秋水仙碱通过阻滞TGF-β1/Smads通路抑制胰腺星状细胞生物学行为的研究

目的:观察秋水仙碱对TGF-β1诱导的胰腺星状细胞增殖、凋亡活性的影响,探讨秋水仙素对抗慢性胰腺炎纤维化的可能分子机制。方法:实验分对照组和实验组,对照组不加秋水仙碱,实验组根据情况加入秋水仙碱和/或TGF-β1。实验组利用秋水仙碱干预TGF-β1诱导胰腺星状细胞,MTT法检测细胞增殖能力,免疫荧光法检测胰腺星状细胞活化状态,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡情况,RT-PCR和Westernblot检测Tβ1R、Smads表达变化。结果:与对照组相比,TGF-β1可诱导胰腺星状细胞增殖(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05);而秋水仙碱作用24h后胰腺星状细增殖明显减低(P<0.05),凋亡明显增加(P<0.05);抑制细胞的增长呈剂量依赖性。RT-PCR和Western blot检测显示秋水仙碱成功阻断TGF-β1/Smads通路的活化。结论:秋水仙碱抑制TGF-β1诱导的胰腺星状细胞增殖,促使胰腺星状细胞凋亡,其机制可能与抑制TGF-β1/Smads通路的活化有关。

姜黄素通过调控上皮间质转化抑制乳腺癌侵袭转移的体外研究

目的:探讨上皮间质转化(EMT)是否参与姜黄素抑制乳腺癌细胞侵袭转移过程。方法:利用不同浓度姜黄素干预脂多糖(LPS)诱导的乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测细胞增殖能力,普通光学显微镜及透射电子显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR和Western blot方法分别检测vimentin,E-cadherin表达变化。结果:姜黄素可抑制LPS诱导的乳腺癌细胞MCF-7 EMT的发生,降低LPS诱导的EMT标志物vimentin蛋白的表达,增强E-cadherin的表达,最终导致乳腺癌细胞运动及侵袭能力的降低。结论:姜黄素可以抑制肿瘤细胞侵袭能力,提示EMT程序参与其中,具体分子机制仍需进一步研究。

lncRNA Xist/miR-215-5p下调LPAR4表达对乳腺癌细胞增殖与转移的影响

目的:探讨溶血磷脂酸受体4(LPAR4)在乳腺癌组织中的表达水平及与乳腺癌发生发展的关系,探究lncRNA Xist/miR-215-5p对LPAR4的调控作用。方法:通过Targetscan和Starbase预测LPAR4的上游通路lncRNA Xist/miR-215-5p。使用慢病毒转染LPAR4和miR-215-5p;使用质粒转染lncRNA Xist。在MDA-MB-231细胞系中,通过MTT和划痕实验检测细胞的增殖和转移能力。结果:LPAR4在乳腺癌细胞系中高表达,miR-215-5p和lncRNA Xist为低表达。Western blot显示LPAR4在乳腺癌细胞系中高表达。MTT和划痕实验提示上调LPAR4可以促进MDA-MB-231细胞的增殖和转移能力。进一步实验发现lncRNA Xist可以上调miR-215-5p,并且负性调控LPAR4;且lncRNA Xist可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力。除此之外,在lncRNA Xist下调细胞中,上调miR-215-5p可以抑制lncRNA Xist下调介导的细胞增殖能力增强。结论:lncRNA Xist/miR-215-5p可能通过调控LPAR4的表达,为治疗乳腺癌提供可能的新靶点。LPAR4在乳腺癌细胞中高表达,可能成为乳腺癌潜在的肿瘤标志物。