EMMPRIN基因增强CT26小鼠结肠癌细胞的转移潜能

背景与目的:结肠癌的侵袭转移是临床上绝大多数结肠癌患者的致死因素,研究表明,细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)基因参与了肿瘤的转移过程。为研究EMMPRIN基因在结肠癌侵袭转移过程中的意义,本研究将初步探讨EMMPRIN基因对CT26小鼠结肠癌细胞转移潜能的影响。方法:构建包含EMMPRIN基因编码框的真核表达载体pCMV-HA2-EMMPRIN,通过质脂体转染CT26细胞,经G418筛选,建立稳定表达EMMPRIN基因的CT26细胞株。通过体外侵袭实验、迁移实验、粘附实验分析EMMPRIN在CT26中过表达及CT26细胞在侵袭、迁移、粘附等转移能力上的改变。结果:当EMMPRIN基因在CT26细胞稳定过表达后,侵袭实验的结果为EMMPRIN组:103.33±8.49个细胞,对照组:48.67±5.31个细胞(P<0.01);迁移实验的结果为EMMPRIN组:40.67±2.49个细胞,对照组:18.33±2.05个细胞(P<0.01);粘附实验的CCK-8检测结果为EMMPRIN组:2.10±0.22,对照组:3.33±0.17(P<0.01)。结论:EMMPRIN基因可明显促进小鼠结肠癌细胞CT26的侵袭与迁移,并抑制其粘附,提示EMMPRIN基因对CT26细胞的转移具有促进作用。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子基因对小鼠结肠癌细胞CT26侵袭的影响

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）基因对小鼠结肠癌细胞CT26侵袭的影响。方法构建包含EMMPRIN基因编码框的真核表达载体pCMV-HA2-EMMPRIN，通过脂质体转染CT26细胞，经G418筛选，建立稳定表达EMMPRIN基因的CT26细胞株。对照组为CT26小鼠结肠癌细胞，EMMPRIN组为转染EMMPRIN的小鼠结肠癌细胞。通过体外侵袭实验，分析EMMPRINCT26细胞侵袭力的改变。通过蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定及明胶酶谱实验分析过表达EMMPRIN，CT26细胞基质金属蛋白酶2（MMP-2）合成、分泌、激活的变化。结果当EMMPRIN基因在CT26细胞稳定过表达后，侵袭实验的结果为EMMPRIN组（98±5）个细胞，对照组（48±6）个细胞（P〈0．01）。蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定及明胶酶谱实验结果证实，EMMPRIN可明显促进CT26细胞MMP-2的分泌及激活，但对CT26细胞MMP-2的合成无影响。结论EMMPRIN基因可明显促进小鼠结肠癌细胞CT26的侵袭，并可明显促进CT26细胞MMP-2的分泌及激活。