巢式PCR扩增恶性疟原虫DHFR基因直接测试序列的意义

目的巢式PCR方法扩增恶性疟原虫DHFR基因直接进行DNA序列测序。方法在巢式PCR程序中,设置2次退火(退火45℃45 s;退火65℃1 min),产生足量的DNA模板,进行其序列测试。结果共测试2组样本,dhfr基因序列全长218样本为647 bp,217样本为692 bp,其中218样本在170、193、341位点发生变异。结论该方法省时,节约材料,可满足现场快速调查恶性疟原虫耐药基因的要求。

癌栓病理分级对非转移性肾透明细胞癌伴静脉癌栓患者预后影响的多中心回顾性临床研究

目的探讨非转移性肾透明细胞癌(non-metastatic clear cell renal cell cancer,nm-ccRCC)合并静脉癌栓(venous tumor thrombus,VTT)时,VTT病理特征尤其是VTT病理核分级对患者预后的预测价值。方法回顾性分析来自中国2家医学中心(东部战区总医院、上海长海医院)于2010年1月—2021年12月收治的214例(中国队列)以及波兰2家医学中心(波兰格但斯克医学院、华沙医科大学)于2012年1月—2018年12月收治的82例(波兰队列)nm-ccRCC伴VTT患者的临床病理资料,其中中国队列男149例,女65例,平均年龄60.6岁;波兰队列男45例,女37例,平均年龄64.5岁。同时收集患者术后原发肿瘤(PT)和VTT病理切片进行重新评估,对于VTT组织进行包括WHO/ISUP核分级、是否存在坏死、肉瘤样/横纹肌样分化等评估。采用Kaplan-Meier方法绘制生存分析曲线,单因素和多因素Cox回归分析确定独立危险因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评估VTT核分级及其他因素预测预后的准确性。结果中国队列PT核分级Ⅱ级60例,Ⅲ级102例,Ⅳ级52例;VTT核分级Ⅰ级9例,Ⅱ级49例,Ⅲ级88例,Ⅳ级68例。波兰队列PT核分级Ⅱ级26例,Ⅲ级39例,Ⅳ级17例;VTT核分级Ⅱ级20例,Ⅲ级37例,Ⅳ级25例。2个队列患者中位总生存期(OS)分别为87个月和68个月;中位无病生存期(DFS)时间为58个月(波兰队列无DFS);中国队列5年总生存率为57.1%,5年中位无病生存率为47.4%;波兰队列5年总生存率为55.6%。Kaplan-Meier生存曲线表明PT、VTT核分级均能良好地区分患者生存情况,单因素分析结果中PT、VTT核分级均为预后危险因素,多因素分析结果表明PT核分级不再是独立危险因素,但VTT核分级仍有意义。ROC曲线进一步证实VTT核分级相较于PT核分级、Mayo分级和T分期具有更好的预测性。结论在nm-ccRCC伴VTT患者中,VTT核分级有助于预测预后,且预测准确性高于PT核分级。因其长期受忽视的现状以及对预后的重要性,将VTT核分级纳入病理报告来提供更多的预后相关信息,具有重要的临床意义。