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置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究
1
作者
陈荣
曹统
+7 位作者
叶超锋
翁一帆
贾德凯
许翰坤
毛俊勇
韩笑
李肖梁
方维焕
《动物医学进展》
北大核心
2024年第12期1-8,共8页
猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关。为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克...
猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关。为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克隆质粒pA-C和pA-QZ14为基础,扩增pA-C的UTR区和pA-QZ14除UTR以外的基因组序列,利用同源重组技术构建重组质粒pA-QZ14-CUTR;将体外转录的病毒基因组RNA转染PK-15细胞,连续传代以拯救嵌合病毒株QZ14-CUTR;将其接种PK-15细胞,通过免疫荧光和测序鉴定以确定拯救是否成功;RT-qPCR和毒价滴定法测定病毒生长趋势,分析其细胞适应性;将嵌合病毒以1×10^(5)TCID 50剂量肌肉接种试验猪以观察其致病性。结果表明,QZ14-CUTR拯救成功,基因组中稳定携带C株UTR序列;生长曲线显示,QZ14-CUTR病毒基因组拷贝数和滴度均低于亲本毒株QZ14;相较于QZ14株,QZ14-CUTR仅引起猪轻微的临床症状,不显著影响猪白细胞和淋巴细胞数;病理变化程度、排毒阳性率和组织中的病毒核酸阳性率均低于QZ14株;QZ14-CUTR能诱导特异性CSFV E2抗体,且抗体水平持续上升。综上所述,CSFV流行毒株QZ14的UTR被弱毒C株UTR置换后,其在PK-15细胞中的复制能力有所下降,对猪的致病力降低。
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关键词
猪瘟病毒
感染性克隆
致病性
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题名
置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究
1
作者
陈荣
曹统
叶超锋
翁一帆
贾德凯
许翰坤
毛俊勇
韩笑
李肖梁
方维焕
机构
浙江大学动物预防医学研究所
正大集团
正大
猪
业
(
余姚
)
有限公司
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第12期1-8,共8页
基金
浙江省重点研发计划项目(2021C0251)。
文摘
猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关。为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克隆质粒pA-C和pA-QZ14为基础,扩增pA-C的UTR区和pA-QZ14除UTR以外的基因组序列,利用同源重组技术构建重组质粒pA-QZ14-CUTR;将体外转录的病毒基因组RNA转染PK-15细胞,连续传代以拯救嵌合病毒株QZ14-CUTR;将其接种PK-15细胞,通过免疫荧光和测序鉴定以确定拯救是否成功;RT-qPCR和毒价滴定法测定病毒生长趋势,分析其细胞适应性;将嵌合病毒以1×10^(5)TCID 50剂量肌肉接种试验猪以观察其致病性。结果表明,QZ14-CUTR拯救成功,基因组中稳定携带C株UTR序列;生长曲线显示,QZ14-CUTR病毒基因组拷贝数和滴度均低于亲本毒株QZ14;相较于QZ14株,QZ14-CUTR仅引起猪轻微的临床症状,不显著影响猪白细胞和淋巴细胞数;病理变化程度、排毒阳性率和组织中的病毒核酸阳性率均低于QZ14株;QZ14-CUTR能诱导特异性CSFV E2抗体,且抗体水平持续上升。综上所述,CSFV流行毒株QZ14的UTR被弱毒C株UTR置换后,其在PK-15细胞中的复制能力有所下降,对猪的致病力降低。
关键词
猪瘟病毒
感染性克隆
致病性
Keywords
Classical swine fever virus
infectious clone
pathogenicity
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
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1
置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究
陈荣
曹统
叶超锋
翁一帆
贾德凯
许翰坤
毛俊勇
韩笑
李肖梁
方维焕
《动物医学进展》
北大核心
2024
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