下颌支矢状劈开术与下颌管位置关系的应用解剖学研究

目的 :研究下颌管在下颌骨内的重要行径和位置关系。方法 :选用带软组织 5 0具完整的头颈标本 ,分别在下颌第三磨牙后缘的垂直线、磨牙后三角尖至下颌角连线呈额状位锯开下颌骨 ,观察下颌管的解剖。结果 :下颌管是下颌骨的骨松质内形成较薄的骨密质骨管。下颌管在下颌骨第三磨牙后缘切面的位置靠内侧型占 90 % ,中间型占 10 % ;在连线切面的位置靠内侧型占 84% ,中间型占 16 %。结论 :了解下颌管在下颌骨内的重要毗邻关系 ,可以减少因下牙槽神经损伤造成口裂以下粘膜和皮肤的感觉障碍。

锁骨下静脉的应用解剖学研究

为给锁骨下静脉穿刺置管提供应用资料 ,对 50具尸体上的观测数据进行了研究分析。结果显示 ,锁骨下静脉进针部位应于锁骨内中 1 /3交点处进针 ,深度以不超过 3cm为宜。

TUNEL法原位检测凋亡细胞的某些改进

目的 :探索避免TUNEL法检测凋亡细胞出现的假阳性和消除非特异性反应的方法。方法 :脑和心肌组织石蜡切片 ,改进的TUNEL染色。选用多聚甲醛固定 ,蛋白酶K修复抗原 ,将H2 O2 封闭内源性过氧化物酶放在反应液标记DNA片段之后 ,先后用小牛血清或羊血清两次封闭非特异性反应。结果 :证实本实验方法避免了假阳性 ,背底十分清亮。结论

小鼠胚胎神经干细胞的分离培养及其鉴定

目的 探索小鼠胚胎神经干细胞的体外培养方法 ,并获取高纯度的神经干细胞 ,为神经干细胞的深入研究提供实验材料。方法 无菌条件下分离E15天小鼠胚脑皮质 ,制成单细胞悬液 ,在bFGF和B2 7存在的培养基中培养扩增 ,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果 培养的部分细胞在B2 7和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤出B2 7和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和胶质细胞分化。结论 小鼠胚脑皮质存在具有多向分化潜能的神经干细胞 ,这些细胞可以在体外稳定培养、传代并自然分化 ,为细胞替代治疗提供了理想的细胞来源。

混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的影响

目的 研究神经干细胞(NSCs)与骨髓基质细胞(BMSCs)混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的 影响。 方法 将BMSCs传代培养2d,10μg LbFGF预诱导过夜,DAPI标记后加入到已贴壁分化2d的NSCs中,神 经元培养基混合培养7d后进行神经元特异性烯醇化酶(Nse)染色。对照组于BMSCs传代2d后,一组加bFGF处理 过夜,另一组不加,神经元培养基培养7d后NSE染色。 结果 实验组中部分BMSCs呈NSE染色强阳性,比例为 (13.38±5.79)%,对照组呈NSE阴性 结论 NSCs与BMSCs混合培养可诱导BMSCs转分化为神经元。

腺苷预处理培养大鼠心肌细胞后酶活性变化和超微结构观察

目的 :应用组化方法和透射电镜 ,观察腺苷预处理培养大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性细胞超微结构的变化。方法 :取SD大鼠乳鼠心室肌细胞在无菌状态下 ,用DMEM常规培养 5天后分四组 :正常对照组、拟缺血再灌注组、拟缺血预处理组、腺苷预处理组 ,用组化方法检测心肌酶活性 ;以透射电镜观察细胞形态结构变化。结果 :在缺血预处理组和腺苷预处理组琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性均高于拟缺血再灌注组 ,且细胞结构保存良好 ;缺血预处理组、腺苷预处理组与正常对照组无显著性差异。结论

大鼠急性心肌缺血再灌注的心肌细胞凋亡研究

目的 为证实急性心肌缺血再灌注过程中存在着不同程度的心肌细胞凋亡现象 ,初步研究心肌细胞凋亡与Bcl 2 /Bax蛋白表达的关系。 方法 透射电镜观察心肌细胞的超微结构变化 ,抽提心肌组织DNA琼脂糖凝胶电泳 ,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞 ,免疫组织化学技术和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl 2 /Bax蛋白表达。 结果 缺血及再灌注组电镜观察心肌细胞出现典型凋亡超微结构特征 ,TUNEL染色可见不同程度的心肌细胞凋亡阳性反应 ,DNA电泳显示在缺血再灌注 2h出现明显的DNA条纹图像 ,再灌注组较缺血组心肌细胞中Bcl 2表达明显降低 (P <0 0 5 ) ,而Bax表达显著增高 (P <0 0 1)。 结论 急性心肌缺血及再灌注能诱导不同程度的心肌细胞凋亡 ,Bcl 2

去甲肾上腺素预处理培养乳鼠心肌细胞丙二醛含量和细胞色素氧化酶活性观察

目的 :对比观察去甲肾上腺素进行预处理 (norepinephrinepreconditioningNEPC)与经典缺血预处理 (is chemiapreconditioning ,IPC)对培养的乳鼠心肌细胞缺血 /再灌注损伤的影响 ,以探讨去甲肾上腺素预处理效应。方法 :应用培养的乳鼠心肌细胞缺血 /再灌注模型 ,将培养 5d的乳鼠心肌细胞随机分为 4组 :①正常对照组 ,②拟缺血再灌注组 (I/R) ,③缺血预处理组 (IPC) ,④去甲肾上腺素预处理组 (NEPC)。并分别进行细胞色素氧化酶 (CCO)活性测定和心肌细胞培养液中丙二醛 (MDA)测定。结果 :I/R组CCO酶活性降低 ,培养液中MDA含量增加 ,而IPC组和NEPC组CCO酶活性增高 ,MDA含量减少 ,均接近正常。结论

心房肽mRNA在大鼠脑室脉络丛的表达

目的 :研究大鼠脑室脉络丛细胞内是否存在ANPmRNA的基因表达。方法 :原位杂交技术。结果 :脉络丛细胞及侧脑室和第三脑室室管膜上皮细胞内呈现ANP阳性反应产物。结论 :证明在脑室脉络丛细胞及室管膜上皮细胞内存在ANPmRNA的表达。本实验结果为脉络丛产生分泌ANP提供了形态学依据 ;

小鼠胚胎中脑区神经干细胞体外分离培养的特征

目的:在已成功分离培养皮质神经干细胞的基础上,体外分离培养鼠胚中脑区的神经干细胞,并进行鉴定,为中脑神经干细胞的基础与应用研究建立细胞培养平台。方法:实验于2005-11/2006-07在武汉工业学院完成。①选取孕12～13d昆明小鼠1只,处死后无菌条件下分离胚胎腹侧中脑,胰酶消化和机械吹打制成单细胞悬液,在碱性成纤维生长因子和B27存在的无血清培养基中培养扩增,机械分离法传代,观察细胞生长状况。②将传至第2代的神经球以20～30个/cm2接种于置有预先经左旋多聚赖氨酸包被盖玻片的24孔培养板中,加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM/F12(不加任何生长因子)诱导分化。③采用免疫细胞化学染色方法鉴定神经干细胞及其传代细胞的分化方向。结果:①孕12～13d的鼠胚中脑细胞体外培养36h后,可见2～5个细胞的团块;48h后有明显球状团块产生,胞间界限不很清楚,出现神经细胞球;培养6d后传代,少部分单细胞于传代2d后出现分裂相,随后渐形成细胞团及神经球,生长性状基本同原代。②将培养的神经细胞球转入有血清培养时,约1周球体可完全分化为神经细胞和胶质细胞。免疫荧光染色显示神经球细胞表达巢蛋白,且神经元特异性烯醇化酶染色和胶质纤维酸性蛋白染色均呈阳性。结论:孕12～13d鼠胚胎腹侧中脑区存在神经干细胞,这些细胞在B27和碱性成纤维生长因子存在的无血清培养基中能够成功的在体外培养和传代。

雌激素受体在大鼠血管平滑肌细胞中的表达及其调控

目的 :观察血管平滑肌细胞 (VSMC)中雌激素受体 (ER)的表达 ,研究雌激素和血清 (含多种生长因子 )对细胞中ER表达的影响。方法 :原位杂交和RT PCR检测大鼠主动脉中层VSMC中的ERmRNA。分别在有或无他莫昔芬 (TAM) (ER拮抗剂 )预处理的情况下 ,免疫细胞化学观察VSMC中的ER蛋白 ,比较雌二醇 (E2 )以及新生小牛血清 (NCS)对VSMC中ER表达的影响。结果 :VSMC中存在ERmRNA和蛋白 ,E2 以及NCS均能上调细胞中ER的表达 ,TAM能阻断其效应。结论 :ER是雌激素作用于VSMC的靶基因之一。

鸡胚发育过程中端脑神经元凋亡的分布

目的 :研究鸡胚发育过程中端脑神经细胞凋亡的时空分布。方法 :采用硫堇染色、TUNEL法染色观察凋亡神经细胞的分布。透射电镜技术观察细胞的超微结构的变化。结果 :鸡胚第 5d、第 6d时可见少量凋亡细胞 ,随着鸡胚的发育 ,凋亡细胞渐渐增多。鸡胚第 7d时 ,凋亡细胞数达到高峰 ,随后数量渐渐减少。鸡胚第 1 2d时 ,几乎不见凋亡细胞。凋亡细胞主要分布于嘴段背侧和两侧脑室之间的组织等部位。透射电镜观察到凋亡细胞的超微结构的改变。结论 :鸡胚神经系统发育中选择性发生神经元凋亡 ,凋亡细胞的分布呈现一定的时空规律。

大鼠降主动脉雌激素受体的免疫组织化学研究

冰冻切片微波修复后 ,用 ER单克隆抗体免疫组织化学 SP法及图像分析方法 ,观察雌激素受体 (ER)在雌性与雄性大鼠降主动脉壁的分布。结果显示 ,ER阳性反应存在于血管壁的内皮细胞与平滑肌细胞中。阳性反应强度无性别差异 ,无段间差异 (降主动脉胸段与腹段 )。血管周围的脂肪组织也可见大量呈阳性反应的细胞。结果表明 ,降主动脉壁的内皮细胞、血管平滑肌细胞中存在 ER。

线栓法大脑中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注鼠模型的脑水肿和脑梗死比的变化

目的:探讨短暂性右侧大脑中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注模型的脑梗死比和脑水肿的变化。方法:线栓法制作大鼠脑缺血/再灌注不同时间点模型,行TTC染色测量脑梗死比及干湿称重法测量脑含水量。结果:脑缺血再灌注6h时大鼠脑组织即有含水量的增加,并随着时间的推移呈上升趋势,且未损伤侧中段脑组织含水量升高最为显著。TTC染色在缺血再灌注6h即可见白色梗死灶,梗死比在再灌注72h内逐渐增加。结论:局灶性脑缺血再灌注72h内脑梗死比和脑水肿均呈进行性加重。

心肌细胞的凋亡及其调控基因在Ⅱ型糖尿病大鼠中的变化

利用 STZ诱导的 NIDDM大鼠模型 ,探讨了 NIDDM大鼠心肌细胞是否出现凋亡及其调控基因 Bax、Bcl-2表达的变化。

心肌缺血再灌注损伤HSP70表达与细胞凋亡动态观察及相关性研究

用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型 ,用免疫组织化学方法检测 HSP70表达 ,用TUNEL 技术检测心肌细胞凋亡。结果显示 ,在急性心肌缺血再灌注损伤过程中 ,HSP70和细胞凋亡均呈现明显地动态性表达并有着明显的相关性 ;HSP70的代偿性增加可能抑制细胞凋亡的发生 ;细胞凋亡的发生可能是诱发 HSP70表达的一个重要机制。

IL-1β诱导中脑神经干细胞向多巴胺能神经元分化的研究

在胚鼠中脑曲分离神经干细胞 ,研究 IL-1β对中脑神经干细胞诱导分化为多巴胺神经元的效能 ,运用体外分离、培养小鼠胚胎中的中脑神经经干细胞 ,加入 IL -1β诱导其分化 ,通过巢蛋白 ( Nestin)、神经元特异性烯醇化酶 ( NSE)、胶质纤维酸性蛋白( GFAP)、酪氨酸羟化酶 ( TH)免疫组化鉴定。结果显示 ,小鼠胚胎的腹侧中脑曲部位分离获得了大量未分化、呈球状悬浮生长的细胞 ,且能在有血清的培养基中分化为神经元和神经胶质细胞。经 IL-1β诱导后 ,多巴胺能神经元分化比例达 16%左右。

多媒体在护理教学中的应用

为了让学生更好掌握护理知识 ,将计算机多媒体技术应用于教学中 ,使抽象的理论内容转变为直观的、生动的画面 ,提高学生理解教学目标的水平 ,实现以教师为主体的教学方式向以教师为主导、学生为主体的新型教学体系的转变。

雌激素对血管平滑肌细胞中c-fos和增殖细胞核抗原表达的影响

目的 :研究并比较雌激素和 /或血清对血管平滑肌细胞 (VSMC)中c fos和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响。方法 :分别在有或无他莫昔芬 (TAM) (雌激素受体ER拮抗剂 )预处理的情况下 ,采用免疫细胞化学和图像分析方法 ,研究雌二醇 (E2 )和 /或新生小牛血清 (NCS)对传代大鼠VSMC中的c fos和PCNA蛋白表达的影响。结果 :E2 以及NCS均能上调细胞中c fos和PCNA蛋白的表达 ,TAM能阻断其效应。结论 :雌激素能促进传代VSMC增生 。

心脏硫酸腺嘌呤预处理大鼠心肌微循环及胶原纤维的变化

目的:观察经典缺血预处理及硫酸腺嘌呤预处理大鼠心肌微循环及心肌间质胶原纤维的变化并探讨其意义。方法:大鼠分假手术组(S)、缺血再灌注组(I/R)、经典缺血预处理组(IPC)、硫酸腺嘌呤预处理组(ASP),通过电镜二维图像立体计量法,测量心肌毛细血管横截面积,并观察间质胶原纤维的变化。结果:S组、IPC组与ASP组心肌毛细血管的横截面积显著大于I/R组。与I/R组相比较,IPC、ASP组心脏胶原纤维明显增加。结论:心脏经典缺血预处理与硫酸腺嘌呤预处理均能明显扩张心肌间质中血管及促进心脏胶原明显增多。