AtGRIP蛋白在拟南芥根冠细胞高尔基体反面网络分泌囊泡的定位

动物与真菌细胞的GRIP蛋白定位于高尔基体反面网络,并对高尔基体的结构与功能有重要作用.通过RT-PCR方法从拟南芥植株RNA中扩增得到AtGRIP的cDNA;利用原核表达和亲和层析的方法,获得AtGRIP部分片段的GST融合蛋白,进而得到相应蛋白的多克隆抗体.利用纯化的AtGRIP抗体进行免疫印迹,确认拟南芥AtGRIP蛋白的分子量为92kD,并发现其在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;免疫荧光标记AtGRIP和Nag-GFP的共定位说明,AtGRIP蛋白分布于拟南芥细胞高尔基体;免疫金标结合电子显微镜观察发现,AtGRIP蛋白主要定位于拟南芥根冠细胞高尔基体反面网络的囊泡膜.以上结果说明,动植物细胞间GRIP蛋白在高尔基体上的定位是保守的;同时也说明AtGRIP蛋白可能参与了对植物细胞高尔基体反面网络结构与功能的调控。