三氧化二砷诱导人膀胱癌T24细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人移行细胞膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的作用。方法用MTT法、TUNEL法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2O3诱导T24细胞凋亡的作用。结果As2O3可有效地抑制T24细胞增殖,随着药物浓度增高其抑制作用增强,且细胞出现典型的凋亡变化。DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条带。TUNEL法呈阳性结果。透射电镜下可见细胞核仁消失,染色质浓缩聚集于核膜下。对照组均未见上述变化。对凋亡相关基因Bcl-2免疫组化染色发现其表达下调,同时凋亡主要效应分子Caspase 3被激活。结论As2O3可有效诱导膀胱癌细胞凋亡,通过下调Bcl-2基因表达是其作用机制之一。

糖尿病肾病患者血清miR-192的表达及其对转化生长因子β信号通路的影响

目的检测糖尿病肾病（DN）患者血清中microRNA（miR）-192的表达，并探讨其在DN的作用机制。方法应用实时荧光定量PCR检测肾活检确诊的DN组、糖尿病无肾损害组和健康人群血清中miR-192的表达，以u6小RNA为内参，计算其相对表达量。同时检测肾组织miR-210表达。探讨miR-192作为DN特异性血清学指标的可能性。用生物信息分析方法分析可受miR-192调节的靶基因，并在体外过表达或下调miR-192表达以进一步研究。用不同浓度转化生长因子β1（TGF—β1）刺激肾小球系膜细胞，检测细胞和培养上清中miR-192含量。结果DN患者血清miR-192表达量显著低于健康对照（0．41±0．09比1．00±0．00，P〈0．01）。各组间miR-210表达差异无统计学意义。TGF—β信号通路下游基因抗锌指E盒结合蛋白1（ZEB-1）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和I型胶原（ColI）可被miR-192调节。不同浓度TGF-β1刺激均导致系膜细胞及培养上清miR-192含量显著下降。结论血清中miR-192可能通过调节TGF—β通路参与DN的发病。miR-192具有的特异性可能会成为DN潜在的诊断标志物。

酮缬氨酸钙与酮异亮氨酸钙对人肾系膜细胞增殖影响及机制研究

目的体外观察酮缬氨酸钙和酮异亮氨酸钙对人肾系膜细胞（HMC）的影响。方法10mM酮缬氨酸钙和酮异亮氨酸钙对HMC体外干预，检测干预后转化生长因子-β1（TGF-B1）和血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）的变化，并采用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和细胞周期。结果10mM酮缬氨酸钙和酮异亮氨酸钙干预HMC，实验组与对照组相比，TGF-β1含量增加；细胞AT1R表达亦有增加；同时细胞出现增殖抑制，细胞流式分析发现，实验组干预后出现了细胞周期G1期阻滞并观测到了细胞凋亡。结论10mM的酮缬氨酸钙和酮异亮氨酸钙可以增加AT1R在HMC的表达，诱导TGF-β1的表达增加；同时诱导细胞周期G1阻滞并伴随细胞凋亡。