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基于ISET技术的晚期胃癌循环肿瘤细胞检测及其临床意义 被引量:6
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作者 吴源娜 沈洁 +5 位作者 杨艳 禹立霞 魏嘉 邹征云 黄劭毅 刘宝瑞 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第10期1568-1571,共4页
目的:观察基于ISET分离技术的胃癌晚期患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的检出情况,探索其与患者临床特征的关系。方法:采用KATOⅢ细胞株进行ISET技术回收率及敏感性测试实验。选取2014年10月至2015年7月在南京大学医学院附属南京鼓楼医院... 目的:观察基于ISET分离技术的胃癌晚期患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的检出情况,探索其与患者临床特征的关系。方法:采用KATOⅢ细胞株进行ISET技术回收率及敏感性测试实验。选取2014年10月至2015年7月在南京大学医学院附属南京鼓楼医院肿瘤科经病理证实的34例胃癌Ⅳ期患者为研究对象,并与15例健康体检者作对照;采集受试者2.5ml静脉血,经CTCBIOPSY异常细胞分离染色仪检测其CTCs阳性率,并分析CTCs与患者临床特征的关系。结果:ISET分离技术的回收率平均值为85.5%,其敏感性为1个/2.5ml。胃癌组CTCs阳性率为23.5%(8/34),对照组均未检出CTCs。CTCs≥4个组与CTCs=0个组AFP、CA199、CA242平均数分别为:6 484.3 vs 102.9ng/ml、4 595.5 vs 683.8U/ml、23 332.1 vs 806.0U/ml,2组比较差异有统计学意义(P=0.021,0.049,0.020)。结论:基于ISET法的CTCs捕获技术具有较高的检出率。胃癌晚期患者外周血CTCs阳性率与患者临床特征具有相关关系。 展开更多
关键词 晚期胃癌 循环肿瘤细胞 ISET
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CYP2C19基因多态性检测方法的建立 被引量:5
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作者 黄杰 于婷 +3 位作者 张喆 蔡从利 高尚先 曲守方 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1562-1567,共6页
目的:建立检测CYP2C19基因多态性的PCR-荧光探针法,为预测CYP2C19代谢药物的疗效提供新的检测试剂盒。方法:应用Primer Express 3.0软件针对人类CYP2C19基因CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17多态性位点设计引物和探针。以经测序确认为... 目的:建立检测CYP2C19基因多态性的PCR-荧光探针法,为预测CYP2C19代谢药物的疗效提供新的检测试剂盒。方法:应用Primer Express 3.0软件针对人类CYP2C19基因CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17多态性位点设计引物和探针。以经测序确认为杂合突变型、纯合突变型或野生型的人类全血基因组DNA(genomic DNA,g DNA)样本为模板,应用荧光PCR法筛选合适的引物和探针,建立和优化CYP2C19基因多态性检测荧光PCR法。然后用特定浓度且基因型已知的人类全血g DNA样本作为质控品评价该方法的准确性、灵敏度和特异性。最后用100例临床样本验证该方法的临床适用性,并与直接测序结果进行比较,计算Kappa值。结果:建立的CYP2C19基因多态性检测PCR-荧光探针法,能准确地检测出CYP2C19*2、*3和*17多态性位点杂合突变型和纯合突变型;灵敏度为每个反应体系约1 ng;以基因型已知为野生型的全血g DNA为模板进行检测的结果显示均为野生型。临床样本的检测结果显示与测序结果的一致性较好,Kappa值为1.00。结论:建立的CYP2C19基因多态性检测方法具有很好的准确性、灵敏度和特异性,且具有很好的临床适用性,可以用于CYP2C19代谢的药物疗效的预测。 展开更多
关键词 基因多态性检测 细胞色素P450 S-美芬妥英-4-羟化酶 CYP2C19酶 荧光聚合酶链式反应 PCR-荧光探针法 药物疗效检测
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ROS1融合基因检测方法的建立
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作者 黄杰 朱毅 +4 位作者 于婷 张喆 李丽琼 高尚先 曲守方 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1623-1628,共6页
目的:建立检测ROS1融合基因的荧光PCR法,为肺癌病人的个体化药物治疗提供新的检测试剂盒。方法:根据人类ROS1基因的外显子和融合伙伴基因的外显子序列设计引物和探针,建立ROS1融合基因的荧光PCR法。然后采用不同ROS1基因融合的假病毒质... 目的:建立检测ROS1融合基因的荧光PCR法,为肺癌病人的个体化药物治疗提供新的检测试剂盒。方法:根据人类ROS1基因的外显子和融合伙伴基因的外显子序列设计引物和探针,建立ROS1融合基因的荧光PCR法。然后采用不同ROS1基因融合的假病毒质粒作为质控品,评价方法的准确性、检测限和特异性。检测350例临床样本,并与直接测序结果进行比较,评价方法的临床适用性。结果:建立的ROS1融合基因PCR-荧光探针法,能准确检测出14种不同的ROS1融合基因;检测限是不高于总量0.01μg的RNA模板;正常人RNA的结果显示为融合突变阴性。临床样本的结果与测序结果的一致性好,Kappa值为1.00。结论:建立的ROS1融合基因检测方法具有很好的准确性、检测限和特异性,并且具有很好的临床适用性。 展开更多
关键词 肺癌驱动基因 ROS1原癌基因 融合基因 荧光聚合酶链式反应 个体化靶向治疗
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