白花丹素对人舌癌Tca细胞增殖及凋亡作用的探讨

目的探讨白花丹抑制舌癌细胞Tca的增殖及对细胞凋亡的影响。方法将舌癌细胞Tca按5×103个/孔的浓度接种于96孔细胞培养板,置于37℃,5%CO2的培养箱中预培养24 h,待细胞80%长满孔底,24 h后将白花丹分别按0.025,0.1,0.2,0.3 mg/ml和0.4 mg/ml分别加入各培养组中,每组5复孔。置37℃、5%CO2培养箱中培养。分别培养48,72,96,120 h后,用酶标仪在490 nm下,MTT染色法测定细胞增殖情况,计算白花丹对肿瘤细胞的抑制率。同时,Hoe-chest33342荧光染色法测定细胞核变化情况,观察细胞凋亡的形态学变化情况。结果随着白花丹浓度的增大和作用时间的延长,白花丹对人舌癌细胞增殖的抑制作用越明显。当药物浓度达0.4 mg/ml时,培养48 h时与其他各组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01),当药物浓度在0.3 mg/ml细胞培养达96 h时,与小于0.3 mg/ml和小于96 h培养时间的其他各组比较均有显著性差异(P<0.05),说明此点是白花丹有效成分抑制肿瘤细胞的一个关键点。细胞培养72 h后Hoechst33342染色发现,随着药物浓度的不断增加,凋亡细胞的数量越来越多。当药物浓度达到0.4 mg/ml时,镜下几乎很少见到完整的细胞核出现,相反出现了大量的细胞和碎片和不完整的细胞核。结论白花丹提取物可以有效抑制肿瘤细胞增长,导致肿瘤细胞大量地细胞凋亡,说明其在肿瘤治疗中具有很大的应用价值。

常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞VEGF表达的影响

目的探讨常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将肝癌Hep1细胞用不同浓度的姜黄素(终浓度分别为0,5,10,15,20μmol/L)处理,置于常氧环境中培养24 h。RT-PCR检测Hep1细胞中VEGF mRNA表达水平的变化,W estern-b lot检测Hep1细胞VEGF蛋白表达的变化。结果 姜黄素10,15,20μmol/L组VEGF mRNA的表达与空白对照组相比均明显升高(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性。姜黄素0,5μmol/L组VEGF mRNA的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05);姜黄素5,10,15,20μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组相比均明显升高(P<0.01),且呈浓度依赖性。姜黄素0μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 常氧条件下,姜黄素呈浓度依赖性方式上调肝癌Hep1细胞VEGF的表达。