囊胚培养在生殖助孕中的临床应用现状

囊胚培养是辅助生殖技术中的一项重要胚胎培养技术,是助孕治疗中囊胚移植的基础和前提。囊胚培养后行囊胚移植可以改善胚胎移植的临床结局,也可以作为部分特殊患者的移植策略;囊胚培养可以用于非优质胚胎的筛选、非2PN胚胎的利用以及预测卵裂期胚胎移植的结局;囊胚培养也是PGT周期重要的胚胎培养方案。本文综述了囊胚培养在生殖助孕中的临床应用现状,以期为今后的临床工作提供参考。

动静态小鼠胚胎培养方法的囊胚获得率的对比

目的比较动静态小鼠胚胎培养方法的囊胚获得率。方法对20只雌性昆明小鼠行超促排卵后,进行体外受精。将获得的胚胎分为静态培养组(110个)和动态培养组(120个),分别使用静态培养和胚胎微脉冲震动仪动态培养。比较不同培养模式下卵裂的胚胎数和囊胚形成情况。结果动态培养组的囊胚率为92.5%,高于静态培养组的80.9%(P<0.05)。结论采用胚胎微脉冲震动仪进行体外胚胎培养可以提高囊胚率。

体外胚胎培养是胚胎工程技术的关键环节

背景:体外早期胚胎的培养是胚胎工程技术的主要环节之一。目的:近年来,随着科学家的研究对胚胎发育和体外胚胎培养有了新认识和进展。方法:由第一作者检索1990年1月至2018年10月PubMed数据库相关文献,检索词为“Embryo Engineering;Pre-implantation Embryo;In vitro embryo culture;Assisted Reproductive Technology;ART”,文献语言限制在英文。根据纳入排除标准,最终纳入76条进行分析探讨。结果与结论:在严格遵循医学伦理学原则条件下开展的胚胎体外培养体系是动物胚胎工程的一项关键技术,是保证运用胚胎生物技术顺利生产体外胚胎的基础,通过改良体外胚胎培养体系,可以使体外培养环境更加接近体内环境,提高体外胚胎质量。

不同胚胎冷冻保存时间和方法对FET周期临床结局的影响

目的:比较分析玻璃化和程序化冷冻卵裂期和囊胚期胚胎保存后复苏效果及临床结局。方法:根据不同冷冻保存时间将胚胎冻融周期分为4组,分别为1~6个月组、7~12个月组、13~24个月组和≥25个月组,比较四组的复苏率、临床妊娠率和流产率。根据不同冷冻保存方法分为玻璃化冷冻组和程序化冷冻组。结果:4组胚胎复苏存活率(98.1%、99.0%、96.8%和95.7%)、临床妊娠率(54.4%、55.4%、49.6%和51.5%)和流产率(10.7%、8.9%、9.45和11.15)相比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。玻璃化冷冻组胚胎复苏率和临床妊娠率均显著高于程序化冷冻组(P<0.05)。结论:胚胎冷冻保存时间不影响解冻后胚胎质量。玻璃化冷冻胚胎方法复苏效果优于程序化冷冻法。囊胚期冻融胚胎可获得较高的临床妊娠率。

黄体期与卵泡期全量长效促性腺激素释放激素激动剂降调方案临床结局的比较

目的探讨月经周期不同时间段使用全量长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法回顾性分析2019年1月至2020年7月在我中心行黄体期(A组)或卵泡期(B组)长效长方案的324个IVF/ICSI-ET周期,比较两组患者的促排情况及妊娠结局。结果两组Gn时间、Gn用量和HCG日LH、E2、P水平及子宫内膜厚度差异无统计学意义(P>0.05),两组获卵数、成熟卵率、2PN受精率、胚胎数、优胚率及中重度卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)发生率差异无统计学意义(P>0.05),两组胚胎种植率、临床妊娠率、流产率及活产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄体期全量GnRH-a降调方案可获得与卵泡期长效长方案类似的临床结局。

颗粒细胞端粒长度预测胚胎发育潜能及妊娠率的临床研究

目的研究行卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)患者卵母细胞颗粒细胞的端粒长度与早期胚胎发育潜能及临床妊娠结局的相关性,为实验室评估胚胎发育潜能提供新的参考指标。方法收集生殖中心92例行ICSI-ET患者的卵母细胞颗粒细胞,根据患者的年龄分为低龄(≤35岁)组55例和高龄(>35岁)组37例。利用QRT-PCR法检测患者的颗粒细胞端粒长度,分别记录每组患者卵裂率、优胚率及临床妊娠率。结果卵母细胞颗粒细胞的端粒长度随着年龄的增加而降低(P<0.05)。妊娠患者端粒长度较未妊娠患者长(P<0.05)。结论颗粒细胞端粒长度与早期胚胎发育潜能及临床妊娠率呈现一定的相关性。

囊胚腔再扩张状态对冻融周期单囊胚移植临床结局的影响

目的探讨囊胚腔再扩张状态对冻融周期单囊胚移植临床结局的影响。方法回顾性分析2020年1月至2021年12月在柳州市妇幼保健院生殖医学中心完成的1271个冻融周期单囊胚移植患者的临床资料和临床结局。入组标准:年龄≤38岁、内膜转化日子宫内膜厚度≥7mm、移植单个4期优质囊胚(BB级以上评级囊胚),并排除PGT患者。结果对于D5单囊胚移植组,随着囊胚腔再扩张程度的提高,临床妊娠率和胚胎种植率有提高的趋势。并且,中度扩张组临床妊娠率和胚胎种植率显著低于完全扩张组和部分孵出组(54.3%vs 72.4%vs 73.0%,均P<0.05)。中度扩张组足月分娩率显著低于完全扩张组(77.5%vs 79.6%,P<0.05)。其他指标无显著性差异(均P>0.05)。对于D6单囊胚移植组,随着囊胚腔再扩张程度的提高,临床妊娠率和胚胎种植率也有提高的趋势。并且,低扩张组临床妊娠率和胚胎种植率显著低于部分孵出组(20.0%vs 69.2%,P<0.05)。但是,部分孵出组早产率显著高于完全扩张组(22.2%vs 5.8%,P<0.05)。其他指标无显著性差异(均P>0.05)。结论冻融周期D 5或D 6单囊胚移植中,囊胚腔再扩张状态均与临床妊娠率和胚胎种植率存在一定正相关性,可以作为临床妊娠率和胚胎种植率的预测指标。

维生素D补充治疗对男性不育患者生育力及体外受精-胚胎移植结局的影响

探讨给予男性不育患者维生素D补充治疗对其生育力及体外受精-胚胎移植结局的影响。方法 按照纳入排除标准入组116例受试者,采用配对设计实验,均予口服VD200IU+钙600mg及日晒干预治疗,连续3月。比较治疗前后受试者血清25-(OH)-D水平和精液常规参数,并比较两者的关系,采用二元logistics回归探讨血清维生素D水平、精液常规参数、年龄、BMI、配偶MII卵数量及D3优质胚胎数对体外受精-胚胎移植治疗结局影响。 结果 患者血清维生素D水平、精液浓度、前向运动精子百分比、前向运动精子总数及正常精子形态占比均较治疗前提高明显(P<0.05),且治疗后血清维生素D水平与其精液浓度(r=0.501)、前向运动精子百分比(r=0.573)、前向运动精子总数(r=0.465)及正常精子形态占比(r=0.484)均呈正相关关系(P<0.05)。纳入回归方程变量中仅D3优质胚胎数量(OR=10.895)为IVF-ET的独立影响因素(P<0.05)。结论 维生素D补充治疗可提高不育男性精液浓度、PR百分比,PR总数及正常精子形态进而提高男性生育力,对IVF-ET的结局无影响。纳入研究的变量中仅D3优质胚胎数量为IVF-ET结局的保护因素。

常规IVF受精失败后不同补救ICSI时间对临床结局的影响

目的探讨早期补救卵泡浆内单精子注射在常规体外受精(IVF)中完全不受精或低受精的临床应用价值。方法回顾性分析2017年1月~2019年12月在本院生殖中心常规IVF受精后判断为不受精或低受精后行早期补救ICSI的54周期患者,分为6h后补救组和20h组,统计其早期胚胎发育指标及临床结局。结果 6h补救组的受精率、卵裂率、囊胚率和妊娠率均显著高于20h补救组(P<0.05)。结论 IVF后早补救ICSI(6h补救)组的结局优于晚补救ICSI(20h补救)组,能获得高发育潜能的胚胎,改善临床结局。

用于液质联用分析的少量卵丘颗粒细胞蛋白提取方法的比较

本研究通过对比三种常用的蛋白提取裂解液,建立适合少量卵丘颗粒细胞液质联用分析的蛋白提取方法。收集的卵细胞质内精子注入术患者的卵丘颗粒细胞,分别采用SDT、UED、RIPA裂解液提取卵丘颗粒细胞总蛋白,通过蛋白浓度测定检测蛋白提取效率,SDS-PAGE检测蛋白提取质量,并对酶解后的蛋白进行单针液质联用分析其表达谱,进而对蛋白的检测效果进行评估。蛋白浓度检测表明RIPA裂解液提取的卵丘颗粒细胞蛋白得率较UED裂解液高,蛋白凝胶条带则最为清晰,条带数量最多。液质联用检测发现UED裂解液提取的蛋白鉴定效率最高,RIPA裂解液提取的蛋白质谱峰图质量最佳,通过对鉴定蛋白亚细胞定位分析,发现RIPA裂解液对于膜蛋白鉴定效率上有明显优势,而UED裂解液可能有利于细胞核蛋白的检测。该研究表明三种方法中UED提取法更适合卵丘颗粒细胞的液质联用分析,为临床少量卵丘颗粒细胞的蛋白提取与液质联用分析提供方法依据,并为其他不易获得的少量样本的蛋白质组学提供参考。

小鼠胚胎培养在新建胚胎实验室的质量控制研究

目的通过小鼠胚胎的生长情况,对新建体外受精(IVF)实验室的质量控制进行验证,为人类辅助生殖技术的开展提供理论依据。方法将体内受精与IVF方式得到的2细胞期胚胎放入不同培养箱中培养,观察胚胎生长情况。结果进行了15个周期的体内受精体外培养实验,共获得225个2细胞及以上胚胎,培养后形成囊胚204个囊胚,囊胚率为90.7%。进行了15个周期的体外受精实验,共获得315个卵母细胞。体外受精后集合培养,获得289个2细胞。培养后形成囊胚229个囊胚,囊胚率为79.3%。两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠卵母细胞体内受精和体外受精后均有高的成胚率,体内受精后进行体外培养优于体外受精后培养,鼠胚实验可对新建胚胎培养室的培养体系进行评估。

孕酮受体在人子宫内膜基质细胞蜕膜化过程中的作用机制研究现状

人子宫内膜基质细胞蜕膜化(hESCD),是人类胚胎植入和维持妊娠的关键环节。hESCD主要是指排卵后,子宫内膜在孕酮与孕酮受体(PGR)作用下,发生一系列生物学、形态学改变及细胞外基质重建。但是,对于孕酮-PGR信号通路在hESCD过程中的具体分子作用机制,迄今尚未阐明。笔者拟就PGR结构及其亚型,hESCD过程中孕酮-PGR信号通路的生理作用、网络调控,以及PGR水平及其功能异常与hESCD异常疾病关系4个方面的最新研究进展进行阐述。

精子端粒长度与胚胎发育潜能及妊娠率相关性的研究

目的研究体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET)患者精子端粒长度与早期胚胎发育潜能及临床妊娠结局的相关性。方法收集90例行IVF-ET患者的精子,利用QRT-PCR法检测患者的精子端粒长度,分别记录每组患者优胚率及临床妊娠率,探讨其相关性。结果非男性不育原因患者组精子端粒长度显著高于男性原因不育患者组(3.99±0.61 VS 2.75±0.76,P<0.05)。非男性原因不育组患者组优质胚胎率显著高于男性原因不育组患者组(59.7%VS 33.5%,P<0.05),但是卵裂率和临床妊娠率之间差异不显著(P>0.05)。结论精子端粒长度与早期胚胎发育潜能及临床妊娠率呈现相关性。