宫颈癌超声弹性成像参数与癌细胞恶性生物学行为的相关性研究

目的:探讨宫颈癌超声弹性成像参数与癌细胞恶性生物学行为的相关性。方法:180例在本院确诊并接受根治术治疗的宫颈癌患者作为研究对象,术中留取宫颈癌组织、癌旁组织标本,并冻存于液氮罐中备用。术前检测宫颈癌及癌旁组织的超声弹性应变比值(strain ratio),对比其中增殖、侵袭、自噬相关基因表达量的差异。采用Pearson检验评估宫颈癌strain ratio与癌细胞恶性生物学行为的相关性。结果:宫颈癌组织的strain ratio水平高于癌旁组织(P<0.05);增殖相关基因AEG-1、TRAF6、FoxM1mRNA的表达量高于癌旁组织(P<0.05),SFRP2、MST1、Bmi-1mRNA的表达量低于癌旁组织(P<0.05);侵袭相关基因ILK、Sox2、Twist、YB-1、Rab11 mRNA的表达量高于癌旁组织(P<0.05);自噬相关基因ARHI、Beclin1、PULK、PI3KC3 mRNA的表达量低于癌旁组织(P<0.05)。结论:宫颈癌超声strain ratio水平与癌细胞的增殖、侵袭、自噬活性均密切相关,与肿瘤整体恶性程度呈正相关。

甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的研究甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法运用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)法检测甲氟奎(5、10、15、30μmol/L)对食管鳞癌细胞KYSE140的增殖的调控,筛选最适浓度30μmol/L;用β连环素(β-catenin)信号通路激活剂Wnt3a或二甲基亚砜(DMSO)与30μmol/L甲氟奎共处理KYSE140细胞48 h。Transwell法检测细胞的迁移和侵袭;蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中β-catenin、周期素依赖激酶抑制剂p21、增殖细胞核抗原(PCNA)、神经钙黏素(N-cadherin)、上皮钙黏素(E-cadherin)的蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中β-catenin的表达。结果甲氟奎可呈浓度依赖性抑制食管鳞癌细胞KYSE140的增殖,最适浓度为15μmol/L;在24、48和72 h时对照组细胞吸光度分别为(0.21±0.02)、(0.52±0.04)、(1.19±0.10),15μmol/L甲氟奎组细胞吸光度分别为(0.21±0.01)、(0.34±0.03)、(0.68±0.06);对照组迁移和侵袭细胞数分别为(120±8)个、(80±6)个,甲氟奎组迁移和侵袭细胞数分别为(62±5)个、(45±4)个,甲氟奎可明显的抑制KYSE140细胞的增殖、迁移和侵袭,上调p21、E-cadherin,下调PCNA、N-cadherin;最重要的是,甲氟奎可明显的抑制β-catenin信号通路的关键基因β-catenin的表达,且激活β-catenin信号通路可逆转甲氟奎对KYSE140细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制。结论甲氟奎可抑制食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制与抑制β-catenin信号通路的活性相关,将可为甲氟奎治疗食管鳞癌提供更充分的依据。

肉灵芝提取物调控长链非编码RNA BRCA1相邻基因2/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶通路对肝癌细胞Hep3B增殖及凋亡的影响

目的探讨肉灵芝提取物是否可通过长链非编码RNA BRCA1相邻基因2(LncRNA NBR2)/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶(DUSP4/ERK)通路而影响肝癌HepB细胞增殖及凋亡。方法体外培养肝癌HepB细胞,分为1 mg/L肉灵芝提取物组、2 mg/L肉灵芝提取物组、4 mg/L肉灵芝提取物组、si-NC组、si-LncRNA NBR2组、pcDNA-NC组、pcDNA-LncRNA NBR2组、肉灵芝提取物+si-NC组、肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组;采用MTT检测肝癌HepB细胞增殖;流式细胞术检测肝癌HepB细胞凋亡;RT-qPCR检测LncRNA NBR2的表达量;蛋白质印迹法(Western blotting)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、DUSP4、p-ERK蛋白表达量。结果肉灵芝提取物可明显降低肝癌HepB细胞增殖率与PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05),提高肝癌HepB细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平及LncRNA NBR2的表达水平(P<0.05);转染si-LncRNA NBR2后可明显提高肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05),降低凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平(P<0.05),而转染pcDNA-NBR2可明显减弱转染si-LncRNA NBR2对肝癌HepB细胞增殖及凋亡的作用;与肉灵芝提取物+si-NC组比较,肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平升高(P<0.05),凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。结论肉灵芝提取物可通过上调LncRNA NBR2的表达而抑制DUSP4/ERK信号通路的活化从而抑制肝癌HepB细胞增殖及诱导细胞凋亡。