最优条件,并进一步在50L生物反应器中进行工艺验证,将病毒液灭活后稀释至1×10^(7).0TCID_(50)/mL免疫怀孕75~90d的健康易感初怀母猪,在分娩当日,采集母猪和仔猪血清,并对分娩的3日龄仔猪攻毒进行免疫原性试验。结果表明:猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)在摇瓶上的最适培养条件为当细胞密度达到6×10^(6)个/mL以上时,用含胰酶(终浓度为20μg/mL)的无血清培养基将细胞密度稀释至2×10^(6)个/mL,按感染复数(MOI)=0.1接毒,130 r/min摇床振荡培养36h可收获病毒液,病毒含量可稳定达到1×10^(7.5)TCID_(50)/mL以上;猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)在15L生物反应器上的最适培养条件为pH值7.0~7.2、DO值50%、转速80~100 r/min,培养36h收获的病毒液含量可稳定在1×10^(7.5)TCID_(50)/mL以上;在50L生物反应器上放大培养收获的病毒液含量为1×10^(7).8TCID_(50)/mL。母猪和仔猪中和抗体效价均≥1∶32,免疫保护力为100%。说明本试验条件下成功建立并优化了生物反应器全悬浮培养制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺,生产的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的免疫原性较好。

正确认识gB抗体等指标在猪群伪狂犬病免疫评估中的作用

伪狂犬病gB抗体检测常被用来评估疫苗免疫效力,基于不同方法的试剂盒检测结果可能截然相反。了解猪伪狂犬病抗体应答规律,理性分析问题产生的原因,有助于管理者更科学合理地选择疫苗并制定免疫程序。

母猪免疫PCV2疫苗对繁殖性能的影响

1991年,Clark等在加拿大西部地区表现断奶仔猪多系统衰竭综合征的病猪体内首次分离到猪圆环病毒2型(PCV2)。1995年,我国台湾地区首次发现PCV2感染。目前,PCV2的感染遍布全球养猪业,我国PCV2感染率较高,流行广泛,给养猪业带来了巨大的经济损失,是规模化猪场最重要的经济性疾病之一。PCV2是导致仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)和圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原。

基于创新能力提升的基因工程教学改革探讨与实践

基因工程是现代生物技术工程的核心课程,也是生物制药专业学生的一门必修课程。结合浙江理工大学基因工程课程的改革与实践的经验,本文从教学理论、教学方法及教学形式等方面对浙江理工大学生物制药专业基因工程课程改革进行了系统的梳理和总结,初步建立了基于创新能力提升的基因工程理论教学、实验实践及工厂参观实习的教学体系。

猪支原体肺炎基因工程疫苗的研究进展

猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumoniae of swine,MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumonia,Mhp）引起的一种慢性呼吸道传染病,该病给养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗接种是目前减轻或预防由猪肺炎支原体感染引发经济损失的主要手段。对猪支原体肺炎基因工程疫苗近年来的研究进展进行综述,主要包括黏附因子相关疫苗、核苷酸还原酶相关疫苗、DNA疫苗、表达文库疫苗和肽疫苗等,最后对基因工程疫苗研究工作的继续开展提供了建议。