芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖与凋亡的影响及其机制探讨。方法分别采用0、15、30、60μmol/L的芒柄花黄素作用T739细胞后,CCK8法检测T739细胞的增殖情况,流式细胞术检测凋亡率的变化,Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡情况,Western blot检测GSK-3β、Axin、β-catenin蛋白含量变化。结果 15、30、60μmol/L的芒柄花黄素以浓度和时间依赖方式明显抑制T739细胞的增殖(P<0.05),且作用T739细胞48 h后凋亡率随药物剂量增加显著上升(P<0.05),呈浓度-效应关系。Hoechst33258染色显示T739细胞随药物浓度的升高,凋亡明显增多。Western blot法显示GSK-3β及Axin蛋白表达随药物浓度升高而增加(P<0.05),β-catenin蛋白水平则随药物浓度升高而降低(P<0.05),且均呈浓度-效应关系。结论芒柄花黄素对T739细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与芒柄花黄素上调GSK-3β、Axin蛋白表达和降低β-catenin蛋白水平有关。

芒柄花黄素对膀胱癌细胞凋亡作用及对β-catenin通路的影响

目的研究芒柄花黄素对膀胱癌细胞的凋亡作用及对β-catenin通路的影响。方法选择不同浓度(20、40、80μmol/L)的芒柄花黄素作用膀胱癌T24、EJ细胞,同时设对照组(芒柄花黄素浓度为0μmol/L),采用CCK8法检测两种细胞被各浓度药物处理0、24、48和72 h后的细胞增殖情况,采用流式细胞术检测两种细胞被各浓度药物处理48 h的细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法检测T24细胞被各浓度药物处理48 h后的细胞凋亡情况,RT-PCR检测T24细胞被各浓度药物处理48 h后β-catenin mRNA表达水平。结果 CCK8实验显示芒柄花黄素明显抑制膀胱癌T24、EJ细胞增殖,呈剂量和时间依赖性(P<0.05),并且药物对T24细胞的抑制增殖效果比EJ细胞高(P<0.05);流式细胞术显示T24细胞的对照组及20、40、80μmol/L芒柄花黄素组48 h后凋亡率分别为(1.75±0.71)%、(5.21±1.02)%、(17.78±1.67)%、(30.48±2.51)%,而EJ细胞凋亡率分别为(1.95±1.21)%、(4.84±1.35)%、(14.87±2.59)%、(21.84±2.64)%,与对照组比较,两种细胞的40、80μmol/L芒柄花黄素组凋亡率显著增高(P<0.05),并且芒柄花黄素对T24细胞的凋亡影响比对EJ细胞更明显(P<0.05);Hoechst33258染色显示T24细胞随药物浓度的升高,凋亡明显增多;RT-PCR结果显示T24细胞中β-catenin的mRNA表达水平随着药物浓度升高而降低(P<0.05)。结论芒柄花黄素能抑制膀胱癌T24细胞和EJ细胞增殖、诱导其凋亡,其机制可能与抑制β-catenin通路有关。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞TNIP1的表达水平与主要临床指标的相关性分析

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血中CD14^(+)单核细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、调节性T细胞(regulator T cell,Treg)中肿瘤坏死因子诱导蛋白3相互作用蛋白1(tumor necrosis factor alpha-induced protein 3-interacting protein 1,TNIP1)的表达与类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、抗环瓜氨酸肽(cyclic citrulline peptide,CCP)抗体等主要临床指标的相关性。方法选取桂林医学院附属医院62例RA患者和39例健康体检者(health donor,HD),RA患者住院期间(HD于同期)抽取外周静脉血。采用流式细胞术检测HD和RA患者外周血中CD14^(+)单核细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg细胞TNIP1表达水平并转换为Z-score,并对比HD和RA患者TNIP1 Z-score;分析RA患者TNIP1 Z-score与RF、抗CCP抗体等主要临床指标的相关性。结果RA患者外周血中CD14^(+)单核细胞TNIP1表达水平与健康体检者差异无统计学意义,CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg细胞TNIP1表达水平显著高于健康体检者(P<0.05);RA患者CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg细胞TNIP1表达水平与RF呈正相关(P<0.01、P<0.01、P<0.05);RA患者CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞TNIP1 Z-score与RF呈正向线性相关(P<0.01)。结论RA患者TNIP1的高表达可能增强CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞促炎的能力,而抑制CD4^(+)Foxp3^(+)Treg细胞抑炎的能力,RA患者TNIP1高表达可能促进病程的发展。