新生大鼠心肌细胞分离、纯化及培养方法的改进

目的应用酶消化法消化心室肌组织,培养心肌细胞,探索获得高存活率和高纯度心肌细胞的培养条件,为生理学和药理学研究提供细胞模型。方法胰蛋白酶和胶原酶Ⅰ联合消化新生大鼠心室肌组织,控制消化时间和消化温度;用差速贴壁法和化学抑制法纯化心肌细胞进行体外培养。荧光显微镜观察心肌细胞形态学变化;流式细胞仪检测肌钙蛋白Ⅰ的表达;Fluo-3/AM进行细胞质内游离钙离子染色。结果培养的心肌细胞4 h后开始贴壁生长,24 h后有少数单个细胞出现自发性节律性搏动,之后连接成片,细胞簇同步收缩,细胞形态、结构完整;肌钙蛋白Ⅰ阳性率为91%;所有心肌细胞细胞质内钙离子染色阳性,荧光强度随细胞搏动呈强弱周期性变化。结论应用酶消化法可简单快捷地获得大量活力好、纯度高的心肌细胞,为心血管相关研究提供良好的实验模型。

红景天苷促进培养乳鼠心肌细胞肌质网钙离子的释放

目的:观察红景天苷对乳鼠心肌细胞胞浆Ca2+浓度的影响并分析其可能的作用机制。方法:应用荧光指示剂Fluo-3/AM负载培养大鼠乳鼠的心肌细胞,用激光共聚焦显微镜动态观察胞内游离钙荧光信号强度的变化,检测不同浓度红景天苷对培养心肌细胞胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。结果:红景天苷浓度为15 mg/L、30 mg/L和60 mg/L时,细胞内的平均[Ca2+]i升高,峰值分别为574.08±4.65、591.86±3.64和618.66±4.27(均P<0.01);有剂量依赖性而无时间依赖性。用维拉帕米阻断细胞膜外钙内流时,红景天苷同样引起细胞内[Ca2+]i升高,峰值由357.74±3.13、387.17±2.37和391.43±1.34分别上升到480.86±3.98、496.70±3.08和522.18±3.19(均P<0.01)。结论:红景天苷能升高乳鼠心肌细胞中[Ca2+]i,其机制可能与其促进肌浆网钙离子释放有关。

白花丹鲜茎与干茎中白花丹醌含量测定

采用水蒸气蒸馏法提取白花丹茎中的醌类化合物,并测定化合物中白花丹醌的含量。结果表明,白花丹鲜茎与干燥茎中白花丹醌的含量分别为0.0423%、0.0420%。

大青木药理作用的初步研究

本文报告了大青木醇提取液镇痛、抗炎作用的初步实验研究。结果表明本药对小鼠热板法致痛及扭体法致痛都有明显的镇痛作用。