蟛蜞菊内酯通过抑制AMPK/NLRP3/Caspase-1信号通路减轻脂多糖诱导的肺泡上皮细胞焦亡

目的探讨蟛蜞菊内酯(wedelactone,WEL)对脂多糖(lipolyaccharide,LPS)诱导的肺泡上皮细胞焦亡及腺苷酸活化蛋白激酶(adenylate activates protein kinase,AMPK)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)信号通路的影响。方法使用5~200μmol/L的WEL处理BEAS-2B细胞,MTT法检测细胞活性。将BEAS-2B细胞分为对照组、脂多糖组(LPS组)、10μmol/L蟛蜞菊内酯组(WEL-L组)、20μmol/L蟛蜞菊内酯组(WEL-M组)、40μmol/L蟛蜞菊内酯组(WEL-H组)、40μmol/L蟛蜞菊内酯+10μmol/L AMPK抑制剂Compound C组(WEL-H+Compound C组)、20μmol/L Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK组(Z-YVAD-FMK组)。透射电镜观察细胞超微结构,酶联免疫吸附试验检测炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-8水平。免疫荧光检测Caspase-1、Gasdermin家族蛋白(gasdermin family proteins,DGSDMD);Western blot检测AMPK、NLRP3、Caspase-1表达水平。结果选择浓度为10、20、40μmol/L的WEL进行后续实验。与对照组相比,LPS组细胞活性下降,损伤严重,细胞皱缩,线粒体嵴断裂且数量减少,TNF-α、IL-1β、IL-8水平及GSDMD、NLRP3、Caspase-1表达升高,p-AMPK/AMPK表达下降(P<0.05)。WEL处理可明显改善LPS诱导的肺泡上皮细胞焦亡(P<0.05)。Compound C可部分逆转WEL对LPS诱导的肺泡上皮细胞焦亡改善作用(P<0.05)。Z-YVAD-FMK处理同样可明显改善LPS诱导的肺泡上皮细胞焦亡(P<0.05)。结论WEL可以通过抑制AMPK/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞焦亡。