敲减TIM-3对结直肠癌细胞生长及分泌免疫抑制分子的影响

目的研究敲减T免疫球蛋白及黏蛋白分子3(TIM-3)对结直肠癌细胞生长及细胞分泌免疫抑制分子的影响。方法设置稳定感染TIM-3 shRNA和shRNA control重组慢病毒的SW620细胞株为sh-TIM-3和sh-NC,设置不添加慢病毒的SW620细胞为Control组,细胞培养2 d以后,qRT-PCR和Western blot检测细胞中TIM-3表达水平。MTT方法检测细胞增殖情况,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,PI单染法检测细胞周期,Western blot方法检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p27蛋白水平,ELISA法检测细胞分泌的血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果sh-TIM-3组细胞中的TIM-3 mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞增殖能力降低,细胞克隆形成能力也降低,细胞G 0/G 1比例降低,CyclinD1蛋白水平降低,p27蛋白水平升高,细胞分泌的VEGF、IL-10减少,与Control组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论敲减TIM-3能够抑制结直肠癌细胞生长并减少细胞分泌免疫抑制因子。