Interleukin-18基因启动子区单核苷酸多态性与肝细胞癌遗传易感性关系的研究

目的探讨白细胞介素18(IL-18)基因启动子区-607C/A(rs1946518)和-137G/C(rs187238)单核苷酸多态性(SNP)与肝细胞癌(肝癌)遗传易感性的关系。方法应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)技术,检测228例肝癌患者和300例健康对照者IL-18基因启动子-607C/A(rs1946518)、-137G/C(rs187238)单核苷酸多态性位点基因型,分析肝癌患者和对照组基因型频率和等位基因频率分布。结果肝癌组SNP位点rs187238 G等位基因的频率明显高于对照组(OR=1.1891,95%CI=1.0106-1.5633,P=0.026)。携带rs187238 GG基因型的肝癌患者较多(OR=1.5168,95%CI=1.1490-1.8322,P=0.010)。分层分析发现,rs1946518位点上AA基因型与肝癌发病的关联在饮酒的肝癌患者中更加显著(P=0.024),而且rs187238位点上GC/CC基因型与肝癌发病的关联在出现肝癌复发的患者中更加显著(P=0.005)。结论 IL-18基因启动子区-137G/C(rs187238)GG基因型与肝癌遗传易感性有关联。而rs1946518位点AA基因型和rs187238位点GC/CC基因型分别与肝癌患者饮酒和肝癌复发有关联。

MHC Ⅱ类分子在肝细胞癌组织的细胞定位与术后复发关系的研究

目的研究MHCⅡ类分子在肝细胞癌(HCC)组织中的细胞定位,探讨MHCⅡ类分子在HCC组织中的表达与术后复发的关系。方法采用双重免疫组化方法对术后3年内复发和不复发HCC患者的原发瘤组织石蜡切片染色,随机选取视野检测MHCⅡ分子表达,然后统计分析。结果 MHCⅡ分子在术后3年内不复发HCC组织的表达高于1～3年内复发组织(38.5%vs 12.2%,P<0.05),MHCⅡ分子在HCC组织中主要表达在浸润的巨噬细胞、淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)等。MHCⅡ分子表达与HCC患者的性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤数目、有无包膜、门静脉癌栓、乙肝表面抗原、Edmonson分级等因素无明显相关(P>0.05)。结论 MHCⅡ分子与HCC的术后3年内是否复发风险密切相关,HCC组织中MHCⅡ分子高表达患者3年内不易复发。提示MHCⅡ分子可能可以作为HCC判断预后的分子指标之一。

1号染色体扩增区MEF2D基因在肝细胞癌组织中的表达

目的探讨1号染色体扩增区基因MEF2D mRNA在正常肝组织、肝癌细胞系及肝细胞癌(HCC)与癌旁组织中的表达并探讨其意义。方法利用逆转录聚合酶链反应方法对正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中MEF2D mRNA的表达情况进行初步分析。结果MEF2D mRNA在正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中均为高表达,其表达阳性率分别为100.0%(2/2)、92.3%(12/13)、95.0%(38/40)和97.5%(39/40)。MEF2D在各组的表达阳性率与-βactin相类似,差异无统计意义,均为P>0.05。结论染色体扩增区域常常存潜在的癌基因,由于染色体具有不稳定性,1号染色体扩增区MEF2D基因非HCC发生的癌基因,MEF2D mRNA高表达与HCC发生、发展无相关性。

RNA干扰对肝癌细胞株SMMC7721中STAT3基因表达的抑制作用

目的:研究小片段干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞系SMMC7721的化疗敏感性。方法:根据信号转录及转录活化因子3(STAT3)基因设计siRNA序列,通过经脂质体Lipo-fectamineTM2000以siRNA转染SMMC7721细胞。用实时定量PCR检测SMMC7721细胞中STAT3基因表达的抑制。将细胞以10μmol/L5-氟脲嘧啶(5-FU)作用后,用MTT比色法检测细胞生长的抑制率。结果:成功地构建针对STAT3基因的siRNA表达载体。实时定量PCR检测结果显示,SMMC7721细胞经特异性siRNA转染后,STAT3基因的表达受到抑制。RNA干扰(RNAi)能特异、有效地抑制SMMC7721细胞中STAT3基因的表达。MTT比色法检测结果显示,经siRNA作用后SMMC7721细胞抑制率明显增加。结论:设计合成的siRNA表达载体能有效抑制STAT3基因在肝癌细胞系SMMC7721中表达,增强其对化疗药物5-FU的敏感性,为肿瘤的生物学治疗提供了实验依据。

白细胞介素-18基因多态性与慢性乙型病毒性肝炎病毒感染关系的研究

目的探讨白介素-18（IL-18）基因启动子区-137G／C（rs187238）和-607C／A（rs1946518）单核苷酸多态性（SNP）与慢性乙型病毒性肝炎（乙肝）病毒感染之间的关系。方法选取2007年3月至2010年10月期间就诊于桂林市疾病预防控制中心和桂林医学院附属医院的慢性乙肝患者作为病例组，共264例；另外选取同期在上述两个单位进行体检，均无慢性乙肝病史的健康者作为对照组，共300例。采用序列特异性引物一聚合酶链反应技术（SSP—PCR），检测上述二组研究对象IL-18基因启动子-137G／C（rs187238）、-607C／A（rsl946518）单核苷酸多态性位点基因型，分析病例组和对照组基因型和等位基因频率分布。结果病例组IL-18基因多态性位点rs1946518的基因型和等位基因的频率与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。但是，病例组IL-18基因SNP位点rs187238G等位基因的频率高于对照组（OR=1．353，95％CI：1．009-1．815，P=0．043）。携带rs187238GG基因型的患者发生慢性乙肝的风险较高（OR=1．629，95％CI：1．152—2．305，P=0．006）。分层分析发现，rs187238位点上Gc基因型和C等位基因的频率与慢性乙肝的关联在乙肝e抗原（ttBeAg）阳性组的患者中更加显著（P=0．022，P=0．011）。结论IL-18基因启动子区-137G／C（rs187238）多态性与慢性乙肝易感性具有相关性，而且，rs187238位点上GC基因型和C等位基因的频率与HBeAg阳性的慢性乙肝患者具有相关性。