钙结合蛋白S100B对骨性关节炎模型兔软骨损伤修复中炎性递质表达影响

目的探讨钙结合蛋白S100B对骨性关节炎(OA)模型兔软骨损伤修复中炎性递质表达的影响及其机制。方法应用膝关节制动法制备兔OA模型。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测兔关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,用Real-time PCR(RT-PCR)方法及Western blot法检测兔软骨组织中S100B、成纤维细胞生长因子(FGF2)及成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)的表达。利用小干扰RNA(siRNA)技术,构建S100B的siRNA干扰载体和过表达载体以及FGFR1的siRNA干扰载体,用慢病毒转染方法,将S100B的siRNA干扰载体和过表达载体以及FGFR1的siRNA干扰载体转入人滑膜成纤维细胞内。采用ELISA方法检测各组滑膜成纤维细胞中IL-1β和TNF-α水平,用RT-PCR和Western blot法检测FGF2和FGFR1的表达。结果与对照组比较,模型组兔关节液中IL-1β、TNF-α水平显著增加(t=4.042、6.408,P<0.05),兔软骨组织中S100B、FGF2、FGFR1表达显著增加(t=4.091～7.229,P<0.05)。S100B过表达及干扰实验显示,LPS+vehicle control组、LPS+S100B过表达组细胞IL-1β、TNF-α水平较空白对照组升高,且LPS+S100B过表达组高于LPS+vehicle control组,差异均有统计学意义(F=32.019、27.377,P<0.05);而LPS+S100BsiRNA组细胞IL-1β、TNF-α水平与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。FGFR1拮抗实验显示,LPS+vehicle control组、LPS+S100B过表达组细胞IL-1β、TNF-α水平较空白对照组升高,且LPS+S100B过表达组高于LPS+vehicle control组,差异均有统计学意义(F=30.548、20.244,P<0.05);LPS+S100B过表达+FGFR1siRNA组细胞IL-1β、TNF-α水平虽高于空白对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。LPS+S100B过表达+FGFR1siRNA组细胞FGF2表达较空白对照组显著升高(F=11.002、13.147,P<0.05),但FGFR1表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论钙结合蛋白S100B能够调节滑膜成纤维细胞炎症反应并可能影响OA软骨损伤修复,其机制可能与激活FGF2/FGFR1信号通路有关。