榆林市绵羊肺腺瘤病流行病学调查

绵羊肺腺瘤病是一种慢性、进行性、接触性传染的肺脏肿瘤性疾病,为全面了解绵羊肺腺瘤病在陕西省榆林市的流行情况,在榆林市6个县区的规模化舍饲、散养户放牧、半放牧等羊场随机采集鼻拭子,采用PCR技术进行绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)检测。从检测结果为阳性的样品cDNA中克隆绵羊肺腺瘤病毒的gag全长序列并测序。结果显示,榆林市绵羊肺腺瘤病毒的总阳性率为35.19%,其中吴堡县的阳性率最低(0),榆阳区、定边县、绥德县和米脂县的阳性率均高于35.00%。研究发现2个规模化绵羊场的绵羊肺腺瘤病毒阳性率超过37.18%,散养户的58只绵羊的阳性率为20.69%。检测样品中山羊、湖羊、澳洲白羊和多品种混养绵羊JSRV的阳性率分别是16.00%、39.84%、35.55%和4.55%。克隆获得了大小约1836 bp的gag基因条带,与预期结果一致,将测序结果与GenBank中的参考序列KY041630进行比对,同源性为92%,进一步证实该病毒为绵羊肺腺瘤病毒。通过流行病学调查掌握了榆林市绵羊肺腺瘤病的流行情况,证实了榆林市各区县的羊群中已有绵羊肺腺瘤病的感染,且不同饲养方式、不同品种绵羊群的阳性率存在差异,可为该市的疫病防控提供科学数据。

精氨酸支原体榆林株的分离鉴定

无菌采集榆林某湖羊场发生肺炎的羔羊肺组织,经抹片革兰氏染色镜检,PCR检测后进行分离培养、菌体形态和菌落形态等鉴定,并通过PCR检测及测序等对分离物进行菌株鉴定。结果表明,分离物革兰氏染色阴性,菌体呈多形性,在PPLO固体培养基上形成具有“中心脐”的典型煎蛋样菌落;PCR种属鉴定结果显示支原体目和精氨酸支原体引物扩增产物与预期一致,且精氨酸支原体引物扩增产物测序结果与Genebank中精氨酸支原体的序列相似性为100%。研究结果明确了精氨酸支原体能够引起绵羊支原体肺炎,其将为该病的防治和研究提供病原学基础。

犬腺病毒2型载体及其应用的研究进展

犬腺病毒2型也称犬传染性喉气管炎病毒,可诱导宿主产生细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫。将外源基因插入犬腺病毒2型早期转录区后可诱导宿主产生低水平的先天免疫,且能够在宿主体内安全、持续、稳定地表达外源基因,为基因转移提供了条件。犬腺病毒2型载体具有安全性和稳定性高、抗原表达能力强、易于进行各种遗传改造操作和携带大片段的外源基因等特点,是目前作为动物疫苗与基因治疗最有发展前景的非人类腺病毒载体之一。犬腺病毒2型载体已经广泛应用于动物疫苗研制、基因治疗等多个生物医学领域。笔者就犬腺病毒2型的分子生物学特性及犬腺病毒2型载体的发展、构建方式及在动物疫苗研制和基因治疗中的应用进行综述,旨在进一步挖掘犬腺病毒2型载体在基因治疗、动物疫苗研制中的作用,以及为下一代犬腺病毒2型载体平台的建设提供理论基础。

基于猪圆环病毒2型病毒样颗粒的间接ELISA抗体检测方法的建立

为了建立一种更加安全、可靠的猪圆环病毒2型(PCV2)抗体检测方法,以实验室前期通过大肠杆菌表达系统获取的PCV2病毒样颗粒(VLPs)为包被抗原,建立了一种间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法检测272份来自不同猪场的血清,并与不同间接ELISA试剂盒的检测结果进行比较。结果表明,基于PCV2 VLPs的间接ELISA的特异性和敏感性分别为100.00%和91.67%。其与Ceditest CIRC Ig G ELISA试剂盒(Cedi-Diagnostics B.V.)和猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒(科前)的符合率分别为97.56%和95.12%。因此,基于PCV2 VLPs的间接ELISA可以有效地用于猪血清样本中PCV2抗体的检测,为PCV2的流行病学调查及PCV2 VLPs疫苗的免疫效果评价提供了新的选择。